賀 欣 邢莉民 邵宗鴻

(天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院血液科，天津 300052)

CD5是一種同時(shí)表達(dá)于T淋巴細(xì)胞和B1a淋巴細(xì)胞表面的大分子跨膜糖蛋白，作為T(mén)淋巴細(xì)胞受體(TCR)信號(hào)通路中的共刺激分子，同時(shí)負(fù)調(diào)控B淋巴細(xì)胞受體(BCR)信號(hào)通路[1]。本文對(duì)CD5參與自身免疫性疾病的發(fā)病過(guò)程綜述如下。

1 CD5概述

CD5的分子量為67 KD，位于人染色體11q12.2區(qū)域。研究發(fā)現(xiàn)約80%～90%CD5表達(dá)于T細(xì)胞，10%～20%CD5表達(dá)于B1a細(xì)胞[2]。小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)表面表達(dá)少量CD5分子，影響DC功能，小鼠巨噬細(xì)胞也可表達(dá)少量CD5，輔助激活固有免疫系統(tǒng)抵抗外界病原體[3,4]。富含半胱氨酸的CD5主要由347個(gè)氨基酸殘基組成的胞外區(qū)和93個(gè)氨基酸殘基組成的胞內(nèi)區(qū)共同構(gòu)成，胞外區(qū)結(jié)構(gòu)中包含3個(gè)富含半胱氨酸結(jié)構(gòu)域和1個(gè)疏水跨膜區(qū)，胞內(nèi)區(qū)主要包含高度保守元件及潛在的酪氨酸和絲氨酸/蘇氨酸磷酸化位點(diǎn)[5]。CD5的配體尚未明確，目前發(fā)現(xiàn)CD5可與多種糖蛋白如gp35-40、gp150和gp200等相互作用。作為清道夫受體家族成員之一，CD5可與真菌細(xì)胞壁的葡聚糖或丙型肝炎病毒等物質(zhì)結(jié)合，提示上述分子均可能是CD5的配體[6]。

CD5的胞質(zhì)尾部具有由蘇氨酸和酪氨酸殘基組成的起激活作用的偽ITAM基序(免疫受體酪氨酸基激活基序)，是非受體酪氨酸激酶Src家族的LcK(lymphocyte-specific protein tyrosine kinase)和Fyn(proto-oncogene tyrosine-protein kinase)等的結(jié)合位點(diǎn)。細(xì)胞膜近端具有起抑制作用的偽免疫受體酪氨酸基抑制基序(ITIM)，與細(xì)胞內(nèi)含SH2域的蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1(SH2-containing tyrosine phosphatase 1,SHP-1)結(jié)合發(fā)揮作用[7]。

