王乙茹，柳成東，白華毅，錢錦花，趙 平，朱耀順，楊向東，程志斌*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，云南昆明 650201；2.玉溪農(nóng)業(yè)職業(yè)技術學院,云南玉溪 653100；3.昆明云嶺廣大種禽飼料有限公司，云南昆明 650200）

凝結(jié)芽孢桿菌（Bacillus coagulans）集合了芽孢桿菌屬（耐熱、適合制粒）[1]與乳酸菌類（產(chǎn)酸、抑菌）[2]益生菌的共同優(yōu)勢，成為當前畜禽飼料與養(yǎng)殖領域“替抗”的新型飼用益生菌[3]。試驗報道，與無抗日糧對照組相比，飼用凝結(jié)芽孢桿菌能夠顯著改善肉雞的增重[4]、飼料轉(zhuǎn)化效率、免疫功能等[5-6]，卻鮮有飼用凝結(jié)芽孢桿菌與抗生素組合使用的研究[7]。雖然我國政府決定2020 年7 月全面實施飼料“禁抗”，但全球范圍內(nèi)飼用抗生素乃至抗生素保健藥物仍在使用，因此研究“有抗”日糧基礎上凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞生長性能的效果仍有價值。

與其他飼用抗生素相比，阿維拉霉素安全性較好，在肉雞養(yǎng)殖中無休藥期（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第168 號公告《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》），目前廣泛應用于全世界（無禁抗令）多數(shù)國家的肉雞飼料中[8]。課題組前期采用牛津杯藥敏實驗法證明，5～10 mg/kg 阿維拉霉素溶液對凝結(jié)芽孢桿菌活菌的生長無明顯抑制作用（抑菌圈直徑0 mm，數(shù)據(jù)未公開發(fā)表）。本試驗旨在研究凝結(jié)芽孢桿菌與阿維拉霉素組合使用對21～42 日齡AA 肉雞生產(chǎn)性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設計及飼養(yǎng)管理 試驗在云南農(nóng)業(yè)大學附屬雞場開展，將200 只21 日齡健康、平均體重為（801.85±24.66）g的AA 肉公雞分成2 組，每個處理組10 個重復，每個重復10 只雞/籠。對照組飼糧中添加10 mg/kg 阿維拉霉素，試驗組飼糧中添加10 mg/kg 阿維拉霉素和3×106CFU/g（全價配合飼料）凝結(jié)芽孢桿菌制劑。凝結(jié)芽孢桿菌添加量參考Wu 等[5]和Zhen 等[6]的文獻以及本課題組前期報道[7]。試驗周期為肉雞育成期21～42 日齡，試驗期間日糧參照NRC（1994）肉雞飼養(yǎng)標準，飼料原料組成及配制營養(yǎng)成分見表1。

專人負責飼養(yǎng)試驗，全程控溫、控濕、24 h 光照，試驗雞自由采食和飲水。及時清掃雞舍，保證良好雞舍衛(wèi)生環(huán)境，實施正常免疫程序。

1.2 測定指標及方法

1.2.1 生長性能 測定試驗雞的初體重、末體重、采食量，并計算平均日增重、平均日采食量、耗料增重比（飼料轉(zhuǎn)化效率）等指標[9]。試驗雞腹瀉會造成糞便敷住肛門現(xiàn)象，因此以籠為單位統(tǒng)計處理組“敷肛”的腹瀉率[7,9]。同時，觀察肉雞死亡情況，統(tǒng)計死亡率。

1.2.2 血清生化指標 至肉雞42 日齡，每籠隨機挑選2 只，翅靜脈采血4～6 mL。血樣3 000 r/min 離心15 min 制備血清，在-20℃冰箱保存待檢[9]。血清生化指標在云南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院采用全自動生化儀器測定。

1.2.3 免疫器官指數(shù) 血樣采集后，將挑選的肉雞屠宰，取脾臟、胸腺、法氏囊稱重，免疫器官指數(shù)為該器官重量除以活體重的百分數(shù)[9]。

1.3 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)用平均值±標準差表示，用SPSS 17.0 進行T-test 檢驗，P＜0.05 表示差異顯著，0.05＜P＜0.1表示有差異的趨勢[6]。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

2 結(jié)果

2.1 飼用凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響 如表2所示，試驗組肉雞腹瀉率顯著低于對照組。其他生長性能指標兩組之間差異不顯著。試驗組耗料增重比較對照組相比有下降趨勢（0.05＜P＜0.1）。

表2 凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

2.2 飼用凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞血清生化指標的影響 由表3 可見，試驗組肉雞血清球蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇的含量均高于對照組（P＜0.05）。與對照組相比，試驗組肉雞血清總蛋白含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性有提高的趨勢（0.05＜P＜0.10）。其他血清生化指標無顯著差異。

表3 飼用凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞血清生化指標的影響

2.3 飼用凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞免疫器官指數(shù)的影響 試驗組與對照組肉雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)等指標無顯著差異（表4）。

