李潔

(夏邑縣人民醫(yī)院 感染內(nèi)科，河南 商丘 476400)

乙型肝炎在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率較高，有研究顯示每年因乙型肝炎病毒而出現(xiàn)終末期肝硬化和肝癌的患者所占比例為15%～25%，因此需盡早診斷乙型肝炎病毒感染，實(shí)施相應(yīng)的治療干預(yù)[1]。乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)和HBV DNA檢測(cè)屬于目前檢測(cè)乙型肝炎病毒的主要方法[2]。本研究應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫測(cè)定法和熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)量乙型肝炎患者機(jī)體血清HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb及HBV DNA水平，并檢測(cè)HBcAb IgM陽(yáng)性患者血清HBV-DNA水平，探討乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV DNA水平的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月至2019年1月夏邑縣人民醫(yī)院收治的250例乙型肝炎患者，其中男176例，女74例，年齡13～69歲，平均(42.6±5.8)歲，慢性乙型肝炎患者223例，HBcAb IgM陽(yáng)性乙肝患者27例。確診為乙型肝炎，排除嚴(yán)重肝腎疾病及腫瘤疾病患者?；颊咦栽竻⑴c本研究并簽署知情同意書。本研究經(jīng)夏邑縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 檢測(cè)方法首先測(cè)量患者HBV M水平，所用測(cè)量?jī)x器為荷蘭Philips公司生產(chǎn)的HKDHG5500型自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀，定期檢測(cè)HBV M水平，所應(yīng)用的檢測(cè)試劑為儀器配套試劑。各項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為：HBsAg在50 IU·L-1及以上；HBeAg在1 S/CO及以上；HBcAb在1 S/CO及以上；HBsAb在10 IU·L-1及以上；HBeAb在1 S/CO及以下；HBcAb IgM在1 S/CO及以上。在檢測(cè)HBsAg時(shí)，采用試劑盒稀釋液進(jìn)行500倍稀釋后進(jìn)行檢測(cè)。然后開展HBV DNA定量檢測(cè)，HBV DNA水平檢測(cè)方法為FQ-PCR法，試劑盒購(gòu)自上海斯諾科基因有限責(zé)任公司，儀器為美國(guó)GE公司生產(chǎn)的6300T RCR System。對(duì)參數(shù)做如下設(shè)置。93 ℃，2 min；93 ℃，45 s；55 ℃，1 min。10個(gè)循環(huán)。93 ℃，30 s；55 ℃，45 s。30個(gè)循環(huán)。在完成反應(yīng)過程后，在Analysis菜單下，選擇Analyze，使儀器自動(dòng)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，按照儀器和試劑盒說(shuō)明書開展詳細(xì)操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，乙型肝炎患者HBV M水平和HBV DNA水平、HBcAb IgM和HBV DNA水平采用Pearson相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 慢性乙型肝炎患者HBV M水平和HBV DNA水平相關(guān)性分析HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者血清中HBsAg、HBeAg水平均與HBV DNA水平呈正相關(guān)(r1=0.541，r2=0.599，均P<0.05)；HBcAb、HBeAb水平均與HBV DNA水平無(wú)關(guān)(r1=0.060，r2=0.114，均P>0.05)。

2.2 乙肝患者HBcAb IgM和HBV DNA水平相關(guān)性分析HBcAb IgM陽(yáng)性患者HBcAb IgM水平和HBV DNA水平無(wú)關(guān)(r=0.171，P=0.217)。

3 討論

HBV DNA水平可直接體現(xiàn)乙型肝炎病毒復(fù)制程度，其在乙型肝炎病情的早期診斷和療效觀察中發(fā)揮重要作用。本研究通過對(duì)單項(xiàng)HBV M水平和HBV DNA水平進(jìn)行相關(guān)性分析后發(fā)現(xiàn)，HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者血清中，HBsAg、HBeAg水平均與HBV-DNA水平呈正相關(guān)，這也和曹東華等[3]研究報(bào)道相符。HBsAg雖然屬于乙型肝炎病毒感染的標(biāo)志物，但該標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)，并無(wú)法排除乙型肝炎病毒感染。不同于HBsAg，HBeAg在HBsAg陽(yáng)性患者機(jī)體血清中存在，若患者機(jī)體血清HBeAg結(jié)果為陽(yáng)性，則提示其機(jī)體內(nèi)乙型肝炎病毒復(fù)制和傳染性均較強(qiáng)，是體現(xiàn)乙型肝炎病毒復(fù)制的重要血清標(biāo)志物。HBeAg、HBV DNA水平盡管都能有效反映乙型肝炎病毒在機(jī)體內(nèi)復(fù)制的活躍度，但在不同的乙型肝炎病毒基因型中其水平或許存在一定差異。

本研究結(jié)果顯示，HBcAb、HBeAb水平均與HBV DNA水平無(wú)關(guān)，但該結(jié)果無(wú)法說(shuō)明HBcAb、HBeAb水平與HBV DNA的水平無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。HBeAg病毒可能被免疫清除或病毒處于靜息狀態(tài)，但仍可復(fù)制。HBcAg來(lái)自于C基因區(qū)的第2個(gè)ATG翻譯，并且和HBeAg存在著大量相同的氨基酸[4]。HBcAg檢測(cè)難度大，可檢測(cè)相應(yīng)抗體的HBcAb，其屬于人體感染乙型肝炎病毒后出現(xiàn)速度最快的抗體。本研究結(jié)果中HBcAb IgM陽(yáng)性患者HBcAb IgM水平和HBV DNA水平無(wú)關(guān)，可能是研究對(duì)象中的HBcAb IgM陽(yáng)性數(shù)量少，同時(shí)早期階段HBV DNA并不會(huì)出現(xiàn)較高水平的復(fù)制[5]。

綜上所述，慢性乙型肝炎患者機(jī)體血清HBeAg、HBsAg水平均與HBV DNA水平呈正相關(guān)，通過對(duì)HBV M和HBV DNA水平進(jìn)行定量檢測(cè)，可有效監(jiān)測(cè)HBV的動(dòng)態(tài)變化，從而為臨床疾病診斷和治療提供參考。