湯紅玲 鄭金水 黃枝英 陳丹心 鄭凱玲

摘 要：在無(wú)外源生長(zhǎng)素條件下，以粉冠軍紅掌無(wú)菌苗為試材，研究芽大小、6-芐氨基嘌呤（6-BA）和活性炭（AC）對(duì)紅掌芽生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：芽大小對(duì)紅掌的出愈率、腋芽率和腋芽數(shù)的影響不顯著，長(zhǎng)芽生根數(shù)顯著或極顯著高于短芽。在添加6-BA 0.25～1.00 mg·L-1條件下，粉冠軍紅掌長(zhǎng)芽生根率極顯著高于短芽，短芽新葉數(shù)極顯著高于長(zhǎng)芽。單獨(dú)使用6-BA 0.25～1.00 mg·L-1 時(shí)，長(zhǎng)芽鮮愈量極顯著高于短芽，而且紅掌的出愈率、鮮愈量、腋芽率、腋芽數(shù)和新葉數(shù)極顯著提高，生根率極顯著降低，生根數(shù)顯著或極顯著降低。AC 1.0 g·L-1對(duì)試驗(yàn)指標(biāo)無(wú)顯著性影響，但能使6-BA 0.25～1.00 mg·L-1無(wú)法正常發(fā)揮作用。綜上所述，在無(wú)外源生長(zhǎng)素條件下，芽大小、6-BA和AC對(duì)粉冠軍紅掌芽的生長(zhǎng)均有一定的影響，在紅掌組織培養(yǎng)上要慎用AC。

關(guān)鍵詞：紅掌;組織培養(yǎng);芽的大小;6-BA;活性炭

中圖分類(lèi)號(hào)：S 682.1+4? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? 文章編號(hào)：0253-2301（2022）01-0018-06

DOI： 10.13651/j.cnki.fjnykj.2022.01.004

Effects of Bud Size， 6-BA and Activated Charcoal on the Bud Growth of Anthurium Andraeanum

TANG Hong-ling， ZHENG Jin-shui， HUANG Zhi-ying， CHEN Dan-xin， ZHENG Kai-ling

（Quanzhou Institute of Agricultural Science， Quanzhou， Fujian 362212， China）

Abstract： By taking the aseptic seedlings of Anthurium andraeanum ′Pink Champion′ as the test materials， the effects of the bud size， different concentrations of 6-Benzylaminopurine （6-BA） and activated charcoal （AC） on the bud growth of Anthurium andraeanum were studied under the condition of no exogenous auxin. The results showed that the size of bud had no significant effect on the callus rate， axillary bud rate and axillary bud number of Anthurium andraeanum， while the rooting number of long bud was significantly or extremely significantly higher than that of short bud. Under the condition of adding 0.25-1.00 mg·L-1 6-BA， the rooting rate of long bud was extremely significantly higher than that of short bud， and the number of new leaves of short bud was extremely significantly higher than that of long bud. When only adding 0.25-1.00 mg·L-1 6-BA，the fresh callus amount of long bud was extremely significantly higher than that of short bud， and the callus rate， fresh callus amount， axillary bud rate， axillary bud number and new leaf number of Anthurium andraeanum was extremely significantly increased， while the rooting rate was extremely significantly decreased and the rooting number of Anthurium andraeanum was significantly or extremely significantly decreased. 1.0 g·L-1 AC had no significant effect on the test indexes， but could make 0.25-1.00 mg·L-1 6-BA function normally. In conclusion， under the condition of no exogenous auxin， the bud size， 6-BA and AC had certain effects on the bud growth of Anthurium andraeanum， and AC should be cautiously used in the tissue culture of Anthurium andraeanum.Key words： Anthurium andraeanum; Tissue culture; Bud size; 6-BA; Activated charcoal

