徐寧寧

(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇 徐州 221006)

蒲地藍(lán)膠囊主要由黃芩、板藍(lán)根、苦地丁、蒲公英四味藥材提取精制而成，具有清熱解毒，抗炎消腫的作用。用于癤腫、腮腺炎，咽炎、淋巴腺炎、扁桃腺炎等。該品種收載于《中華人民衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第三冊(cè)(WS3-B-0649-91)。

黃芩又名山茶根，是唇形科植物，為多年生草本，入藥部位為根部，味苦、性寒 ，功效較多，清熱燥濕、止血安胎、解毒瀉火等。經(jīng)研究，得知黃芩根部含多種黃酮類化合物，具有抗菌、抗真菌、抗病毒等多種藥理作用。板藍(lán)根為菘藍(lán)屬植物，十字花科，地上部分為大青葉，地下根為板藍(lán)根。主要?dú)w心、肝、胃經(jīng)，味苦性寒，可以清熱解毒、涼血利咽等。在臨床上可用于治療頭痛發(fā)熱、水痘、肝炎、咽炎以及流行性感冒等。蒲公英為菊科植物，入藥部位為干燥全草，性寒，味苦、甘，具有清熱消腫、解毒散結(jié)、利尿通淋的功效。主要成分含有蒲公英甾醇、豆甾醇、蒲公英賽醇、谷甾醇、有機(jī)酸、膽堿、菊糖以及橡膠等。紫花地丁系堇菜科多年生草本植物，主要以全草人藥，用于抗菌消炎，清熱解毒，涼血消腫。本文通過(guò)研究蒲地藍(lán)處方中幾味藥材的處理及提取、顆粒的制備、膠囊的成型等,確定其制備的工藝，為其制劑進(jìn)一步的藥效和臨床研究奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：T6；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R系列：上海申生科技有限公司；多用真空泵：SHZ-DⅢ循環(huán)水式，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；FA-220413型電子天平。

1.2 試藥

黃芩、板藍(lán)根、蒲公英、紫花地丁等藥材均購(gòu)于徐州陳雷醫(yī)藥連鎖有限公司。對(duì)照品(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.0% ,上海西寶生物科技有限公司 )；其他試劑均為分析純；水為校制水車間生產(chǎn)的純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 工藝路線設(shè)計(jì)

通過(guò)分析處方中藥材的有效成分，結(jié)合相關(guān)的文獻(xiàn)，將本膠囊的制備工藝路線擬確定為：將黃芩藥材洗凈置烘箱中充分干燥后，用高速萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎成細(xì)粉，過(guò)100目篩，備用。蒲公英、苦地丁加水煎煮二次，濾過(guò)，合并濾液，備用。板藍(lán)根加水溫浸濾過(guò)，合并濾液，加入上述水提取液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.30～1.34 (50℃)的稠膏，加黃芩細(xì)粉，減壓干燥至干，粉碎，混勻，充填，然后進(jìn)行下一步的包裝。

2.2 粉碎工藝考察

按處方量稱取黃芩藥材，快速進(jìn)行漂洗，于60℃下低溫干燥后，稱取3份，粉碎，過(guò)100目篩，稱量，算出出粉率，結(jié)果見(jiàn)下表1。

表1 黃芩粉碎過(guò)程中的出粉率

由表1可見(jiàn) ，黃芩藥材粉碎后的平均出粉率為92.8%，因其含有部分纖維所致，投料時(shí)，黃芩的量要稍高于配方量，以保證投料的準(zhǔn)確性。

2.3 水提取工藝

蒲公英、紫花地丁和板藍(lán)根加水煎煮提取其有效成分，提取過(guò)程涉及的各項(xiàng)參數(shù)通過(guò)多因素的正交試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行優(yōu)選。最終以濃縮后的干稿收率以及蒲公英和紫花地丁中的總黃酮的量作為指標(biāo)，從而選出最佳的工藝參數(shù)。

2.3.1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

藥材的水提取過(guò)程中，常見(jiàn)的影響提取效果的因素有溶劑的用量、浸泡的時(shí)間、提取的時(shí)間和提取的次數(shù)，確定這四個(gè)因素，每個(gè)因素再設(shè)計(jì)3個(gè)水平，因素與水平見(jiàn)表2。

2.3.1.1 干浸膏測(cè)定

2.3.1.2 含量測(cè)定

標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備: 將蘆丁對(duì)照品在120℃下干燥至恒重，精密稱取10.0 mg于燒杯中，加入10mL甲醇攪拌至溶解,轉(zhuǎn)移至100mL的容量瓶中，定容，搖勻即得蘆丁對(duì)照品溶液(含蘆丁量為0.1mg/mL) 。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密量取上述蘆丁對(duì)照品溶液0.0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL ,分別置7個(gè)10mL的容量瓶中,依次加入0.4 mL 5%亞硝酸鈉溶液，搖勻，放置6 min；加入0.4mL 10 %氯化銀溶液，搖勻后放置6min；再加4 mL 4%氫氧化鈉溶液，最后用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻后放置15min。以0.0mL樣品為空白 ,在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以濃度(C)作為橫坐標(biāo)，吸光度(A)作為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程A=1.0446C + 0.0106 ，r=0.9997 ，線性范圍為0.005～0.050mg/mL。