2 CD5與T淋巴細(xì)胞

T淋巴細(xì)胞中，CD5胞質(zhì)尾部存在負(fù)向調(diào)控TCR信號(hào)通路的結(jié)構(gòu)域，包括Y429、Y441和Y463，其中Y429和Y441酪氨酸殘基在功能上屬于ITIM基序。CD5羧基末端的S458-S461結(jié)構(gòu)域可與T淋巴細(xì)胞內(nèi)的酪蛋白激酶2(CK2)特異性結(jié)合[8]。過(guò)表達(dá)CD5可通過(guò)IL-6抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子(signal transduction and activator of transcription,STAT)3的磷酸化，增加T淋巴細(xì)胞數(shù)量并改善其功能。CD5抑制IL-4等細(xì)胞因子和PI3K/Akt等途徑，調(diào)控T淋巴細(xì)胞的增殖和凋亡[9]。CD5和T淋巴細(xì)胞CD3交聯(lián)可誘導(dǎo)Bcl-2表達(dá)，Akt下游因子在CD5介導(dǎo)的保護(hù)T淋巴細(xì)胞免受Fas介導(dǎo)凋亡過(guò)程中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)CD5主要依賴TCR介導(dǎo)多種信號(hào)通路調(diào)控CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的增殖和活化功能，CD4+T淋巴細(xì)胞表達(dá)水平比CD8+T淋巴細(xì)胞更高，且更加依賴于TCR信號(hào)[10]。T淋巴細(xì)胞的激活需要CD3和TCR結(jié)合，NFAT因子或Ca2+/鈣調(diào)磷酸酶啟動(dòng)下游NF-κB等核因子，促進(jìn)IL-1和IFN-α等細(xì)胞因子分泌，促進(jìn)T細(xì)胞增殖和分化。位于CD5分子尾部的Y463也可對(duì)CD3-CD5連接酶進(jìn)行磷酸化，促進(jìn)或抑制T淋巴細(xì)胞活化[11]。c-Cbl、RasGAP或PI3K等TCR信號(hào)通路負(fù)調(diào)控相關(guān)蛋白均與CD5尾部包含的429、441或463等酪氨酸殘基密切相關(guān)[12]。利用抗CD5單克隆抗體阻斷CD5可誘導(dǎo)CD8+T淋巴細(xì)胞內(nèi)部的Fas/FasL凋亡。細(xì)胞因子的刺激可下調(diào)CD5表達(dá)，促進(jìn)CD8+T淋巴細(xì)胞增殖，說(shuō)明CD5調(diào)節(jié)CD8+T細(xì)胞表達(dá)并提高其抗原反應(yīng)性[13]。

CK2是絲氨酸/蘇氨酸激酶，通過(guò)磷酸化途徑調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞免疫功能[14]。研究發(fā)現(xiàn)CK2參與STAT3和STAT5激活，是Th17細(xì)胞和Th2細(xì)胞分化的重要因子。CD5-CK2途徑可通過(guò)與TCR信號(hào)相互作用啟動(dòng)后續(xù)激活因子，促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th2和Th17細(xì)胞極化[15]。CD5和CK2結(jié)合后可激活PI3K/Akt通路并負(fù)向調(diào)節(jié)ERK因子的磷酸化，敲除CD5和CK2基因可降低TCR誘導(dǎo)的Akt表達(dá)量[16]。CD5-CK2信號(hào)途徑誘導(dǎo)Akt通路活化，增強(qiáng)Th17細(xì)胞對(duì)IFN-γ的抑制作用，其下游的ERK分子激活介導(dǎo)Th17細(xì)胞分化的mTOR通路，同時(shí)增強(qiáng)Th17細(xì)胞中RORγt因子進(jìn)入細(xì)胞核和激活核內(nèi)因子轉(zhuǎn)錄的功能[17]。因此CK2是CD5啟動(dòng)后調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能和活性的重要分子和下游信號(hào)。

3 CD5與B淋巴細(xì)胞

慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)患者的B淋巴細(xì)胞表面發(fā)現(xiàn)CD5表達(dá)，CD5也存在于健康志愿者的骨髓、脾臟和淋巴結(jié)的B淋巴細(xì)胞亞群中。B淋巴細(xì)胞依據(jù)表面分子分為B1細(xì)胞和B2細(xì)胞(傳統(tǒng)B細(xì)胞)，根據(jù)其是否表達(dá)CD5又可將B1細(xì)胞分為B1a(CD5+B細(xì)胞)和B1b細(xì)胞兩種亞型[18]。CD5+B細(xì)胞可產(chǎn)生低親和力IgM等抗體或分泌IL-10等細(xì)胞因子抵御病原微生物感染，還可產(chǎn)生類風(fēng)濕因子、抗單鏈DNA抗體和抗組蛋白抗體等多種自身抗體，在特異性免疫反應(yīng)中發(fā)揮作用[19]。

