馬雪莉 徐欽軍 范以香 王燕飛 李長(zhǎng)浩

摘要：為明確生物菌劑（ZZ-11）對(duì)大櫻桃根癌病的田間防治效果、在大櫻桃上適宜的使用劑量及對(duì)作物的影響，進(jìn)行了本次試驗(yàn)。從綜合效果來看，菌劑配合腐殖酸肥料與農(nóng)藥滲劑使用效果好，對(duì)根癌病具有治療效果。菌劑使用濃度為商品制劑稀釋200倍液，配合腐殖酸肥500倍液，及農(nóng)藥增滲劑1000～1500倍液沖施使用，用藥液10～15kg/株。

關(guān)鍵詞：大櫻桃根癌病;生物菌劑;治療作用

中圖分類號(hào)：S-3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

DOI：10.19754/j.nyyjs.20191215007

根癌病是一種土傳病害，是由根癌土壤桿菌（Agrobacterium fumefaciens）侵染引起[1]，是栽培大櫻桃的主要病害之一，幾乎所有大櫻桃砧木均有不同程度的發(fā)生[2]。致病菌為根癌土壤桿菌，主要影響植物細(xì)胞分裂，使細(xì)胞分裂失控，過度生長(zhǎng)，形成根瘤。植物一旦染病，很難治愈，輕則衰弱黃葉，重則死樹。櫻桃根癌病已成為櫻桃高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的嚴(yán)重影響因素[3，4]。

櫻桃是山東泰安地區(qū)的主栽果樹之一，根癌病對(duì)其生長(zhǎng)造成嚴(yán)重的影響，部分苗圃的發(fā)病率接近100%[5，6]。植物根癌病的特殊致病機(jī)制主要是由于T-DNA 的轉(zhuǎn)入植物體，造成細(xì)胞的無限增值，形成腫瘤。目前對(duì)根癌病還沒有良好的化學(xué)防治手段[7]，使用最多的仍然是最早應(yīng)用于根癌病的生防細(xì)菌K84，其防治根癌病的機(jī)理是搶先占領(lǐng)果樹傷口位點(diǎn)，在傷口上定殖并產(chǎn)生農(nóng)桿菌素，阻止其它病菌從傷口侵入，因此其作用是預(yù)防而不是治療，一旦植物罹患根癌病，K84的治療效果則表現(xiàn)較差[8]。

利用微生物及其代謝產(chǎn)物防治病蟲害是常見的生物防治手段[9]。生物菌劑ZZ-11主要成分為枯草芽孢桿菌及其代謝產(chǎn)物?？莶菅挎邨U菌是目前應(yīng)用廣泛的益生菌， 其對(duì)環(huán)境友好、對(duì)糧食安全、對(duì)人體及動(dòng)植物無危害，被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物飼料、凈化水質(zhì)、醫(yī)藥和植物[10]?？莶菅挎邨U菌是一種革蘭氏陽性菌， 菌體桿狀，不含內(nèi)毒素，嗜熱、好氧會(huì)產(chǎn)芽孢，易分離培養(yǎng)，并能產(chǎn)生多種抗菌素和酶，具有抗菌譜廣、活性強(qiáng)和抗逆能力極強(qiáng)的特點(diǎn)[11]?？莶菅挎邨U菌應(yīng)用于植物病害生物防治的研究已經(jīng)有多年的歷史，目前在黃瓜、辣椒、水稻、小麥、玉米等農(nóng)作物病害上顯出較好的防治效果[12]。近1個(gè)世紀(jì)來，從枯草芽孢桿菌代謝產(chǎn)物中分離純化出多種抗生物質(zhì)，并明確了一部分抗生物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)和生防作用，為枯草芽孢桿菌在植病生防領(lǐng)域的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)，提供了可行性依據(jù)。

枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生環(huán)狀、線狀和分支環(huán)狀的3種抗菌多肽，對(duì)多種植物病原細(xì)菌，如水稻紋枯病菌、稻瘟病菌、番茄青枯病等均有強(qiáng)烈抑制作用[13]，但是對(duì)大櫻桃根癌病的防治效果未見報(bào)道。為明確枯草芽孢桿菌對(duì)大櫻桃根癌病的田間防治效果、在大櫻桃上適宜的使用劑量及對(duì)作物的安全性，進(jìn)行了田間藥效試驗(yàn)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)對(duì)象

試驗(yàn)對(duì)象：大櫻桃根癌病。

試驗(yàn)田設(shè)在山東省泰安市岱岳區(qū)崅峪鎮(zhèn)南崅峪村櫻桃園中（N36°，E117°，海拔171m）。試驗(yàn)地土質(zhì)棕壤，有機(jī)質(zhì)含量1.32%，堿解氮73mg/kg，pH值6.5，地力均勻。供試大櫻桃為四至五年生嫁接苗，株行距4m×4 m，品種為美早、先鋒、黃蜜、薩米脫，砧木為考特。共選試驗(yàn)株120株。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)和安排

1.2.1供試藥劑

供試劑藥劑為枯草芽孢桿菌及其代謝產(chǎn)物（ZZ-11），泰安市樹青有機(jī)農(nóng)業(yè)科技有限公司提供;對(duì)照藥劑為0.3%梧寧霉素水劑（遼寧微科生物工程股份有司），市場(chǎng)購得;農(nóng)藥助劑（神展），腐殖酸肥（農(nóng)家美），均由泰安市樹青有機(jī)農(nóng)業(yè)科技有限公司提供。

