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        酶聯(lián)法在家畜尿液及組織中檢測瘦肉精的應(yīng)用

        2019-12-30 09:44:36楊丹
        新農(nóng)業(yè) 2019年12期
        關(guān)鍵詞:瘦肉精清液標(biāo)準(zhǔn)值

        楊丹

        “瘦肉精”是一種類似白色的結(jié)晶體粉末,味微苦,無臭?;瘜W(xué)性質(zhì)相對穩(wěn)定,只有溫度達(dá)到172℃才會分解。因此,普通的加熱方法難以將其毒性破壞。它并不是一種特殊的物質(zhì),而是一類簡單的化學(xué)用品,是一種能加快瘦肉生長的廉價藥物添加劑,只要是增加瘦肉率的物質(zhì)都可以稱做“瘦肉精”。目前,檢測瘦肉精的方法有高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等。其中,酶聯(lián)免疫吸附實驗是目前檢測家畜飼料、產(chǎn)品以及組織、尿液中瘦肉精的最常用、最快速的方法,即利用免疫學(xué)中的抗原抗體特異性結(jié)合和酶的高效催化作用,經(jīng)過化學(xué)方法將植物辣根過氧化物酶與克倫特羅結(jié)合,結(jié)合成酶偶聯(lián)克倫特羅。大多實驗室采用“篩選”和“確證”相結(jié)合的方法進(jìn)行測定,通常以前兩種作為“確認(rèn)”方法,后兩種作為“篩選”方法,既可提高測試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,又可處理數(shù)量較多的待測樣品?!笆萑饩痹诓煌M織中的殘留程度不同,注意測定時選取殘留量較高的組織。一般來說,眼睛等組織的樣品中含有極少的殘留量,肌肉中的脂肪量相對較高,留量較高且容易處理,切記所有試劑及樣品在開始檢測前必須回升至室溫。

        1 酶聯(lián)法檢測家畜血液、尿液中的瘦肉精含量的測定

        取新鮮血液,將其加入15毫升離心管,4000轉(zhuǎn)/分鐘,離心5分鐘,取上清液。取1毫升血清樣品于50毫升離心管中,加入1毫升蒸餾水,振蕩5分鐘,4000轉(zhuǎn)/分鐘,離心5分鐘,取上清液。

        采集尿液,過濾或離心5分鐘,4000轉(zhuǎn)/分鐘,取上清液。

        測定結(jié)果判定。判定陰陽性標(biāo)準(zhǔn)是以濃度1微克/升標(biāo)準(zhǔn)液的OD值,當(dāng)測定數(shù)據(jù)小于標(biāo)準(zhǔn)值時,判定為疑似陽性,當(dāng)測定數(shù)據(jù)大于等于標(biāo)準(zhǔn)值標(biāo)準(zhǔn)值時,判定為疑似陰性。判定為疑似陽性的樣品須通過氣相色譜-質(zhì)譜法進(jìn)行確證。大量數(shù)據(jù)表明尿液中可能含有瘦肉精,但并不能夠排除是否含有人為因素,而血液卻大不相同,血液是生物體內(nèi)的“根本”,可以大部分排除人為因素,防止“掉包”事件的發(fā)生。

        2 酶聯(lián)法檢測家畜組織中的瘦肉精含量的測定

        肉組織中瘦肉精的檢測,肉眼可以看出含瘦肉精的豬肉顏色較為鮮艷,顏色一般呈現(xiàn)出鮮紅色,但符合食品安全生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)的豬肉的顏色則是淡紅色。含有瘦肉精的豬肉皮下脂肪層比健康的豬肉要薄很多,基本小于1厘米,因此切下來的肉也相對較軟。

        毛發(fā)中瘦肉精的檢測,毛發(fā)較于其他部位的取材比較容易,且藥物代謝較慢可長期存在,因此為毛發(fā)分析提供了一種擴(kuò)展的追溯性檢測了可能性。豬毛樣品在進(jìn)行鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解后,以鹽酸二苯拉林為內(nèi)標(biāo)物質(zhì),采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜可檢測定量。結(jié)果顯示此方法高靈敏度、強(qiáng)特異性,對完善瘦肉精檢測技術(shù)具有非凡意義。

        肝臟中瘦肉精測定,肝臟中瘦肉精測定必須在室溫下進(jìn)行操作(23℃為最適溫度)。對于處理樣品中帶有低脂肪的組織肝或肉時,需進(jìn)行均質(zhì)、離心、混合、再離心等一系列步驟才可以獲得最終樣品。若樣品沒有完全粉碎,可能與鹽酸等試劑沒有進(jìn)行充分地混合,使提取的“瘦肉精”丟失了小部分,將會導(dǎo)致實驗結(jié)果偏低;在肝等實質(zhì)器官,若在采樣時采取了吸收“瘦肉精”能力較弱部位的樣本,也會導(dǎo)致最終實驗結(jié)果偏低,由于操作過程的主觀原因,也可造成各種誤差。例如,加樣試劑不完全,一些試劑殘留在微孔的邊緣上,在加抗體溶液時不完全,加入標(biāo)準(zhǔn)或處理好的樣品或基質(zhì)時,顯色底物試劑不完全,也可使最終結(jié)果不準(zhǔn)確。若在加樣時將液體濺入另一孔中,洗滌液濺入另一個位置,可能也會造成的酶標(biāo)板孔之間互相污染,會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。

        綜上所述,要想使在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中真正的不再使用瘦肉精,就必要加強(qiáng)生豬在被宰前進(jìn)行尿檢工作,并對不符合食品質(zhì)量安全的養(yǎng)殖戶進(jìn)行嚴(yán)重的懲罰,以加強(qiáng)社會以及政府的大力支持。只有這樣才能將私自添加瘦肉精的違法行為被徹底制止,使人們所食用的豬肉變得愈加健康、安全。

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