鄧 杰，李 芳，古麗君，段廷玉

（蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 / 蘭州大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部草牧業(yè)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 /蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，甘肅 蘭州 730020）

紫花苜蓿(Medicago sativa)是一種優(yōu)良的多年生豆科牧草，具有蛋白質(zhì)含量高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值全面、利用年限長(zhǎng)等特點(diǎn)[1]，同時(shí)，紫花苜蓿根系發(fā)達(dá)，不僅能吸收土壤深層的水分和養(yǎng)分，還可以起到保持水土的功能[2-3]。紫花苜蓿適宜生長(zhǎng)在pH 6.5 ～ 7.5的微酸性或微堿性土壤中，對(duì)酸性土壤較為敏感[4-5]。研究表明，當(dāng)土壤中的酸度達(dá)到一定域值時(shí)，植物的超微結(jié)構(gòu)會(huì)被破壞，從而降低葉綠素含量和光合效率，阻礙生長(zhǎng)發(fā)育[6]。在土壤pH 低于 5.7之后，苜蓿生物量隨著pH的下降而顯著下降[7]。土壤酸度在很大程度上限制了苜蓿的栽培種植[8]。酸性土壤的類(lèi)型多，主要分布在我國(guó)南方地區(qū)，且隨著環(huán)境的惡化，酸性土壤面積不斷增加。近年來(lái)，隨著南方地區(qū)畜牧業(yè)的快速發(fā)展，尤其是奶牛業(yè)的快速發(fā)展，對(duì)優(yōu)質(zhì)苜蓿草的需求越來(lái)越大，但酸性土壤極大地制約了苜蓿在南方地區(qū)的生產(chǎn)利用[9]。

微生物是農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的重要組成部分，具有不可替代的作用。叢枝菌根(arbuscular mycorrhizal,AM)真菌是廣泛存在于森林、草地、農(nóng)田等生態(tài)系統(tǒng)中的一類(lèi)土壤微生物[10]，它能與超過(guò)80%的植物根系形成菌根共生體[11]。截止2017年，我國(guó)發(fā)現(xiàn)并報(bào)道的AM真菌有147個(gè)種，約占全世界已報(bào)道的AM真菌種數(shù)的一半[12]。AM真菌能與植物根系之間形成菌根根圈效應(yīng)，具有拓展根系吸收面積，增加宿主植物對(duì)礦質(zhì)養(yǎng)分，尤其是P的吸收[13-14]，促進(jìn)光合作用[15-16]，以及調(diào)節(jié)植物體內(nèi)光合產(chǎn)物分配等功能，從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)[11,17]。在逆境條件下，AM真菌能提高抗氧化保護(hù)酶的活性，降低丙二醛(MDA)含量，從而減緩脂質(zhì)過(guò)氧化作用，提高植物對(duì)生物逆境[18]和非生物逆境[19-21]的抗性，從而提高植物的產(chǎn)量，促進(jìn)生態(tài)系統(tǒng)持續(xù)、穩(wěn)定發(fā)展。

目前，AM真菌與紫花苜?；セ莨采难芯恳延袌?bào)道。蒙程等[22]的研究表明，不同pH下接種AM真菌能提高苜蓿植物的分枝數(shù)、株高以及根長(zhǎng)等生長(zhǎng)指標(biāo)，而不同pH下接種AM真菌對(duì)紫花苜蓿葉綠素含量、凈光合速率、養(yǎng)分吸收以及MDA和超氧化物歧化酶 (SOD) 酶活性變化等生理生化方面的研究鮮有報(bào)道。為此，擬通過(guò)模擬南方酸性土壤，在盆栽條件下以苗期紫花苜蓿為研究對(duì)象，探究幼套球囊霉和根內(nèi)球囊霉以及這兩種菌的混合菌劑對(duì)不同pH下紫花苜蓿幼苗生長(zhǎng)的影響，為利用AM真菌增強(qiáng)紫花苜蓿對(duì)酸脅迫的抗性、提高紫花苜蓿產(chǎn)量提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試植物

