祁愛風(fēng) 梁平書 王璐 劉素芳 白雪艷 霍萌 封若雨 邢峰麗

浙貝母，為中國(guó)傳統(tǒng)大宗中藥材之一，是浙江的道地藥材，被列為“浙八味”之一，其性苦寒，苦泄寒潤(rùn)，善于開泄，歸肺、心經(jīng)，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為其具有清熱化痰、止咳平喘、散結(jié)解毒、消腫消癰等作用。近年來(lái)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)通過對(duì)浙貝母化學(xué)成分的研究，發(fā)現(xiàn)其有效成分主要是生物堿、總皂苷和多糖，其中生物堿包含了浙貝甲素、浙貝乙素、浙貝丙素、浙貝寧、浙貝酮、貝母辛、貝母新堿、植物甾醇、膽堿、去氫鄂貝啶堿、西貝素、異貝母素甲等[1-2]?？傇碥瞻阖悓庈?、西貝素苷、貝母堿苷、貝母素甲苷、平貝堿苷、伊貝堿苷A等成分[3]。浙貝母具有抗腫瘤活性，臨床多應(yīng)用于白血病的治療，浙貝母可以誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥，增加白血病細(xì)胞內(nèi)抗癌藥物濃度，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，減少毒副反應(yīng)，能夠提高患者的生活質(zhì)量。本文查閱相關(guān)研究文章，從浙貝母治療白血病方面對(duì)其研究進(jìn)展進(jìn)行如下概述。

1 誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是由細(xì)胞凋亡基因控制，是細(xì)胞選擇自主性死亡的一種程序，而白血病發(fā)病的一個(gè)重要原因就是細(xì)胞異常凋亡。浙貝母可通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮抗腫瘤的效應(yīng)，其主要活性成分之一的貝母素甲的抗腫瘤作用受到關(guān)注[4]。

張宇等[5]通過選用高表達(dá)人白血病干細(xì)胞特異性抗原的人急性髓系白血病細(xì)胞系KG-la作為研究對(duì)象，研究得出貝母甲素能夠抑制具有LSCs特征的KG-la細(xì)胞的繁殖，但是對(duì)KG-la細(xì)胞的抑制作用只有濃度依賴性，而無(wú)明顯的藥物作用時(shí)間相關(guān)性。從細(xì)胞周期角度來(lái)說(shuō)，貝母素甲通過升高G2/M期細(xì)胞比例，降低G0/G1期細(xì)胞比例來(lái)誘導(dǎo)KG-la細(xì)胞凋亡，可以提高KG-la細(xì)胞晚期凋亡率以及總凋亡率，對(duì)早期凋亡卻無(wú)明顯的影響。因此，筆者認(rèn)為貝母素甲可以通過抑制白血病細(xì)胞的增值以及加速細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮治療白血病的作用。還有實(shí)驗(yàn)研究，以人白血病細(xì)胞株K562為對(duì)象，通過MMT檢測(cè)發(fā)現(xiàn)貝母素甲對(duì)白血病K562細(xì)胞的抑制同樣具有濃度依賴性，當(dāng)IC50達(dá)到238 μg/mL時(shí)，貝母素甲能夠致使K562細(xì)胞的氧化—還原狀態(tài)失衡，能夠明顯的抑制K5622/A02細(xì)胞活力，加速細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的消耗，使谷胱甘肽含量下降，從而引發(fā)細(xì)胞內(nèi)活氧性上升，抑制其細(xì)胞的增值。而細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽含量的下降常伴隨細(xì)胞凋亡率的上升，從而加速誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，達(dá)到殺死白血病細(xì)胞目的[6-8]。鄭智等[9]通過研究證實(shí)，復(fù)方浙貝顆粒聯(lián)合阿奇霉素可以下調(diào)白血病細(xì)胞移植瘤組織細(xì)胞中谷胱甘肽的含量，抵抗抗氧化酶的表達(dá)，誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，提高難治性白血病的臨床緩解率。

