呂燕　汪旭波　童越敏

摘 要：

本文建立了同時(shí)快速測定草莓中3種農(nóng)藥的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。乙腈提取草莓樣品，多壁碳納米管凈化出的凈化液經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用法測定，以多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）方式采集數(shù)據(jù)，外標(biāo)法定量。在5～500μg/L范圍內(nèi)3種農(nóng)藥均具有良好的線性關(guān)系（線性回歸系數(shù)r>0.99）;在3個(gè)不同濃度添加水平下，3種農(nóng)藥的平均回收率為78.9%～103.7%，RSD為1.5%～6.5%，本方法的定量限為0.10～0.50μg/kg。該方法簡便、快捷、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、靈敏度高，適用于草莓中3種殺菌劑的同時(shí)檢測。

關(guān)鍵詞：

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀;草莓;農(nóng)藥殘留

中圖分類號(hào)：S-3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

DOI：10.19754/j.nyyjs.20191130007

基金項(xiàng)目：寧波市科學(xué)技術(shù)局科技惠民項(xiàng)目“動(dòng)物性食品中頭孢類藥物殘留檢測技術(shù)與方法研究”（項(xiàng)目編號(hào)：2017C50014）;寧波市科學(xué)技術(shù)局農(nóng)業(yè)領(lǐng)域重大專項(xiàng)“寧波特色農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評估及預(yù)警技術(shù)研究”（項(xiàng)目編號(hào)：2015C110004）;寧波市科學(xué)技術(shù)局社發(fā)領(lǐng)域重大科技專項(xiàng)“糧谷中有毒有害物質(zhì)分析關(guān)鍵技術(shù)研究與應(yīng)用”（項(xiàng)目編號(hào)：2016C51002）

草莓是我國的一種主要水果品種，大部分農(nóng)戶采用大棚覆膜的方式種植草莓，大棚環(huán)境內(nèi)溫濕度高，高溫多濕又極易引起病蟲害的發(fā)生。草莓果實(shí)含糖量高、多汁肉嫩，極易感染灰霉?。˙otrytis cinerea），感病率高達(dá)60%以上，一旦被感染，果實(shí)很快就會(huì)腐爛， 連花蕾都不能幸免，嚴(yán)重降低草莓的品質(zhì)和產(chǎn)量。長期以來，我國對灰霉病的防治方法進(jìn)行了大量的研究，也取得了不小進(jìn)展，但缺少系統(tǒng)性的綜述報(bào)道，尤其缺少相關(guān)防治效果及其殘留情況的研究。本文主要研究了氟菌唑、啶酰菌胺、醚菌酯同時(shí)作用于草莓中，能夠達(dá)到預(yù)想的抑菌效果。不過，雖然該類藥物毒性低，但氟菌唑?qū)ρ劬︷つ?huì)有輕度刺激，長期接觸可能引起肝腎毒性，而且現(xiàn)在社會(huì)對食品安全問題也很重視，為了公民健康，老版的GB2763-2016《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》雖然規(guī)定了啶酰菌胺、醚菌酯在草莓中的殘留限量，卻沒有氟菌唑在草莓中的限量，現(xiàn)行的國標(biāo)方法GB/T 20769也并未涵蓋此藥，剛剛出臺(tái)的GB2763-2018《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》報(bào)批稿雖然將氟菌唑納入了，但其殘留限量還只是臨時(shí)限量，而且目前鮮有同時(shí)分析這3種殺菌劑在草莓中殘留分析方法的報(bào)道，因此建立方便快捷的草莓中3種殺菌劑殘留量分析方法已是迫在眉睫。

蔬菜水果中多農(nóng)殘檢測技術(shù)目前雖有不少相關(guān)報(bào)道，使用的儀器方法也都不外乎是氣相色譜法[1-3]、氣質(zhì)聯(lián)用法[4，5]和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[6-8]、液相色譜法[9-12]和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[13]等;而鮮有報(bào)道如本文所研究的同時(shí)測定草莓中3種農(nóng)藥的方法。