本研究供試植物為隴東苜蓿(M. sativa var.Longdong)，挑選籽粒飽滿并且大小一致的苜蓿種子，種子表面用75%的酒精消毒3 min，然后用3%的NaClO溶液對(duì)種子消毒10 min，最后用無(wú)菌水沖洗3次。將處理好的種子擺放在有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿中，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中催芽。

1.1.2 供試菌種

供試菌種幼套球囊霉(Claroideoglomus etunicatum)和根內(nèi)球囊霉(Rhizophagus intraradices)購(gòu)于北京市農(nóng)林科學(xué)院植物營(yíng)養(yǎng)與資源研究所中國(guó)叢枝菌根真菌種質(zhì)資源庫(kù)(BGC)，經(jīng)三葉草(Trifolium pratense)大量擴(kuò)繁、備用。試驗(yàn)開(kāi)始之前，將等量的幼套球囊霉和根內(nèi)球囊霉混勻，制成混合菌劑。

1.1.3 供試土壤

草炭土購(gòu)自蘭州花市，經(jīng)2 mm網(wǎng)過(guò)篩后，按1∶1比例摻入河沙充分混勻，于高壓滅菌鍋中滅菌2次，溫度設(shè)為121 ℃，每次滅菌1 h，間隔24 h，混合基質(zhì)pH為6.48。將滅好的土壤分裝到每個(gè)花盆中，每盆裝1 500 g，通過(guò)在土壤中添加或不添加硫酸的方法將土壤pH調(diào)節(jié)至6.48、5.0和3.0，配制時(shí)，把98%濃硫酸先配制成5 mmol·L-1(pH 2)溶液，然后將硫酸溶液逐量添加到含有1 500 g混合基質(zhì)的花盆中，充分混勻，分別記下pH為5.0和3.0時(shí)添加硫酸溶液的體積，其余花盆中的pH分別按對(duì)應(yīng)體積的硫酸溶液進(jìn)行配制。

1.1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在蘭州大學(xué)的榆中智能溫室中進(jìn)行，設(shè)置4個(gè)菌根處理，分別為1)單接種幼套球囊霉(AM1)；2)單接種根內(nèi)球囊霉(AM2)；3)接種幼套球囊霉+根內(nèi)球囊霉混合菌劑(Mix)；4)接種滅活的AM真菌菌劑作為對(duì)照(NM)，AM真菌單獨(dú)接種處理每盆接30 g AM菌劑，混合接種處理中幼套球囊霉和根內(nèi)球囊霉分別接種15 g，NM處理每盆接種30 g滅活菌劑(接種的菌劑因量少對(duì)pH的影響可以忽略不計(jì))；3個(gè)pH處理，分別為pH 6.48、5.0和3.0； 3個(gè)pH處理和4個(gè)菌根處理交互設(shè)置后，共12個(gè)處理，每處理4個(gè)重復(fù)。每個(gè)重復(fù)移栽6株已催芽的苜蓿幼苗，生長(zhǎng)一周后，選擇生長(zhǎng)較為一致的保留5株，進(jìn)行后期試驗(yàn)。

植物生長(zhǎng)期間澆改進(jìn)的Hoagland營(yíng)養(yǎng)液[23]，配比為2 mmol·L-1KNO3， 0.5 mmol·L-1NaCl，1.2 mmol·L-1Ca (NO3)2·4H2O，1 mmol·L-1NH4H2PO4，1 mmol·L-1MgSO4·7H2O，0.1 mmol·L-1FeEDTA，0.1 mmol·L-1ZnSO4·7H2O，0.1 mmol·L-1CuSO4·5H2O，0.1 mmol·L-1MnSO4·H2O，0.1 mmol·L-1H2MoO4，0.1 mmol·L-1H3BO3。營(yíng)養(yǎng)液配好后測(cè)定其pH為5.5。用H2SO4和NaOH將營(yíng)養(yǎng)液的pH分別調(diào)至6.48、5.0和3.0，分別用來(lái)澆灌相應(yīng)的土壤pH處理組，每天澆2次，每次20 mL。苜蓿生長(zhǎng)6周后收獲，在收獲前測(cè)定株高、葉片數(shù)以及光合速率等指標(biāo)。收獲時(shí)對(duì)不同處理組植株采集相同部位的新鮮葉片低溫保存，之后用于測(cè)定葉綠素含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量等指標(biāo)。植株收獲后，根部用清水沖洗干凈，并取相同部位的根斷用來(lái)測(cè)定菌根侵染率，將剩余的地上部分和地下部分用來(lái)測(cè)定磷(P)含量和生物量。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌根侵染率測(cè)定

