陳玉峰,孫翠紅
(1.石家莊職業(yè)技術(shù)學(xué)院食品與藥品工程系,河北石家莊 050081; 2.石家莊學(xué)院化工學(xué)院,河北石家莊 050035)
家禽營(yíng)養(yǎng)中使用飼料添加劑是一項(xiàng)常規(guī)工作,其目的是幫助家禽充分發(fā)揮其遺傳潛力。肉仔雞消化生理的特點(diǎn)是其內(nèi)源性脂肪酶生產(chǎn)水平低,這可能會(huì)影響其對(duì)飼料的消化利用率。因此,日糧添加乳化劑,特別在早期生長(zhǎng)發(fā)育階段可以使雛雞更好地消化和吸收日糧中的脂肪,從而提高能量攝入量和生長(zhǎng)性能。乳化劑可以降低水的表面張力,增加滲透力,改善顆粒料中水分的分布。Roy 等(2010)在添加適量植物油的飼料中添加外源性乳化劑可能會(huì)顯著提高肉雞的性能。乳化劑(如卵磷脂)可能通過(guò)增加膽鹽膠束的大小來(lái)減少游離脂肪酸的吸收,而膽鹽膠束在水界面擴(kuò)散得慢,阻礙游離脂肪酸向細(xì)胞表面的傳遞(于翔等,2014)。此外,Zhang 等(2011)研究表明,添加乳化劑可以通過(guò)提高脂肪酸消化率提高肉雞生長(zhǎng)期的生長(zhǎng)性能。但盡管在過(guò)去幾十年里,人們對(duì)使用外源性乳化劑的興趣有所增加,但關(guān)于乳化劑對(duì)脂肪利用的影響還沒(méi)有得到徹底研究。因此,本研究旨在評(píng)估由外源合成乳化劑對(duì)雄性肉雞生長(zhǎng)性能、肉質(zhì)、盲腸微生物計(jì)數(shù)、血漿代謝產(chǎn)物、載脂蛋白A1 和載脂蛋白B 作為脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因在肝臟表達(dá)的影響。
1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選擇1 日齡308 肉用公雞600 只,隨機(jī)分為2 組,每組10 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30 只雞。對(duì)照組飼喂玉米- 小麥- 豆粕型日糧,試驗(yàn)組分別在1 ~12 d、13 ~22 d 和23 ~44 d肉雞日糧中添加1 g/kg、0.75 g/kg 和0.5 g/kg 乳化劑。試驗(yàn)分為1 ~12 d、13 ~22 d 和23 ~44 d 三個(gè)階段進(jìn)行。試驗(yàn)材料乳化劑購(gòu)自建明生物,肉雞各階段日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
試驗(yàn)期間雞只自由采食和飲水,對(duì)照組和試驗(yàn)組的光周期和溫度相同,光照周期是1 ~7 d 光照24 h,7 ~44 d 光照23 h,黑暗1 h,室內(nèi)溫度1 ~3 d 時(shí)35℃,然后每周下降2.5℃,直到溫度維持在21℃。
1.2 試驗(yàn)數(shù)據(jù)與樣品采集 分別在試驗(yàn)當(dāng)天、12、22 和44 d 早上對(duì)各重復(fù)雞只進(jìn)行稱重,每3 天統(tǒng)計(jì)1 次飼料用量,計(jì)算1 ~12、13 ~22、23 ~44 d 以及試驗(yàn)全期雞只平均日采食量、平均日增重和料重比。每天記錄雞只死亡情況,試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算死亡率。翅下靜脈采血5 mL,置于肝素鈉抗凝管,在4℃ 3 000×g 條件下離心10 min,血漿樣品-80℃保存待測(cè)。雞只屠宰后去除內(nèi)臟,計(jì)算屠宰率,同時(shí)收集胸肌,計(jì)算胸肌產(chǎn)量。1.3 樣品分析 肌肉在4℃條件下保存24 h 后測(cè)定pH,用色度計(jì)分析肌肉顏色,測(cè)定系水力、蒸煮損失及剪切力。肝臟勻漿后用于熒光定量PCR分析載脂蛋白A1 和B 基因相對(duì)表達(dá)量。相關(guān)引物設(shè)計(jì)見(jiàn)表2。參考李宗楠等(2016)的研究方法分析盲腸內(nèi)容物大腸桿菌和乳酸桿菌含量。血漿代謝指標(biāo)采用商品試劑盒法進(jìn)行分析(試劑盒全部購(gòu)自南京建成生物)。