本文在已有研究的基礎(chǔ)上建立了同時(shí)測定草莓中3種農(nóng)藥殘留的檢測方法，其靈敏度、精密度和定量限等相關(guān)參數(shù)均符合殘留分析要求。日后也將對3種農(nóng)藥在草莓和土壤中的降解和最終殘留量情況進(jìn)行研究，為我國3種農(nóng)藥在草莓中的風(fēng)險(xiǎn)評估提供可靠的數(shù)據(jù)依據(jù)和支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與標(biāo)品

甲醇、乙腈均為默克色譜純;甲酸為阿拉丁色譜純;氯化鈉為國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司分析純。多壁碳納米管XFM1（南京先豐）、PSA（天津博納科技有限公司）和C18（Agilent）;氟菌唑（Triflumizole）、啶酰菌胺（Boscalid）、醚菌酯（Kresoxim-methyl）標(biāo)準(zhǔn)品：1000mg/L（介質(zhì)為乙腈），德國Dr;所用草莓來源于本地超市、農(nóng)貿(mào)市場。

1.2 儀器

Waters XEVO TQ液質(zhì)聯(lián)用;IKA T25勻漿機(jī);SIGMA 3K15離心機(jī);N-EVAP氮吹儀。

1.3 標(biāo)液的配制與貯存

介質(zhì)為乙腈的氟菌唑、啶酰菌胺、醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1000mg/L）避光-18℃儲(chǔ)存，使用前用乙腈將儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋至1.0 mg/L，然后用草莓基質(zhì)稀釋至所需濃度。

1.4 分析方法

1.4.1 提取

稱取5g（精確至0.01g）勻漿后的草莓樣品于50mL聚四氟乙烯帶蓋離心管中，加入20mL乙腈，13000r/min勻漿60s，后蓋蓋震蕩提取1min，再加入3g氯化鈉劇烈震蕩30s后9500r/min離心5min，上層有機(jī)相待凈化。

1.4.2 凈化

取1.4.1中有機(jī)相5.00mL于裝有20mg多壁碳納米管的10mL具塞離心管中，蓋蓋振蕩凈化2min后，9500r/min離心5min;取4.00mL上清液于40℃水浴中氮吹至近干，用0.5mL0.1%甲酸水溶液和0.5mL乙腈溶解渦旋混勻，過膜，供液質(zhì)聯(lián)用測定分析。

1.5 儀器方法

1.5.1液相部分

液相分離柱：waters UPLC BEH C18MVK（2.1mm×100mm， 1.7μm）;柱溫：40℃;流動(dòng)相：A相為乙腈+ B相為0.1%甲酸水溶液（具體洗脫程序詳見表1）;進(jìn)樣量：10μL。

1.5.2 MS部分

電離模式： ESI+（電噴霧離子源）;多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測（MRM） ;離子源溫度150℃;毛細(xì)管電壓2.5kV;霧化溫度500℃;脫溶劑氣流速1000L/h;碰撞氣流速50L/h;錐孔電壓30V;RF透鏡電壓0.35V;倍增電壓650V;3種農(nóng)藥的定性定量離子對等參數(shù)詳見表2。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

因?yàn)椴葺橇扛摺⑺钟侄?，為能夠更充分地提取待測藥物，實(shí)驗(yàn)中考慮用有機(jī)溶劑作提取液，而該有機(jī)溶劑選擇了能夠與水互溶的甲醇、乙腈。經(jīng)過多次嘗試分析發(fā)現(xiàn)，雖然甲醇的提取效果不錯(cuò)，但沒有可行的方法能夠分離出來草莓中大量的水分;而用乙腈不僅具有良好的提取效果，而且能用簡單的鹽析法除去大量的水分，以得到需要的有機(jī)相。因此，確定乙腈為最終提取溶劑。