稱 取 0.2 g 左 右 同 部 位 的 根 部 組 織，浸 泡 在10% 左右的 KOH 溶液中，置于于60 ℃ 水浴鍋中加熱1 h，清去KOH 溶液，用流水沖洗兩次，然后將根系置于1 mol·L-1HCl溶液中酸化30 s，用蒸餾水沖洗3次，最后在解剖鏡下檢查，若植物根部皮層中的顏色已褪去，則用0.05% Trypan Blue (乳酸∶甘油∶水 = 1∶1∶1)保存根樣[24]，用十字交叉法[25]測(cè)定菌根侵染率。侵染率 = 侵染根長(zhǎng)度 / 觀察根長(zhǎng)度 × 100%。

1.2.2 形態(tài)學(xué)指標(biāo)測(cè)定

株高：植株的最高點(diǎn)到露出培養(yǎng)土表面的部位長(zhǎng)度。

葉片數(shù)：以盆為單位，每盆所有的葉片總數(shù)。

生物量：植株地上部分和根部均先稱取鮮重(W1)，然后用烘干法測(cè)定干重。在105 ℃殺青20 min，然后于80 ℃烘箱烘至恒重，并稱重(W2)。地上部分和地下部分的生物量可根據(jù)用來(lái)測(cè)定葉綠素含量、MDA、SOD活性以及菌根侵染率等相關(guān)指標(biāo)的鮮重(W3)與干重比，計(jì)算公式如下。

生物量 = 地上部分干重 + 地下部分干重。

1.2.3 凈光合速率的測(cè)定

收獲前選擇天氣晴朗的上午09:00-11:00，采用Li-6400便攜式光合儀隨機(jī)選取盆栽植株葉片測(cè)定凈光合速率[Pn，μmol·(m2·s)-1]，每盆測(cè)定5次，計(jì)算平均值，作為一個(gè)重復(fù)，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)。

1.2.4 總磷含量測(cè)定

烘干的植物地上部分和根部樣品研磨后，稱取0.2 g樣品于100 mL消化管中，每管加 3 g K2SO4和0.3 g CuSO4催化劑，并加10 mL H2SO4，于420 ℃消煮2 h。消化好的溶液定容至100 mL。采用鉬銻抗吸光光度法，用分光光度計(jì)(Pectrum，Shanghai 721，中國(guó))，在390 nm處測(cè)定溶液吸光度值[26]。

1.2.5 生理生化指標(biāo)的測(cè)定

葉綠素含量、SOD活性和MDA濃度分別參照王學(xué)奎[27]的丙酮浸提法、氮藍(lán)四唑(NBT)光化還原法和硫代巴比妥酸法。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)記錄數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行雙因素方差分析。用Tukey's HSD法(Tukey's honestly significant difference)檢測(cè)各處理間的顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 侵染率

接種AM真菌的處理組根部均不同程度地受到AM真菌的侵染，對(duì)照組NM的根系中未檢測(cè)到菌根結(jié)構(gòu)。相同AM真菌處理?xiàng)l件下，隨著pH的下降，苜蓿根系菌根侵染率逐漸降低，pH為3.0的處理與pH為6.48的處理相比，2種AM真菌單獨(dú)及混合接菌后其侵染率分別降低36.23%、23.53%和37.02%。相同pH處理?xiàng)l件下，苜蓿根系菌根侵染率均以混合菌劑最高(表1)。

表 1 不同pH條件下苜蓿AM真菌侵染率Table 1 Alfalfa arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) colonization rates at different pH treatments

2.2 生長(zhǎng)指標(biāo)