表4 飼用凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞免疫器官指數(shù)的影響 %

3 討 論

3.1 凝結(jié)芽孢桿菌與阿維拉霉素組合對肉雞生長性能的影響 本研究結(jié)果顯示，凝結(jié)芽孢桿菌與阿維拉霉素組合使用的試驗組肉雞平均日增重與對照組無顯著差異，但耗料增重比降低了4.5%。這表明在含抗生素飼糧基礎上補充3×106CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌，雖未能進一步提高21～42 日齡育成期AA 肉雞的生長速度，但對飼料轉(zhuǎn)化效率有一定程度改善。Li 等[10]試驗證明，與飼喂無抗日糧的對照組相比，飼糧添加2×106CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌對21～42 日齡AA 肉雞平均日增重也無顯著影響，但對耗料增重比也有改善趨勢。Wu 等[5]和Zhen等[6]進一步研究顯示，與飼喂無抗日糧的對照組相比，添加4×106CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌未能對21～42 日齡AA 肉雞增重、飼料轉(zhuǎn)化效率產(chǎn)生顯著影響。Hung 等[11]研究表明，與飼喂無抗日糧的對照組相比，添加3×107CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌對21～42 日齡AA 肉雞平均日增重依然無顯著影響，但顯著降低了耗料增重比。綜上分析，飼用凝結(jié)芽孢桿菌改善育成期肉雞生長性能的效果可能存在劑量依賴性[5-6,10-11]。本研究結(jié)果顯示，凝結(jié)芽孢桿菌與阿維拉霉素組合能夠在單一使用抗生素的基礎上，進一步降低肉雞腹瀉的發(fā)生。眾所周知，飼用抗生素雖能有效抑制腸道有害細菌滋生，但對腸道有益菌的負面影響及腸菌群穩(wěn)態(tài)的破壞也十分明顯[12]。Zhen 等[6]最新試驗報道，飼糧添加4×106CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌顯著降低了42 日齡AA 肉雞盲腸中的大腸桿菌、沙門氏菌。

3.2 凝結(jié)芽孢桿菌與阿維拉霉素組合對肉雞血清生化指標的影響 肉雞血清總蛋白含量可反映飼料蛋白質(zhì)營養(yǎng)攝入情況，總蛋白含量越高，表明日糧蛋白質(zhì)攝入越多，則有利于改善肉雞生長性能[12]。血清總蛋白主要由血清球蛋白和血清白蛋白構成，其中血清球蛋白是肉雞機體免疫功能重要指標之一，血清球蛋白含量高反映機體免疫功能好[14]。本研究結(jié)果顯示，與對照組相比，試驗組肉雞的血清球蛋白顯著增高，且總蛋白含量有提高的趨勢，這與肉雞耗料增重比、腹瀉率改善的結(jié)果相符。林麗花等[13]試驗表明，與飼喂無抗日糧的對照組相比，添加凝結(jié)芽孢桿菌的試驗組育成黃羽肉雞血清總蛋白含量、成活率顯著增加。趙娜等[14]在科寶（Cobb）肉雞上的試驗也顯示，與飼喂無抗日糧的對照組相比，飼糧添加凝結(jié)芽孢桿菌顯著提高了21～42 日齡肉雞血清總蛋白和球蛋白含量以及肉雞的成活率。以上研究表明，凝結(jié)芽孢桿菌與抗生素聯(lián)合使用具有改善育成雞飼料蛋白利用率及機體免疫的作用。

血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶來源于肉雞肝臟細胞分泌，可反映肝臟的營養(yǎng)代謝功能，是肉雞營養(yǎng)物質(zhì)代謝利用的重要指標[12,14]。本結(jié)果顯示，試驗組肉雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性比對照組提高23.8%，這與試驗組肉雞血清較高的總蛋白、球蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇含量的結(jié)果相符。趙娜等[14]在Cobb 肉雞上試驗顯示，與無抗日糧對照組相比，凝結(jié)芽孢桿菌組肉雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高。Qing 等[12]研究也顯示，與無抗日糧對照組相比，約翰遜乳桿菌組肉雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高3.8%，但差異不顯著。以上結(jié)果表明，飼用益生菌可在一定范圍內(nèi)升高血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，反映出肉雞增強了對攝入營養(yǎng)物質(zhì)的代謝利用。

3.3 凝結(jié)芽孢桿菌與阿維拉霉素組合對肉雞免疫器官的影響 胸腺、法氏囊和脾臟是家禽重要的免疫器官[15]，其器官指數(shù)（器官重量/體重）的適當提高與機體良好的免疫水平及健康狀況呈正相關[4]。本試驗結(jié)果顯示，與飼喂無抗日糧的對照組相比，添加3×106CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌對42 日齡育成雞的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均無顯著差異。宮秀燕等[15]報道，試驗組添加0.4×106CFU/g 低劑量的飼用凝結(jié)芽孢桿菌，與飼喂無抗日糧的對照組Cobb 肉雞相比，35 日齡的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)均無顯著差異。然而，AIKhalaifa 等[4]研究顯示，與飼喂無抗日糧的對照組相比，添加2×107CFU/g 高劑量凝結(jié)芽孢桿菌的35 日齡Cobb肉雞的脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)仍然差異不顯著，但試驗組肉雞胸腺指數(shù)顯著提高。試驗雞品種和檢測日齡差異、對照組是否使用抗生素、凝結(jié)芽孢桿菌劑量顯著不同可能是影響凝結(jié)芽孢桿菌對肉雞免疫器官發(fā)育與功能的主要因素。這進一步提示，凝結(jié)芽孢桿菌改善肉雞機體免疫功能可能也存在劑量依賴性，適當增加飼糧中凝結(jié)芽孢桿菌有利于增強肉雞機體免疫功能。

4 結(jié) 論

本試驗結(jié)果表明，飼糧補充3×106CFU/g 凝結(jié)芽孢桿菌對21～42 日齡育成期肉雞的腹瀉率與飼料轉(zhuǎn)化效率有改善作用。