紅掌Anthurium andraeaum Lind.為天南星科花燭屬多年生常綠草本植物。關(guān)于紅掌組織培養(yǎng)影響因素的報(bào)道主要集中在外植體類(lèi)型[1-13]、 基本培養(yǎng)基種類(lèi)[3，6-7，10-11，14-20]和激素組合[1-8，10-16，18，21-25]等，大多數(shù)試驗(yàn)中添加了外源生長(zhǎng)素。鄭學(xué)平等[5]認(rèn)為紅掌短芽（≤1 cm）增殖系數(shù)高于長(zhǎng)芽（>1 cm）。單獨(dú)使用6-BA能夠誘導(dǎo)紅掌愈傷組織[1，3-4，15，18，22]和芽的產(chǎn)生并提高芽的數(shù)量[23，26]，0.5～8.0mg·L-1 6-BA濃度范圍內(nèi)紅掌不定芽葉片數(shù)隨著6-BA濃度的增加呈現(xiàn)先增加后下降的趨勢(shì)[26]，且高濃度6-BA能夠促進(jìn)紅掌愈傷組織增殖[17]。束曉春等[13]認(rèn)為適當(dāng)降低6-BA濃度有利于紅掌不定芽的分化，以添加0.8 mg·L-1 6-BA的增殖系數(shù)最高且生長(zhǎng)狀態(tài)好。周志雁等[25]認(rèn)為6-BA能促進(jìn)紅掌叢生芽增重和小苗增高。但也有人認(rèn)為單獨(dú)使用6-BA不能誘導(dǎo)產(chǎn)生紅掌愈傷組織[2，14]，而且6-BA對(duì)紅掌的生根有抑制作用[21]。活性炭（AC）具有提供暗環(huán)境作用[27]，但在影響紅掌生根方面卻有不同觀(guān)點(diǎn)，如AC能夠使大量的紅掌根向下生長(zhǎng)[10-11]、AC對(duì)紅掌生根率的影響不大[6，24]、AC有利于提高紅掌生根率[12，19]或AC在0～0.5 g·L-1范圍內(nèi)促進(jìn)根數(shù)增加[6]等。AC還具有吸附作用[27-28]，0.5 g·L-1 AC存在時(shí)濃度低于8.0 mg·L-1的 6-BA可能被吸附而不能發(fā)揮作用[28]，但AC可以逆轉(zhuǎn)6-BA的抑制生根作用[27]。還有研究人員認(rèn)為AC抑制紅掌愈傷組織增殖[16]或有礙紅掌愈傷組織的形成[29]，在6-BA、IBA和AC三因素中AC對(duì)紅掌不定芽分化率的影響最弱[20]等。以往研究報(bào)道中，有關(guān)芽大小[5]、培養(yǎng)基中同時(shí)添加細(xì)胞分裂素和AC[16，20，29]對(duì)紅掌組培苗生長(zhǎng)的影響研究較少。因此，本研究在減少外源生長(zhǎng)素的干擾下，探討芽大小、6-BA、AC對(duì)紅掌組培苗生長(zhǎng)的影響，明確紅掌組培最佳接種芽的大小以及6-BA、AC濃度，旨在為紅掌工廠(chǎng)化育苗提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以粉冠軍紅掌（Anthurium andraeaum ′Pink Champion′）無(wú)菌苗為試驗(yàn)材料，以其無(wú)根頂芽為接種外植體。

1.2 試驗(yàn)方法

采用三因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，無(wú)根頂芽分為主莖長(zhǎng)1.0～1.5 cm帶2～3片葉的長(zhǎng)芽和主莖長(zhǎng)0.2～0.5 cm帶1片葉的短芽，AC設(shè)0、1.0 g·L-1 2個(gè)水平，6-BA設(shè)0、0.25、0.50、0.75和1.00 mg·L-1 5個(gè)水平，共20個(gè)處理，計(jì)算各處理接種90 d后的出愈率、鮮愈重、腋芽率、腋芽數(shù)、新葉數(shù)、生根率和生根數(shù)。每個(gè)處理接種18個(gè)芽，重復(fù)3次，CK1和CK2為在未添加外源激素和AC的空白培養(yǎng)基上分別接長(zhǎng)芽和短芽的對(duì)照處理。試驗(yàn)用培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，添加食用白砂糖30.0 g·L-1和瓊脂7.0 g·L-1，滅菌前調(diào)節(jié)pH值5.8左右，121℃高壓滅菌25 min。培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度

1000～1500 lx，光照時(shí)間14 h·d-1，培養(yǎng)溫度（25±2）℃。

1.3 項(xiàng)目測(cè)定

出愈率（%）=（產(chǎn)生愈傷組織的外植體個(gè)數(shù)/接入的外植體個(gè)數(shù)）×100

鮮愈量（mg）=外植體產(chǎn)生的新鮮愈傷組織總質(zhì)量/接入的外植體個(gè)數(shù)