隨著pH的降低，苜蓿葉片數(shù)、株高和生物量逐漸降低。與pH為6.48的處理組相比，pH為5.0時(shí)，NM處理組生物量顯著降低16.08% (P ＜0.05)，幼套球囊霉處理組葉片、株高和生物量分別顯著降低12.81%、6.65%和10.23%，根內(nèi)球囊霉處理組株高和生物量分別顯著降低8.87%和13.69%，混合菌劑處理組葉片數(shù)和生物量分別顯著降低6.13%和8.36%；pH為3時(shí)，NM處理組葉片數(shù)、株高和生物量分別顯著降低22.09%、17.60%和17.25%，幼套球囊霉處理組葉片數(shù)和生物量分別顯著降低20.20%和25.13%，根內(nèi)球囊霉處理組葉片數(shù)、株高和生物量分別顯著降低19.43%、13.12%和25.82%，混合菌劑處理組葉片數(shù)、株高和生物量分別顯著降低11.96%、7.86%和17.48%(圖1)。

圖 1 苜蓿葉片數(shù)、株高和生物量試驗(yàn)結(jié)果Figure 1 Results of the leaf number, shoot height, and biomass of alfalfa

與NM處理相比，接種幼套球囊霉、根內(nèi)球囊霉和混合菌劑顯著提高苜蓿葉片數(shù)、株高和生物量，pH為6.48時(shí)，葉片數(shù)分別顯著提高273.62%、222.09%和310.43%，株高分別顯著提高171.75%、175.66%和192.27%，生物量分別顯著提高68.71%、68.71%和 92.40%；pH為5時(shí)，葉片數(shù)分別顯著提高263.69%、269.86%和330.13%，株高分別顯著提高150.98%、148.56%和173.22%，生物量分別顯著提高80.49%、73.52%和110.11%；pH=3時(shí)，葉片數(shù)分別顯著提高282.68%、233.07%和363.78%，株高分別顯著提高219.70%、190.62%和226.82%，生物量分別顯著提高52.65%、51.24%和91.87%(圖1)。

2.3 葉綠素含量和凈光合速率

酸處理降低了苜蓿凈光合速率和葉綠素含量。與pH為6.48的處理相比，pH為5時(shí)，NM處理組、幼套球囊霉處理組和混合菌劑處理組葉綠素含量分別顯著降低10.57%、8.43%和9.59% (P ＜0.05)，根內(nèi)球囊霉處理組葉綠素含量和凈光合速率分別顯著降低18.07%和7.24%；pH為3時(shí)，NM處理組葉綠素含量和凈光合速率分別顯著降低18.74%和34.69%，幼套球囊霉處理組葉綠素含量和凈光合速率分別顯著降低21.42%和17.01%，根內(nèi)球囊霉處理組葉綠素含量和凈光合速率分別顯著降低39.02%和9.94%，混合菌劑處理組葉綠素含量和凈光合速率分別顯著降低16.90%和7.53%(圖2)。

圖 2 苜蓿凈光合速率和葉綠素含量Figure 2 Net photosynthetic rates and chlorophyll content of alfalfa

與NM處理相比，接種幼套球囊霉、根內(nèi)球囊霉和混合菌劑顯著提高苜蓿葉綠素含量和凈光合速率，pH為6.48時(shí)，葉綠素含量分別顯著提高83.24%、89.44%和87.70%，凈光合速率分別顯著提高90.36%、85.85%和138.57%；pH為5時(shí)，葉綠素含量分別顯著提高87.62%、73.54%和89.75%，凈光合速率分別顯著提高94.82%、87.53%和148.64%；pH為3時(shí)，葉綠素含量分別顯著提高77.21%、42.17%和91.95%，凈光合速率分別顯著提高141.90%、156.28%和237.78%。

2.4 總P含量

苜蓿總 P 含量的變化趨勢(shì)與生物量基本一致。與pH為6.48的處理相比，pH為5時(shí)，幼套球囊霉處理組總 P 含量顯著增加9.45% (P ＜ 0.05)，根內(nèi)球囊霉處理組和混合菌劑處理組總 P 含量分別顯著降低28.63%和19.65%；pH為3時(shí)，NM處理組、根內(nèi)球囊霉處理組和混合菌劑處理組總 P 含量分別顯著降低54.18%、49.53%和41.07% (圖3)。

