王蓀璇，劉雪峰，王嫦鶴，妙 苗，繩金房

（陜西省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院，陜西 西安 710065）

長春西汀是從長春花植物（小蔓長春花）提取的生物堿，化學(xué)名為乙基阿樸長春胺-22-醋酸乙酯[1]。托吡酯為天然單糖基右旋果糖硫化物，化學(xué)名為2，3，4，5-雙-氧-（1-甲基亞乙基）- β-D-吡喃果糖氨基磺酸酯。鹽酸尼卡地平化學(xué)名為2，6-二甲基-4-（3′-硝基苯基）-1，4-二氫吡啶-3，5-二羧酸，3- [ β-（N-芐基-N-甲基氨基）] -乙酯-5-甲酯鹽酸鹽。甲磺酸伊馬替尼化學(xué)名為4-（4-甲基-1-哌嗪）甲基-N-4-甲基-3-4-（3-吡啶）-2-嘧啶氨基苯基-苯甲酰胺甲磺酸鹽。鹽酸多奈哌齊化學(xué)名為（±）2，3-二氫-5，6-雙甲氧基-2- ｛[（1-苯甲基）-4-哌啶基]甲基｝ -1H-茚-1-酮鹽酸鹽。過渡金屬鈀或鎳作為催化劑，常應(yīng)用于偶聯(lián)反應(yīng)。偶聯(lián)反應(yīng)的反應(yīng)條件溫和，官能團容忍性好，產(chǎn)率高，已成為構(gòu)建碳-碳鍵及合成聯(lián)芳類化合物的重要手段[2-4]。近年來，關(guān)于對重金屬鈀廣泛應(yīng)用于藥物、天然產(chǎn)物或功能材料的合成研究逐漸增多[5-6]，口服重金屬鈀毒性很小，但其靜脈注射毒性較口服毒性約大70 倍。本課題組建立了相關(guān)動物模型，發(fā)現(xiàn)大鼠靜脈注射氯化鈀（PdCl3）的半數(shù)致死量（LD50）為3 mg/kg，動物靜脈注射或腹腔注射鈀鹽可產(chǎn)生蛋白尿和酮體尿陽性。本研究中建立了檢測長春西汀等5 種原料藥中催化劑鈀殘留的電感耦合等離子體-質(zhì)譜（ICP-MS）法?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Thermo icAP RQ 型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國熱電公司）；ME204 型電子分析天平（萬分之一，梅特勒公司）；IKA? C-MAG HP 7 型電熱板（德國艾卡公司）；TTL-10B 型超純水系統(tǒng)（北京同泰聯(lián)科技公司）；石英燒杯。

1.2 試藥

長春西汀原料（A 企業(yè)，批號分別為A01，A02，A03）；托吡酯原料（S 企業(yè)，批號分別為S01，S02，S03）；鹽酸尼卡地平原料（T 企業(yè)，批號分別為T01，T02，T03）；甲磺酸伊馬替尼（Y 企業(yè)，批號分別為Y01，Y02，Y03）；鹽酸多奈哌齊（B 企業(yè)，批號分別為B01，B02，B03）；鈀標準溶液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心，批號分別為GSB 04-1743-2004）；硝酸（色譜級，德國默克公司）；高氯酸（分析級，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；水為高純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 工作條件

射頻功率：1 500 W；等離子氣流量：15 L/min；輔助氣流量：1.02 L/min；泵速：40 r/min；進樣延遲時間：30 s；氧化物：CeO+ /Ce+ ＜2%；雙電荷：Ce+ + /Ce+ ＜2%；測量模式：KED 模式。

2.2 溶液制備

精密量取鈀標準溶液（1 000 μg/mL）適量，用5%硝酸溶液定量稀釋，并制成含鈀元素質(zhì)量濃度分別為0.625，1.250，2.500，5.000，12.500 ng/mL 的溶液，作為標準曲線溶液。稱取原料藥各約0.1 g，精密稱定，置石英燒杯中，加硝酸20 mL，放置電熱板上，以550 ℃加熱溶解后，冷卻至室溫，加高氯酸4 mL，緩慢加熱至體積減少至約2 mL，用高純水沖洗內(nèi)壁，轉(zhuǎn)移至50 mL 容量瓶中，加高純水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。取硝酸20 mL，置石英燒杯中，加高氯酸4 mL，緩慢加熱至體積減少至約2 mL，用高純水沖洗內(nèi)壁，轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，加高純水稀釋到刻度，搖勻，即得空白溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：取標準曲線溶液進樣測定，以鈀響應(yīng)強度（Y）為縱坐標、質(zhì)量濃度（X）為橫坐標進行線性回歸，得線性回歸方程Y=3.2×104X+1.82×102，R2= 0.9998（n=5）。結(jié) 果 表 明，鈀 的 質(zhì) 量 濃 度 在0.625 ～12.5 ng/mL 范圍內(nèi)與響應(yīng)強度線性關(guān)系良好。

檢測限與定量限確定：取空白溶液連續(xù)測定10 次，記錄鈀元素強度，計算10 次空白溶液中鈀元素濃度的標準偏差，以3 倍標準偏差為檢測限，10 倍標準偏差為定量限。結(jié)果鈀元素檢測限為0.003 ng/mL，定量限為0.009 ng/mL。按樣品取樣量0.1 g 計算，供試品的檢測限為1.5 μg/kg，定量限為4.5 μg/kg。

重復(fù)性試驗：取樣品（批號為A02）6 份，稱取0.1 g，精密稱定，置石英燒杯中，照供試品溶液制備方法操作，測定樣品中鈀殘留量。結(jié)果6 份樣品中鈀殘留量均值為222.35 μg/kg，RSD=3.12%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗：取樣品（批號為A02）約0.05 g，精密稱定，加入鈀標準溶液（50 ng/mL）100，200，300 μL，每個質(zhì)量濃度平行制備3 份，照供試品溶液制備方法操作，計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 鈀元素加樣回收試驗結(jié)果（n=9）

2.4 樣品含量測定

分別取樣品，照供試品溶液制備方法操作，測定樣品中鈀殘留量。結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

目前，測定鈀殘留量的方法較多，包括原子吸收光譜法，化學(xué)發(fā)光分析法等[7-10]。其中，原子吸收光譜法操作簡便、快速、準確，應(yīng)用廣泛，但在測定微量及痕量金屬時，干擾較大，檢測限高。ICP-MS 法測定重金屬含量近年來研究與應(yīng)用廣泛，其儀器本身可自動排除共存元素的干擾，具有檢測靈敏度低、精密度高、重復(fù)性好、測定濃度線性范圍寬等優(yōu)點，同時可測定其他多種重金屬含量[11-12]。

《美國藥典》通則＜232＞和＜233＞中收錄了鈀殘留量，規(guī)定日口服劑量不得超過100 μg，同樣推薦使用ICPMS 作為鈀殘留量的檢測方法，其回收率應(yīng)在70% ～150%。本方法的回收率為96.13% ～98.38%，符合藥典要求，可作為原子吸收光譜法的替代和補充。

試驗前期準備時，需對所使用的容量瓶、移液管等用品使用10%硝酸浸泡過夜，將試驗過程中可能帶入的影響降低。在樣品制備過程中，使用石英燒杯與電熱板對樣品進行消解[13-16]，不使用微波消解儀進行消解，操作更簡便，也減少樣品損耗。本研究中建立了5 種原料藥中催化劑鈀的ICP-MS 檢測方法，該方法可為其他原料藥中鈀殘留量的測定提供參考。