B淋巴細(xì)胞中CD5通過(guò)激活肉瘤病毒相關(guān)癌基因同源物(Lyn)等關(guān)鍵酶參與BCR信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，通過(guò)對(duì)BCR胞質(zhì)尾部ITIM磷酸化或與細(xì)胞內(nèi)SHP-1因子結(jié)合等方式負(fù)向調(diào)節(jié)BCR復(fù)合物[20]。研究發(fā)現(xiàn)CD5結(jié)構(gòu)中的Y429和Y441酪氨酸殘基參與抑制BCR信號(hào)[21]。轉(zhuǎn)錄因子E1B是專一表達(dá)于B1a細(xì)胞中CD5的mRNA外顯子，可通過(guò)下調(diào)常規(guī)外顯子E1A數(shù)量影響細(xì)胞表面CD5表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)高水平E1B因子可降低CD5對(duì)BCR復(fù)合體的抑制作用降低，進(jìn)而降低B1a細(xì)胞內(nèi)抗體數(shù)量和抑制其活性[22]。因此CD5在B1a細(xì)胞的內(nèi)部活化調(diào)控過(guò)程中起關(guān)鍵作用。

CD5與BCR復(fù)合物中的CD79a異源二聚體結(jié)合影響B(tài)1a細(xì)胞增殖和凋亡。CD5通過(guò)激活B淋巴細(xì)胞STAT3或NFAT2等，調(diào)控并改變B淋巴細(xì)胞中IgM或IL-10等基因表達(dá)[23]。研究發(fā)現(xiàn)PI3K/mTOR通路主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞的增殖和分化，抑制PI3K因子活性可誘導(dǎo)B1a細(xì)胞凋亡[24]。Ca2+及其通道的動(dòng)員反應(yīng)則可誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子NFAT2活化，與BCR共同作用使NFAT2轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)調(diào)節(jié)IL-2、IL-4、IL-10、TNF-β和IFN-γ等多種靶基因轉(zhuǎn)錄[25]。Toll樣受體(TLR)家族是非特異性免疫的重要蛋白質(zhì)，尤其是TLR7和TLR9作為細(xì)胞內(nèi)受體可在CD5+B細(xì)胞中直接影響細(xì)胞功能和耐受性。TLR7和TLR9與BCR信號(hào)相關(guān)聯(lián)后，促進(jìn)Myd88和NF-κB因子向細(xì)胞核內(nèi)易位[26]。CD5在B1a細(xì)胞中和PI3K/mTOR、Ca2+/NFAT、TLR/Myd88/NF-κB等3種信號(hào)通路均相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)CD5可降低BCR結(jié)合后B淋巴細(xì)胞內(nèi)的Ca2+動(dòng)員，CD5通過(guò)Ca2+依賴途徑促進(jìn)MAPK信號(hào)活化，導(dǎo)致ERK通路磷酸化和IL-10生成[27]。此外CD5還通過(guò)激活關(guān)鍵激酶促進(jìn)PI3K/Akt/mTOR通路激活[28]。說(shuō)明CD5可活化和調(diào)控B1a細(xì)胞中關(guān)鍵信號(hào)通路。

4 CD5在自身免疫性疾病中的作用

4.1CD5與風(fēng)濕性疾病 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是以滑膜炎和軟骨損傷為特征并伴有骨丟失的慢性全身炎癥性疾病，CD5參與RA發(fā)病過(guò)程。CD5通過(guò)調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞因子IL-10或TGF-β的分泌抑制骨吸收并促進(jìn)破骨細(xì)胞增殖[29]。Moura等[30]發(fā)現(xiàn)RA患者CD5+B淋巴細(xì)胞數(shù)量增多，并與RA的疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。通過(guò)基因定位的方法將CD5基因確定為與RA相關(guān)的遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素，同時(shí)發(fā)現(xiàn)CD5+B細(xì)胞數(shù)目和比例可反映RA患者的遺傳背景[31]。目前臨床治療RA的重組人CD22等單克隆抗體主要作用于T淋巴細(xì)胞和CD5+B細(xì)胞，療效較好[32]。提示CD5可能是治療RA等自身免疫性疾病的潛在靶點(diǎn)。