圖 3 苜蓿總P含量Figure 3 Results of the total phosphorus content of alfalfa

與NM處理相比，接種幼套球囊霉、根內(nèi)球囊霉和混合菌劑顯著提高苜?？?P 含量，pH為6.48時(shí)，總 P 含量分別顯著提高416.35%、767.03%和898.20%；pH為5時(shí)，總P含量分別顯著提高530.89%、590.77%和795.38%；pH為3時(shí)，總 P含量分別顯著提高946.47%、854.90%和118.37%。

2.5 MDA濃度和SOD酶活性

酸處理增加了苜蓿SOD 酶活性和MDA濃度。與pH為6.48的處理相比，pH為5時(shí)，幼套球囊霉處理組、根內(nèi)球囊霉處理組和混合菌劑處理組的SOD酶活性分別顯著增加45.56%、16.67%和25.08% (P ＜ 0.05)，NM處理組和根內(nèi)球囊霉處理組的MDA濃度分別顯著35.64%和34.89%；pH為3時(shí)，NM處理組、幼套球囊霉處理組、根內(nèi)球囊霉處理組和混合菌劑處理組的SOD酶活性分別顯著增加27.29%、60.20%、23.33%和57.38%，NM處理組合根內(nèi)球囊霉處理組的MDA濃度分別顯著52.97%和46.71% (圖4)。

圖 4 苜蓿MDA濃度和SOD酶活性Figure 4 Results of the MDA concentration and SOD enzyme activity of alfalfa

與NM處理相比，接種幼套球囊霉、根內(nèi)球囊霉和混合菌劑顯著提高苜蓿SOD酶活性，降低了MDA濃度。pH為6.48時(shí)，SOD酶活性分別顯著提高26.67%、68.75%和101.88%，根內(nèi)球囊霉處理組和混合菌劑處理組的MDA濃度分別顯著降低32.49%和37.72%；pH為5時(shí)，SOD酶活性分別顯著提高87.50%、100.21%和156.78%，MDA濃度分別顯著降低30.25%、32.86%和49.14%；pH為3時(shí)，SOD酶活性分別顯著提高59.41%、63.50%和149.59%，MDA濃度分別顯著降低36.28%、35.25%和51.55%。

2.6 相關(guān)性分析結(jié)果

相關(guān)性分析結(jié)果(表2)顯示，苜蓿的根系菌根侵染率與葉片數(shù)、株高、葉綠素含量、凈光合速率、P吸收和生物量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系(P ＜0.01)，與MDA濃度呈現(xiàn)極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P ＜0.01)。苜蓿生物量的積累與菌根侵染率、葉片數(shù)、株高、葉綠素含量、凈光合速率以及P吸收和SOD酶活性呈顯著極正相關(guān)關(guān)系(P ＜ 0.01)，與MDA濃度呈現(xiàn)極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P ＜ 0.01)。

3 討論與結(jié)論

本研究通過(guò)溫室和室內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，酸脅迫下，苜蓿幼苗的生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，并且pH越低，受到的傷害越大。隨著pH的降低，苜蓿幼苗的株高、葉片數(shù)和地上、地下生物量等顯著降低，說(shuō)明酸性土壤會(huì)抑制植物生長(zhǎng)，降低植物產(chǎn)量[28-29]，這可能有以下幾方面的原因：1)酸處理減少植物體內(nèi)參與葉綠素合成的礦質(zhì)元素[28]，從而降低葉綠素含量，影響光合作用的進(jìn)行；2)酸性土壤抑制植物對(duì)P等養(yǎng)分的吸收[30]，從而抑制P參與的重要生理生化過(guò)程，如光合作用、能量?jī)?chǔ)存和運(yùn)輸?shù)萚21]；3)酸脅迫下，膜脂質(zhì)過(guò)氧化作用加劇，損害植物體內(nèi)生物膜及其功能，減緩或抑制植物體內(nèi)一系列的生理生化反應(yīng)，最終導(dǎo)致植物長(zhǎng)勢(shì)變?nèi)?，產(chǎn)量降低。