腋芽率（%）=（產(chǎn)生腋芽的外植體個(gè)數(shù)/接入的外植體個(gè)數(shù)）×100

腋芽數(shù)（個(gè)）=外植體產(chǎn)生的腋芽總個(gè)數(shù)/接入的外植體個(gè)數(shù)

新葉數(shù)（片）=（培養(yǎng)90 d后主莖上完全展開(kāi)的葉片數(shù)-接入時(shí)主莖上完全展開(kāi)的葉片數(shù)）/接入的外植體個(gè)數(shù)

生根率（%）=（生根的外植體數(shù)/接入的外植體個(gè)數(shù)）×100

生根數(shù)（條）=外植體產(chǎn)生的根總數(shù)/接入的外植體個(gè)數(shù)

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2007 對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，采用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和Duncan′s新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（S·E）”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 三因素對(duì)紅掌愈傷組織產(chǎn)生的影響

紅掌在不含6-BA或含AC 1.00 g·L-1的條件下均無(wú)愈傷組織產(chǎn)生，而且無(wú)論6-BA和AC是否添加，長(zhǎng)芽出愈率與短芽出愈率差異均不顯著（表1～3）。在含6-BA 0.25～1.00mg·L-1 而不含AC的條件下，長(zhǎng)芽鮮愈量極顯著高于短芽，6-BA 0.25～1.00 mg·L-1 極顯著地提高紅掌的出愈率和鮮愈量，且在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)鮮愈量隨著6-BA濃度的提高而增加（表2）。結(jié)果表明，芽大小對(duì)紅掌出愈率沒(méi)有影響，但芽大小對(duì)紅掌鮮愈量的影響與6-BA、AC含量有關(guān);6-BA能夠誘導(dǎo)紅掌愈傷組織的產(chǎn)生并增殖，AC不能誘導(dǎo)紅掌產(chǎn)生愈傷組織，而且1.00 g·L-1 AC阻礙了6-BA對(duì)紅掌愈傷組織的促進(jìn)作用。

2.2 三因素對(duì)紅掌腋芽產(chǎn)生的影響

無(wú)論6-BA和AC是否添加，芽大小對(duì)紅掌腋芽率和腋芽數(shù)的影響均不顯著（表1～3）。在不含AC的條件下，0.25～1.00 mg·L-1 6-BA極顯著地提高紅掌的腋芽率和腋芽數(shù)，且腋芽率隨6-BA濃度的提高呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，腋芽數(shù)則隨6-BA濃度的提高而增加（表2）。在不含6-BA的條件下，AC對(duì)紅掌的腋芽率和腋芽數(shù)影響不顯著（表1）。在0.25～1.00 mg·L-1 6-BA條件下，1.00

g·L-1 AC的腋芽率和腋芽數(shù)均極顯著低于未添加AC處理（表3）。結(jié)果表明，6-BA能夠促進(jìn)紅掌腋芽產(chǎn)生和腋芽數(shù)增加，芽大小和AC對(duì)紅掌腋芽率和腋芽數(shù)影響不大，但1.00 g·L-1 AC阻礙了

6-BA對(duì)紅掌腋芽的促進(jìn)作用。

2.3 三因素對(duì)紅掌新葉產(chǎn)生的影響

在不含6-BA的條件下，長(zhǎng)芽新葉數(shù)與短芽新葉數(shù)差異不顯著（表4、表5），AC對(duì)紅掌新葉數(shù)影響也不顯著（表5）。

在6-BA 0.25～1.00 mg·L-1 濃度范圍內(nèi)，短芽新葉數(shù)極顯著高于長(zhǎng)芽，6-BA能極顯著地提高紅掌新葉數(shù)，而且新葉數(shù)隨著6-BA濃度的提高呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)（表6、表7）;1.00 g·L-1 AC的新葉數(shù)則極顯著低于未添加AC處理 （表7）。結(jié)果表明，芽大小對(duì)紅掌新葉數(shù)的影響與6-BA和AC含量有關(guān)，6-BA能促進(jìn)紅掌新葉的產(chǎn)生，AC對(duì)紅掌新葉數(shù)影響不大，但AC 1.00 g·L-1對(duì)6-BA的促進(jìn)作用有影響。