T、B淋巴細(xì)胞在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用，與編碼T淋巴細(xì)胞中TCR相關(guān)基因的突變密切相關(guān)，CD5通過(guò)TCR信號(hào)通路調(diào)控T淋巴細(xì)胞，參與SLE發(fā)病過(guò)程[33]。Omar等[34]發(fā)現(xiàn)SLE患者體內(nèi)CD5+B細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，CD5數(shù)量下調(diào)[34]。研究發(fā)現(xiàn)SLE患者B淋巴細(xì)胞DNA甲基化水平降低，導(dǎo)致B1a細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子E1B數(shù)量增加，降低CD5表達(dá)，而B(niǎo)淋巴細(xì)胞內(nèi)IL-6可降低E1B因子轉(zhuǎn)錄[35]。因此抗IL-6單克隆抗體治療SLE可為CD5調(diào)控B淋巴細(xì)胞活性提供證據(jù)。

4.2CD5與胰島素依賴型糖尿病 胰島素依賴型糖尿病又稱1型糖尿病，主要由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的胰島β細(xì)胞破壞從而導(dǎo)致胰島素絕對(duì)缺乏所致。CD5在胰島素依賴型糖尿病發(fā)病過(guò)程中調(diào)控B淋巴細(xì)胞。Saxena等[36]發(fā)現(xiàn)1型糖尿病患者血液中檢測(cè)出胰島細(xì)胞抗體和谷氨酸脫羧酶抗體等多種自身免疫抗體，并且與CD5+B細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)。Vonberg等[37]發(fā)現(xiàn)CD5在1型糖尿病患者B細(xì)胞中促進(jìn)IL-10等免疫因子分泌。Schuldt等[38]發(fā)現(xiàn)自身免疫性糖尿病模型小鼠中CD5通過(guò)Treg細(xì)胞中TCR復(fù)合物調(diào)控胰島β細(xì)胞數(shù)量和功能?？笴D5免疫療法對(duì)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的1型糖尿病具有一定療效，靶向抗CD5分子的治療方法是其潛在治療策略，但尚需深入臨床研究。

4.3CD5與自身免疫性血細(xì)胞減少癥 自身免疫性血細(xì)胞減少癥是由免疫異常、免疫失耐受導(dǎo)致的自身免疫性疾病，分為以B淋巴細(xì)胞分泌自身抗體損傷血細(xì)胞為主和T淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子損傷血細(xì)胞為主的血細(xì)胞減少。由B淋巴細(xì)胞引起的自身免疫性血細(xì)胞減少癥包括自身免疫性溶血性貧血(AIHA)、免疫性血小板減少癥(ITP)、Evans綜合征和免疫相關(guān)性全血細(xì)胞減少癥(IRP)等，CD5+B淋巴細(xì)胞在此類疾病中起重要作用[39]。

AIHA是體內(nèi)免疫功能紊亂，產(chǎn)生自身抗體或補(bǔ)體吸附于紅細(xì)胞表面并通過(guò)抗原抗體反應(yīng)加速紅細(xì)胞破壞而引起的溶血性貧血[40]。AIHA患者外周血中B細(xì)胞和CD5+B細(xì)胞數(shù)量增多，且CD5+B細(xì)胞數(shù)量與補(bǔ)體C3呈負(fù)相關(guān)，與間接膽紅素呈正相關(guān)，與Evans綜合征患者血小板抗體PAIgG和PAIgM均呈正相關(guān)，說(shuō)明CD5+B細(xì)胞的數(shù)量與AIHA的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，與臨床療效呈負(fù)相關(guān)[41]。Zhu等[42]研究發(fā)現(xiàn)AIHA患者CD5+B細(xì)胞處于活化狀態(tài)，其表面的活化分子既與CD5-B細(xì)胞不同，也與CLL克隆性CD5+B細(xì)胞不同，CD5+B細(xì)胞表面主要表達(dá)CD80和CD86，而CD40和CD69在CD5+和CD5-B細(xì)胞表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Zhao等[43]發(fā)現(xiàn)AIHA和Evans綜合征患者的CD5+B細(xì)胞主要通過(guò)分泌免疫因子IL-10而不是TGF-β1誘導(dǎo)疾病發(fā)生。B細(xì)胞亞群BCR信號(hào)通路下游的關(guān)鍵分子主要為Bruton酪氨酸激酶(BTK)及磷酸化BTK(p-BTK)，B細(xì)胞亞群內(nèi)BTK表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但是CD5+B細(xì)胞內(nèi)p-BTK的水平明顯高于CD5-B細(xì)胞，且與IgE水平呈正相關(guān)[44]。因此AIHA患者CD5+B細(xì)胞數(shù)量增加、活性異常、分泌IL-10功能增強(qiáng)、BCR信號(hào)通路異常，且CD5+B、CD5-B細(xì)胞存在差異。