1.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)和安排

試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理：處理1：ZZ-11懸浮劑200倍液;處理2：ZM-11懸浮劑200倍液+儂悅1500倍液;處理3：ZZ-11懸浮劑200倍液+農(nóng)家美500倍液+儂悅1500倍液;處理4：梧寧霉素200倍液（CK1）+儂悅1500倍液;處理5：清水（CK2）。

每處理4次重復(fù)，計(jì)20個(gè)小區(qū)，每6株為1個(gè)小區(qū)，隨機(jī)排列。

試驗(yàn)共施藥2次，施藥時(shí)間分別為2018年 4月18日、 5月4日。第1次施藥為4月18日，大櫻桃處于果實(shí)膨大期;隔2周再用藥1次。試驗(yàn)期間，無惡劣氣候因素影響，適宜試驗(yàn)進(jìn)行。

按表1試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求，各處理藥劑兌水稀釋后灌根。挖開根癌病植株根部周圍土壤，露出根瘤，將藥劑從根部澆下，浸過根瘤，待藥液完全滲入土壤后在覆土。每株用藥液15kg。

1.3調(diào)查方法

整個(gè)試驗(yàn)調(diào)查2次，第1次調(diào)查是在第1次藥后14d（2018年5月4日），每株選東、西、南、北、中 5 個(gè)方位進(jìn)行葉片和新梢的測(cè)定，在營養(yǎng)枝上從基部起采集第 6～8 片葉片，實(shí)驗(yàn)室測(cè)定葉綠素含量，并用卷尺測(cè)定新梢長(zhǎng)度;第2次調(diào)查是在第2次藥后14d（5月18日），挖土深15～20cm，主要調(diào)查根瘤一側(cè)新根生長(zhǎng)狀況，以及1mm 粗根的數(shù)量，2mm 粗根的數(shù)量，根瘤有無松動(dòng)脫落情況。同時(shí)觀察各用藥區(qū)有無植物生長(zhǎng)異常現(xiàn)象，及對(duì)作物產(chǎn)量有無影響。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用鄧肯氏新復(fù)極差（DMRT）法進(jìn)行分析和顯著性測(cè)定。

2結(jié)果與分析

2.1對(duì)大櫻桃根癌病的影響

從表2看到，處理1、處理2、處理3、處理4新梢生長(zhǎng)長(zhǎng)度均比對(duì)照要好，4個(gè)處理差異顯著性不大，但是處理2、處理3對(duì)處理1、處理4、清水對(duì)照差異顯著。處理1、處理2、處理3葉綠素含量分別為3.11mg/kg、3.25mg/kg、3.54mg/kg，三者之間差異不顯著，但是顯著高于處理4葉綠素含量 2.22mg/kg及對(duì)照2.45mg/kg。可見供試藥劑可以增加植物葉綠素含量，提高植物光合速率，并且與氨基酸肥配合使用可以促進(jìn)植物新梢生長(zhǎng)。

處理3數(shù)據(jù)顯示1mm及2mm粗根數(shù)要顯著多于其它處理，處理1和處理2之間 1mm粗根數(shù)相差不大，但是也多于處理4與處理5。

根瘤病的發(fā)病機(jī)理是根瘤土壤桿菌首先附著在創(chuàng)傷部位的細(xì)胞壁上，有致病力的及若干無致病力的土壤桿菌，互相競(jìng)爭(zhēng)植物細(xì)胞表面上數(shù)量有限的附著位點(diǎn)，競(jìng)爭(zhēng)中，如果無致病力的土壤桿菌先于有致病力的土壤桿菌搶先占據(jù)傷口位點(diǎn)，就不會(huì)形成腫瘤，反之則會(huì)形成腫瘤。K84 菌株防治根瘤病的機(jī)理就是由于它搶先占領(lǐng)了果樹傷口位點(diǎn)，在其上定植并產(chǎn)生農(nóng)桿菌素，阻止其它病菌從傷口侵入。根據(jù)這一發(fā)病機(jī)理推測(cè)，生物菌劑在防治櫻桃根瘤病方面，應(yīng)該有效果。從表2 可以看到，2次藥后，用菌劑處理過的處理1、處理2、處理3表現(xiàn)出根瘤內(nèi)部變褐，一些小型根瘤（直徑約2～3cm以內(nèi)）松動(dòng)脫落的現(xiàn)象。可見供試菌劑對(duì)抑制根瘤生長(zhǎng)具有較好的作用。這與煙臺(tái)農(nóng)科院李淑平等的研究結(jié)果生物菌肥能有效降低根癌病的發(fā)生結(jié)果類似[14]。

2.2產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量

因?yàn)榇杭驹庥龅蜏乇鶅?，正值大櫻桃花期，?dǎo)致大櫻桃當(dāng)年絕產(chǎn)，課題組無法采集菌劑對(duì)大櫻桃產(chǎn)量與品質(zhì)影響的數(shù)據(jù)。但是菌劑能夠提高植物葉片中葉綠素的含量，從理論推測(cè)，供試藥劑能夠提高大櫻桃的產(chǎn)量。

3結(jié)論

通過本試驗(yàn)表明，生物菌劑ZZ-11對(duì)大櫻桃根癌病具有較好的治療效果。從綜合效果來看，菌劑配合使用腐殖酸肥肥料與農(nóng)藥滲劑，效果更好。菌劑使用濃度為商品制劑稀釋200倍液，配合農(nóng)家美500倍液，農(nóng)藥增透劑1000～1500倍液使用。

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作者簡(jiǎn)介：

馬雪莉（1975-），女，碩士，講師。研究方向：殺菌劑應(yīng)用研究及植物保護(hù)教學(xué)與實(shí)踐。