樣品處理：精密量取0.5mL供試品溶液,分別置10mL容量瓶中,按順序依次加入0.4mL 5%亞硝酸鈉溶液,搖勻后放置6min；加入0.4 mL 10%氯化銀溶液，搖勻后放置6 min；再加4mL 4%氫氧化鈉溶液，最后用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻后放置15 min。將相應(yīng)溶液稀釋后作為空白液,在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度,每個(gè)樣品重復(fù)3次,根據(jù)回歸方程計(jì)算總黃酮的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù),結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表

表3 水提取工藝的正交試驗(yàn)結(jié)果表

表4 干浸膏方差分析表

Fo。os(2，4)=6.94； F0。01(2，4)=18.00；＊：具顯著性

表5 總黃酮的量方差分析表

Fo。os(2，4)=6.94； F0。01(2，4)=18.00； ＊＊：具顯著性

2.3.1.3 正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果

分析表4、表5可知，四個(gè)因素中，以干膏的量作為評(píng)價(jià)依據(jù)時(shí)，最合理的提取工藝為A2B2C3D2；以總黃酮的含量進(jìn)行評(píng)價(jià)，最佳的提取工藝為A3B2C2D2，；經(jīng)方差分析知只有D因素(提取的次數(shù))對(duì)干膏量以及總黃酮的含量影響較大，而其余因素對(duì)干膏量以總黃酮的含量都影響不大；最終將水提取工藝確定為A2B2C2D2，即加入10倍量的水，浸泡1h，煎煮1h，煎煮2次。

2.4 成型工藝考察

2.4.1 潤(rùn)濕劑考察

將干膏粉與黃芩細(xì)粉混合均勻，平均取4份，每份200g，分別用65%，75%，85%，95%的乙醇進(jìn)行制粒，經(jīng)比較，85%的乙醇為潤(rùn)濕劑時(shí)，制備出來(lái)的顆粒，成型性好，細(xì)粉少。

2.4.2 干顆粒流動(dòng)性的測(cè)定

在固體制劑制備過(guò)程中，干顆粒的流動(dòng)性是?？疾斓姆浅Ｖ匾男再|(zhì)。顆粒的流動(dòng)性不好，會(huì)直接影響正常的生產(chǎn)，最終影響制劑的重量差異及含量均勻度等。流動(dòng)性一般用休止角來(lái)表示，休止角越大，流動(dòng)性就越差。通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定，本實(shí)驗(yàn)制備的干顆粒平均休止角為38.0,表明干顆粒的流動(dòng)性良好。

2.4.3 膠囊裝量確定

膠囊的裝量根據(jù)處方工藝相關(guān)條件數(shù)據(jù)來(lái)計(jì)算。配方中黃芩細(xì)粉粉碎后為135g；提取部分：水提藥材量為586g，干膏量約55g，共得總量約為200g，共制成膠囊500粒，每粒裝量約為0.40 g。

2.4.4 空心膠囊型號(hào)的選擇

空心膠囊的型號(hào)根據(jù)所制備藥物顆粒的堆密度與膠囊的容積來(lái)確定。堆密度的測(cè)定采用體積質(zhì)量比法進(jìn)行。結(jié)果表明，干顆粒堆密度為 0.503 1g/mL,裝量為 0.4 g/粒，根據(jù)空膠囊號(hào)碼和近似容量的關(guān)系圖，可以確定選用0號(hào)膠囊。

3 結(jié)論

根據(jù)以上研究結(jié)果將本產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝確定為：黃芩、蒲公英、紫花地丁、板藍(lán)根4味藥材，經(jīng)凈制、檢驗(yàn)合格后待用。取黃芩藥材快速漂洗后，60℃干燥后粉碎，過(guò)100目篩，收取135g細(xì)粉。將板藍(lán)根、蒲公英、紫花丁地加10倍量體積的水，浸泡1h，煎煮1h，煎煮2次，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.30～1.34(50℃)的稠膏，減壓干燥，粉碎，過(guò)80目篩，備用。將上述干膏粉加入黃芩細(xì)粉，用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇制軟材，16目篩制粒，55～60 ℃干燥,14 目篩整粒，裝入0號(hào)膠囊，拋光、檢驗(yàn)、包裝、即得成品(每粒裝 0.4 g)。