ITP是以血小板減少、骨髓巨核細(xì)胞正常或增多、成熟障礙且原因不明為特征的免疫性血小板減少癥。研究發(fā)現(xiàn)ITP患者外周血CD5+B細(xì)胞數(shù)量和血清IL-10表達(dá)降低，給予大劑量地塞米松可糾正其CD5+B細(xì)胞數(shù)量及IL-10因子分泌能力[45]。Gudbrandsdottir等[46]研究發(fā)現(xiàn)使用利妥昔單抗和地塞米松進(jìn)行聯(lián)合治療后，更加調(diào)節(jié)和改善ITP患者骨髓內(nèi)CD5+B細(xì)胞的數(shù)量和功能。

IRP是由于抗骨髓造血細(xì)胞的自身抗體抑制和骨髓造血細(xì)胞破壞引起外周血細(xì)胞降低的自身免疫性血細(xì)胞減少性疾病，Shao等[47]應(yīng)用骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC)懸液BMMNC-Coombs試驗(yàn)通過(guò)證實(shí)IRP的發(fā)病機(jī)制可能與異常免疫介導(dǎo)的造血細(xì)胞破壞有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)IRP由于體內(nèi)B淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)而分泌多種類型的針對(duì)骨髓造血功能自身抗體從而破壞或抑制骨髓造血細(xì)胞最終引起外周血細(xì)胞減少。CD5+B細(xì)胞數(shù)量增多且功能亢進(jìn)，凋亡相關(guān)指數(shù)明顯降低，說(shuō)明CD5+B淋巴細(xì)胞在IRP發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用[48]。因此誘導(dǎo)CD5+B淋巴細(xì)胞凋亡，或下調(diào)CD5分子活性可環(huán)節(jié)免疫性血細(xì)胞減少癥患者病情。采用基因敲除法消除CD5+B細(xì)胞或直接敲除B細(xì)胞中的CD5分子可用于該類疾病治療。CD5分子在免疫性血細(xì)胞減少癥中如何對(duì)CD5+B細(xì)胞進(jìn)行更深層次的調(diào)控有待進(jìn)一步研究。

5 展望

CD5作為大分子糖蛋白，可在免疫過(guò)程中促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖和活化，輔助T淋巴細(xì)胞發(fā)揮調(diào)節(jié)功能，并且激活B1a細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子和自身抗體。自身免疫性疾病主要包括RA、SLE、胰島素依賴性糖尿病和自身免疫性血細(xì)胞減少癥等，與T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的數(shù)量和活性密切相關(guān)。CD5分子既可協(xié)助T細(xì)胞調(diào)節(jié)自身免疫性疾病的多種免疫平衡，又可以在B細(xì)胞中產(chǎn)生自身抗體清除部分自身病理性抗原，參與各種自身免疫性疾病發(fā)病過(guò)程。針對(duì)CD5分子的靶向治療藥物將成為新的免疫治療方法和研究方向。