綜上，細(xì)胞活氧化及谷胱甘肽含量在白血病細(xì)胞的繁殖與凋亡中占據(jù)重要地位，而浙貝母的有效成分貝母素甲達(dá)到一定濃度后可以影響二者在細(xì)胞中的作用，因此，筆者認(rèn)為針對(duì)貝母素甲對(duì)此二者的作用及作用機(jī)制有必要進(jìn)行深入的研究，而對(duì)于浙貝母其他有效成分是否具有同樣的作用也值得進(jìn)一步探討，以提高浙貝母治療白血病的臨床效果。

2 逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥

腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥現(xiàn)象導(dǎo)致化療藥物不能夠完全有效的殺死腫瘤細(xì)胞，是臨床導(dǎo)致白血病患者死亡的主要原因，也是白血病治療失敗的重要原因之一。

現(xiàn)代大量研究證實(shí)，P-糖蛋白、脂蛋白受體相關(guān)蛋白(lipoprotein receptor-related protein，LRP)、乳腺癌耐藥蛋白(breast cancer resistance protein，BCRP)、多藥耐藥相關(guān)蛋白1(multidrug resistance-related protein，MRP1)能夠介導(dǎo)各種抗腫瘤藥物的耐藥轉(zhuǎn)運(yùn)，這些介導(dǎo)因子的表達(dá)水平都與白血病的耐藥、復(fù)發(fā)及預(yù)后有著密切關(guān)系[10]。浙貝母中的貝母素甲能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥[11]。浙貝母另一有效成分浙貝母堿可以通過下調(diào)P-糖蛋白表達(dá)，增加藥物在白血病耐藥細(xì)胞內(nèi)的堆積，從而逆轉(zhuǎn)多藥耐藥，針對(duì)“痰瘀互阻型”難治性白血病，應(yīng)用復(fù)方浙貝顆粒治療，能夠促使耐藥細(xì)胞凋亡，減少K562/A02細(xì)胞對(duì)藥物的排泄，并且能下調(diào)白血病耐藥細(xì)胞多藥耐藥相關(guān)蛋白(multidrug resistance-related protein，MRP)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B celllymphoma/lrukemia-2，Bcl-2)、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ，TopoⅡ)、谷胱甘肽-π(glutathione，GSH-π)的表達(dá)，因此逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥[9，12-15]。產(chǎn)生多藥耐藥的機(jī)制還有很多，除外P-糖蛋白過表達(dá)以及其對(duì)抗癌藥物的抵抗作用，細(xì)胞活氧性信號(hào)也參與其中，浙貝母生物堿可刺激K562/A02細(xì)胞產(chǎn)生活氧化，促進(jìn)Caspase-3表達(dá)，誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞凋亡[6，16-20]。齊彥等[21]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，貝母素甲也可以誘導(dǎo)細(xì)胞活氧化升高，在一個(gè)相對(duì)短的過程中可劑量依賴性的誘導(dǎo)K562/A02細(xì)胞凋亡，抑制白血病多藥耐藥細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，考慮其作用機(jī)制可能是由于貝母素甲具有信號(hào)效應(yīng)，可以激活相應(yīng)信號(hào)通路而引起細(xì)胞凋亡與實(shí)現(xiàn)耐藥逆轉(zhuǎn)。

綜上所述，筆者認(rèn)為浙貝母中貝母素甲和浙貝母生物堿成分主要是通過影響白血病腫瘤細(xì)胞的各種介導(dǎo)因子來(lái)實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)多藥耐藥，其具體作用機(jī)制及藥物濃度是否具有依賴性還須進(jìn)一步研究，希望可以開發(fā)浙貝母作為一種白細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑來(lái)應(yīng)用于臨床。