2.4 三因素對(duì)紅掌生根的影響

在不含6-BA的條件下，無(wú)論是否添加AC，紅掌生根率均為100%（表4、表5）。1.00 mg·L-1 6-BA生根率極顯著低于其他試驗(yàn)濃度6-BA處理;在（0.25～1.00）mg·L-1 6-BA條件下，長(zhǎng)芽生根率極顯著高于短芽（表6、表7），1.0 g·L-1 AC生根率極顯著高于未加AC處理（表7）。結(jié)果表明，紅掌極易生根，芽大小對(duì)紅掌生根率的影響與6-BA和AC含量有關(guān)， 6-BA能夠降低紅掌生根率，AC對(duì)紅掌生根率無(wú)明顯影響，但1.0 g·L-1 AC能夠阻礙6-BA對(duì)紅掌生根數(shù)的影響。

無(wú)論是否添加6-BA和AC，長(zhǎng)芽生根數(shù)顯著或極顯著高于短芽（表4～7）。在不含6-BA條件下，AC對(duì)紅掌生根數(shù)影響不顯著（表5）。當(dāng)添加6-BA 0.25～1.00 mg·L-1 時(shí)，1.0 g·L-1 AC生根數(shù)顯著高于未添加AC處理（表7）。在不添加AC條件下，6-BA 1.00 mg·L-1 生根數(shù)顯著或極顯著低于6-BA 0～0.75 mg·L-1 （表7）。當(dāng)1.0 g·L-1 AC存在時(shí)，不同濃度6-BA處理的生根數(shù)差異不顯著（表7）。結(jié)果表明，長(zhǎng)芽比短芽更有利于增加紅掌根數(shù)，在不含AC時(shí)6-BA 1.00 mg·L-1極顯著顯降低紅掌生根數(shù)， AC對(duì)紅掌生根數(shù)影響不大，但1.0 g·L-1 AC能夠阻礙6-BA 1.0 mg·L-1對(duì)紅掌生根數(shù)的影響。

3 結(jié)論

紅掌愈傷組織可以分化成不定芽，通過(guò)對(duì)愈傷組織和芽的增殖能夠達(dá)到擴(kuò)大繁殖紅掌苗的目的。本試驗(yàn)結(jié)果表明，芽大小對(duì)紅掌的出愈率、腋芽率和腋芽數(shù)均無(wú)顯著性影響，在含6-BA 0.25～1.00 mg·L-1而不含AC的條件下長(zhǎng)芽鮮愈量極顯著高于短芽，這與鄭學(xué)平等[5]認(rèn)為紅掌短芽增殖系數(shù)高于長(zhǎng)芽的觀(guān)點(diǎn)不一致。芽大小對(duì)紅掌生根率、新葉數(shù)和鮮愈量的影響效果與6-BA、AC含量有關(guān)，長(zhǎng)芽較短芽更有利于增加紅掌生根數(shù)，這些結(jié)論在所查閱的文獻(xiàn)中未見(jiàn)到報(bào)道。單獨(dú)使用6-BA 0.25～1.00 mg·L-1可提高紅掌的出愈率、鮮愈量、腋芽率、腋芽數(shù)和新葉數(shù)，降低紅掌生根率以及紅掌生根數(shù)。6-BA具有促進(jìn)植物細(xì)胞分裂的作用，在紅掌愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽分化及增殖過(guò)程中常用，而AC 1.0 g·L-1影響6-BA 0.25～1.00 mg·L-1正常發(fā)揮作用。因此，在紅掌愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽分化及增殖過(guò)程中應(yīng)盡量少用AC。AC對(duì)試驗(yàn)考察指標(biāo)影響不顯著，這與前人在紅掌生根[6，12，19，24]、誘導(dǎo)愈傷組織[16，29]和促芽[20]等方面的觀(guān)點(diǎn)不同。本試驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，紅掌在無(wú)外源生長(zhǎng)素條件下也能生根，添加AC 1.0 g·L-1則能使紅掌根向下生長(zhǎng)而且植株生長(zhǎng)更粗壯。綜上分析表明在紅掌組織培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)充分考慮影響紅掌苗生長(zhǎng)的各種因素，慎用活性炭，才能達(dá)到預(yù)期的培養(yǎng)目的。

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（責(zé)任編輯：林玲娜）

收稿日期：2021-12-19

作者簡(jiǎn)介：湯紅玲，女，1975年生，碩士，副研究員，主要從事園藝植物組培、栽培與育種研究。

基金項(xiàng)目：福建省科技計(jì)劃引導(dǎo)性項(xiàng)目（2019N0048）。

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