表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
表2 低聚核苷酸引物序列
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 數(shù)據(jù)采用SAS 軟件單因素方差分析。雞只生長(zhǎng)性能參數(shù)、胴體特征、肉質(zhì)、盲腸微生物計(jì)數(shù)、血漿代謝物和肝臟基因表達(dá)均以重復(fù)為試驗(yàn)單位,采用T 檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較,P<0.05 判定為差異顯著。
2.1 生長(zhǎng)性能和胴體特征 由表3 可知,與對(duì)照組相比,日糧添加乳化劑顯著提高了12 和22 d公雞的體重(P <0.05),顯著改善1 ~12 d 公雞的平均日增重(P <0.05)。乳化劑組較對(duì)照組使13 ~22 d 公雞的平均日采食量提高了2.34%(P<0.05),而23 ~44 d 及整個(gè)試驗(yàn)期間(1 ~44 d)料重比較對(duì)照組降低了1.27%(P <0.05)。對(duì)照組和試驗(yàn)組對(duì)公雞死亡率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P >0.05)。
由表4 可知,乳化劑組公雞屠宰率較對(duì)照組提高了1.26%(P <0.05),但兩組對(duì)公雞胸肌重量的影響無(wú)顯著差異(P >0.05)。
表3 乳化劑對(duì)雄性公雞生長(zhǎng)性能的影響
表4 乳化劑對(duì)雄性公雞胴體特征的影響
2.2 肉品質(zhì)和盲腸微生物 由表5 可知,日糧添加乳化劑肌肉顏色黃度顯著提高(P <0.05),而與對(duì)照組相比,對(duì)肉色紅度和亮度的影響無(wú)顯著差異(P >0.05)。兩組肌肉樣本均未檢出沙門氏菌,同時(shí)大腸桿菌和乳酸桿菌計(jì)數(shù)也無(wú)顯著差異(P >0.05)。乳化劑和對(duì)照組對(duì)肌肉蒸煮損失、剪切力和系水力的影響均無(wú)顯著差異(P >0.05)。
表5 乳化劑對(duì)雄性公雞肉品質(zhì)和盲腸微生物含量的影響
2.3 血液代謝指標(biāo) 由表6 可知,日糧添加乳化劑較對(duì)照組顯著增加了血漿膽固醇和高密度脂蛋白含量,分別提高了8.94%、10.12%(P <0.05),但兩組對(duì)血漿低密度脂蛋白、葡萄糖、非酯化脂肪酸、總蛋白、甘油三酯和尿素含量均無(wú)顯著影響(P >0.05)。
2.4 肝臟脂肪含量及載脂蛋白基因表達(dá) 在本研究中,測(cè)定的對(duì)照組和乳化劑組肝臟總脂質(zhì)含量分別為(6.58±1.82)% 和(7.45±1.82)%,兩組無(wú)顯著差異(P >0.05)。此外,與對(duì)照組相比,日糧添加乳化劑對(duì)載脂蛋白A1 和載脂蛋白B 基因相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著影響(P >0.05,數(shù)據(jù)未列出)。
表6 乳化劑對(duì)雄性公雞血液代謝指標(biāo)的影響