3 增加白血病細(xì)胞內(nèi)抗癌藥物濃度

胡凱文[22]率先通過體外研究發(fā)現(xiàn)，浙貝甲素可抑制急性白血病細(xì)胞膜P-糖蛋白的表達(dá)，能夠增加細(xì)胞內(nèi)抗癌藥物濃度，提升抗癌藥物活性。隨后又進(jìn)一步將浙貝母應(yīng)用于臨床研究，發(fā)現(xiàn)多藥耐藥急性白血病病人在常規(guī)化療前連續(xù)3天口服浙貝母散劑，其藥后耐藥細(xì)胞的P-糖蛋白表達(dá)率為(7.2±2.2)%，對(duì)比治療前(21.9±4.1)%有明顯的下降，浙貝母組病人的骨髓原始細(xì)胞百分比在治療前為(79±4)%，治療后為(26±5)%，其下降程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組，浙貝母組的臨床緩解率達(dá)到55%，相對(duì)于對(duì)照組的20%有一定的提高[23]。其他臨床研究亦證實(shí)，浙貝母散劑及復(fù)方浙貝顆粒可以增強(qiáng)化療藥物濃度，提高藥物對(duì)白血病細(xì)胞的殺傷力，提高圍化療期的化療緩解率及總有效率，減輕化療骨髓抑制，并且具有較好的安全性，提升了患者的生存時(shí)間，具有降低復(fù)發(fā)率及死亡率的優(yōu)勢(shì)[23-26]。

以上研究均提示可以進(jìn)一步開發(fā)浙貝母作為一種有效的中藥耐藥增敏劑。臨床應(yīng)用時(shí)，浙貝母有效成分及單復(fù)方制劑均可在一定程度上增加白血病化療藥物在細(xì)胞內(nèi)的蓄積，提高治愈率，但是目前浙貝母實(shí)驗(yàn)研究少，能夠增加白血病抗癌藥物濃度的具體機(jī)制尚不明確，還需要進(jìn)一步多角度研究其作用途徑和作用機(jī)制，以增加浙貝母的藥用價(jià)值。

4 結(jié)語(yǔ)

白血病作為一種造血系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，治療的有效方案是放化療，實(shí)施骨髓抑制或外周血干細(xì)胞移植，但是由于其成功率低、多藥耐藥、易復(fù)發(fā)、價(jià)格昂貴等多種原因，不僅嚴(yán)重影響人類生活質(zhì)量，還會(huì)導(dǎo)致患者產(chǎn)生嚴(yán)重的心理疾病。目前，雖然經(jīng)過放化療治療的部分患者的臨床癥狀得以緩解，但其復(fù)發(fā)率卻高達(dá)80%左右，許多患者在治療中會(huì)對(duì)化療藥物產(chǎn)生多藥耐藥性，往往因多重耐藥導(dǎo)致治療失敗。因此，挖掘白血病多藥耐藥機(jī)制，加速腫瘤細(xì)胞凋亡，尋找一種有效的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑，提高臨床緩解率，降低復(fù)發(fā)率，改善患者生活質(zhì)量是研究的重點(diǎn)，也是目前急需解決的問題[27]。

目前從中草藥中提取有效抗癌成分是一熱門研究，浙貝母在治療急慢性白血病方面都有低毒性、靶點(diǎn)多、逆轉(zhuǎn)耐藥的特點(diǎn)，顯示出良好的研究前景，因此研究浙貝母對(duì)白血病多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用及作用機(jī)制有著重要意義。目前，對(duì)于浙貝母治療白血病機(jī)制的研究較少，筆者通過綜述國(guó)內(nèi)外浙貝母治療白血病的作用及機(jī)制研究進(jìn)展，希望可以提高其他研究學(xué)者進(jìn)一步研究浙貝母的興趣，探究其作用靶點(diǎn)，具體作用機(jī)制為何，以促進(jìn)浙貝母的有效成分提取及開發(fā)，以期開發(fā)一種效果良好的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑和治療白血病藥物的增敏劑，為臨床上白血病患者帶來(lái)益處。