金花淑，蔡克瑞，金在順，胡江平

（牡丹江醫(yī)學院，黑龍江 牡丹江 157011)

胃淋巴瘤是一種來源于胃粘膜下層淋巴組織的惡性腫瘤，是淋巴結(jié)外常見的淋巴瘤。好發(fā)于青壯年男性。發(fā)病部位以胃竇部及幽門前區(qū)最多見，病灶可單發(fā)或多發(fā)。該病的臨床癥狀缺乏特異性，與胃癌相似。手術(shù)前診斷較困難，胃鏡檢查和胃腸道鋇餐檢查再結(jié)合活檢病理有助于該病的明確診斷。熱休克蛋白(Heat shock protein, HSP) 是一類廣泛存在于生物體內(nèi)具有高度保守性的蛋白質(zhì)，有研究表明，在惡性腫瘤時，細胞內(nèi)的HSP表達也會相應的增高[1]。我們應用免疫組織化學方法，檢測胃淋巴瘤標本中HSP60蛋白的表達, 分析不同病理學分級中HSP60的表達水平, 并對其意義進行初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料

共收集胃淋巴瘤標本16例，來源于2008年9月～2017年9月牡丹江市腫瘤醫(yī)院、牡丹江醫(yī)學院附屬紅旗醫(yī)院、牡丹江市第一人民醫(yī)院、哈爾濱醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院等,其中男12 例, 女4例，年齡在25～50歲之間，平均年齡為42歲，選取的樣本經(jīng)過病理學檢查確診病例，對其重新進行切片、染色和免疫組化研究。按WHO對其進行病理學分級，共分四級，每個級別選取4例。

1.2 實驗儀器和試劑

全能顯微鏡BX43( OLYMPUS, 日本)，DAB顯色劑(武漢 博士德生物技術(shù)有限公司)、SP通用試劑盒、兔抗人HSP60 ( Cell Signaling, 美國)。

1.3 免疫組織化學方法

切片經(jīng)脫蠟、抗原修復、滴加一抗、二抗、顯色等步驟。

1.4 結(jié)果判定

胃淋巴瘤免疫組化染色陽性表現(xiàn)為細胞質(zhì)染色呈現(xiàn)棕褐色或棕黃色均質(zhì)或顆粒狀。每組隨機選取每張切片的5個視野, 使用彩色顯微圖像分析儀進行組織化學定量灰度分析，通過測定其陽性染色的積分光密度值(IOD)來反映HSP60的表達，根據(jù)統(tǒng)計學分析，判定胃淋巴瘤病理學分級與HSP60表達的關(guān)系。

1.5 統(tǒng)計學處理

2 結(jié) 果

鏡下可見，HSP60在胃淋巴瘤中的表達陽性時細胞質(zhì)中呈現(xiàn)棕黃色顆粒狀，少數(shù)細胞膜著色,細胞核未見著色。不同級別的淋巴瘤HSP60表達存在顯著差異（P＜0.05），見表1。

表1 Hsp60在不同級別胃淋巴瘤中表達的灰度值

3 討 論

HSP是機體在應激狀態(tài)下，細胞內(nèi)生成的一種高度保守的蛋白質(zhì)。HSP60是HSPs家族中的重要成員, 屬于分子伴侶家族，其表達程度與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[2]。本研究結(jié)果顯示, HSP60 在胃淋巴瘤各級別中都有表達,且隨著惡性程度的升高, 其表達也增多, 表明HSP60的表達與胃淋巴瘤的發(fā)展過程存在正相關(guān)關(guān)系。而且，不同分級胃淋巴瘤中HSP60的表達存在明顯的差異，且隨著分級其表達逐漸增高，這也表明HSP60過度表達可能不僅參與腫瘤細胞的增殖,可能還對腫瘤細胞具有一定的保護作用。其原因可能是在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，機體出現(xiàn)了基因的損傷和蛋白質(zhì)的異常堆積，同時快速生長的腫瘤細胞造成局部組織的缺血缺氧，HSP60被誘導大量合成。胃淋巴瘤組織中高表達的HSP60也可能與其容易發(fā)生的轉(zhuǎn)移相關(guān)，HSP60可作為胃淋巴瘤時一項輔助性檢查指標，對于判定腫瘤的分級分期有著重要的指導意義。