本研究結(jié)果表明,乳化劑的添加可以改善肉雞生長(zhǎng)性能(體重、平均日增重、平均日采食量和料重比),這與Bontempo 等(2016)的研究結(jié)果一致。本研究在飼料制粒前將乳化劑添加到待制粒粉料中,通過(guò)調(diào)節(jié)制粒過(guò)程中的水分含量可以增加飼料濕度,降低制粒機(jī)械能耗,改善制粒質(zhì)量,從而提高肉雞采食量。Dierick 和Decuypere(2004)報(bào)道了乳化劑可以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率、增加消化產(chǎn)物的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收。胸肌生長(zhǎng)主要發(fā)生在肉雞的生長(zhǎng)后期,本研究結(jié)果顯示,乳化劑可以提高肉雞屠宰率,說(shuō)明肉雞采食含乳化劑的日糧在完成其相對(duì)快速生長(zhǎng)階段后可能有助于提高胴體產(chǎn)量。
研究中發(fā)現(xiàn),添加乳化劑影響了胸肌肉色。肉色是消費(fèi)者對(duì)肉質(zhì)評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)之一,尤其是在去骨產(chǎn)品中,其常常決定畜產(chǎn)品的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。Akit 等(2014)研究表明,日糧添加乳化劑改善了豬肉肉色的紅度,降低肉的亮度,但對(duì)豬肉pH 和滴水損失無(wú)顯著影響。相反,Kim 等(2008)發(fā)現(xiàn)卵磷脂對(duì)肉色無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),乳化劑可以顯著提高肌肉黃度,這可能與乳化劑增加肌肉脂溶性色素(如葉黃素)的積累作用有關(guān)。乳化劑可能會(huì)對(duì)微生物群產(chǎn)生直接有害影響,導(dǎo)致肥胖/ 代謝綜合征和炎癥性疾病的發(fā)病率(Chassaing 等,2015)。但本試發(fā)現(xiàn),日糧添加乳化劑對(duì)盲腸大腸桿菌和乳酸桿菌計(jì)數(shù)無(wú)顯著影響。
據(jù)作者所知,目前關(guān)于乳化劑對(duì)家禽血液代謝產(chǎn)物指標(biāo)的研究數(shù)據(jù)較少。本研究發(fā)現(xiàn),乳化劑提高了血漿膽固醇和高密度脂蛋白的含量,表明其改善脂質(zhì)代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)。Wang 等(2016)研究表明,與對(duì)照組相比,乳化劑處理后的雛雞血漿總膽固醇和低密度脂蛋白濃度增加,高密度脂蛋白無(wú)顯著變化。Roy 等(2010)發(fā)現(xiàn),外源性乳化劑對(duì)肝臟中脂類的去除率更高。肝臟是家禽脂質(zhì)生物合成的主要場(chǎng)所,肉雞脂肪組織中幾乎所有的脂肪積累都來(lái)自肝臟或日糧。肝臟和腸道是成年雞脂蛋白合成和分泌的主要部位,藥物、日糧和生理因素都可能影響載脂蛋白A1 的濃度,進(jìn)而影響血漿高密度脂蛋白水平(Jiang 等,2014)。載脂蛋白A1 和B 是雞血漿高密度脂蛋白和極低密度脂蛋白的主要蛋白組分,對(duì)脂質(zhì)分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)揮重要作用。但本試驗(yàn)結(jié)果顯示,乳化劑對(duì)載脂蛋白相關(guān)基因表達(dá)無(wú)顯著影響,作者推斷與日糧添加乳化劑后試驗(yàn)的44 d 中產(chǎn)生了適應(yīng)性有關(guān)。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧添加乳化劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能(體重、平均日增重、平均日采食量、料重比)和屠宰率均有一定促進(jìn)作用,并可能影響肉色(黃度)和脂質(zhì)代謝(膽固醇和高密度脂蛋白)。因此,外源性乳化劑對(duì)提高快速生長(zhǎng)肉雞肌肉脂肪利用率具有積極作用。