酸性土壤是植物生長(zhǎng)重要的限制因素之一，叢枝菌根真菌存在于不同的土壤類(lèi)型中，植物根部感染叢枝菌根真菌可以提高植物在酸性土壤中生長(zhǎng)的能力，改善幼苗的生存環(huán)境[31]。蒙程等[22]的研究表明，AM真菌可以緩解酸脅迫，并促進(jìn)苜蓿生物量7.27 ～ 22.20倍。本研究也發(fā)現(xiàn)，AM真菌能顯著促進(jìn)紫花苜蓿葉片數(shù)、株高等產(chǎn)量構(gòu)成因子。這可能是因?yàn)锳M真菌的存在促進(jìn)植物對(duì)P的吸收和光合作用的進(jìn)行，從而促進(jìn)植物的生長(zhǎng)和生物量的積累。

表 2 苜蓿生長(zhǎng)、P吸收、生理生化指標(biāo)之間的相關(guān)性分析系數(shù)Table 2 Pearson correlation coefficients among the growth, P uptake, and physiological and biochemical indices of alfalfa

此外，AM真菌可在逆境條件下提高抗氧化保護(hù)酶活性，降低植物體內(nèi)活性氧的積累和膜質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的積累[32-33]。本研究結(jié)果表明，AM真菌能提高SOD酶活性，降低MDA含量，這可能是因?yàn)锳M真菌的存在能誘導(dǎo)植物的氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而緩解膜質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，維持植物體內(nèi)正常的生理生化反應(yīng)和免疫反應(yīng)。

AM真菌雖可減輕酸性土壤對(duì)植物的脅迫，但其本身亦會(huì)收到酸性土壤的影響，本研究發(fā)現(xiàn)，AM真菌的侵染率會(huì)隨著pH的降低而降低。說(shuō)明AM真菌在酸性土壤中的侵染小于中性和堿性土壤。這可能是因?yàn)殡S著pH的降低，植物的超微結(jié)構(gòu)被破壞，從而降低葉綠素含量和光合效率，減少光合產(chǎn)物的積累及其向根部AM真菌的分配，因而降低AM真菌在根部定植所需要的養(yǎng)分，最終導(dǎo)致AM真菌的侵染降低(菌根侵染率與葉綠素含量和凈光合速率呈極顯著正相關(guān)關(guān)系(表2)[34]。但也有研究表明，土壤pH (4.2和5.2)未顯著影響紅薯根系珠狀巨孢囊霉(Gigaspora margarita)的菌根侵染率[35]。這可能與植物類(lèi)型、土壤pH、AM真菌類(lèi)型等有關(guān)。

Li等[33]研究幼套球囊霉和根內(nèi)球囊霉單獨(dú)和混合接種對(duì)黑麥草葉斑病的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，這兩種AM真菌混合接種效應(yīng)低于幼套球囊霉單獨(dú)接種的效應(yīng)，而本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，混合菌劑提高葉片數(shù)，生物量、凈光合速率、總P含量、SOD酶活性的效果大于幼套球囊霉和根內(nèi)球囊霉單獨(dú)存在的處理，這種不同的結(jié)果可能與植物類(lèi)型和環(huán)境土壤有關(guān)。說(shuō)明幼套球囊霉和根內(nèi)球囊霉均能提高苜蓿幼苗的生長(zhǎng)和對(duì)酸脅迫的耐受性，而這兩種菌劑混合侵染苜蓿植物時(shí)，二者間存在協(xié)同效應(yīng)，所以二者的效應(yīng)可以疊加，因而混合接種的效果最好。

在我國(guó)，紫花苜蓿主要分布在北方的中性和微酸性土壤中，而在南方地區(qū)的種植面積還較小[2]。近年來(lái)，隨著南方地區(qū)奶牛業(yè)的快速發(fā)展，對(duì)優(yōu)質(zhì)苜蓿草的需求越來(lái)月迫切，而從別處運(yùn)輸會(huì)增加成本，且運(yùn)輸途中因天氣等原因會(huì)造成飼草發(fā)霉、變質(zhì)，進(jìn)而影響牧草品質(zhì)，造成損失。因此，提高苜蓿在南方酸性土壤中的產(chǎn)量是解決這一問(wèn)題的關(guān)鍵。根據(jù)本研究結(jié)果，AM真菌能顯著促進(jìn)植物光合速率、P吸收，增加葉綠素含量和生物量，降低逆境脅迫下苜蓿植株的MDA濃度。說(shuō)明AM真菌能促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高植物抗逆性。在南方酸性土壤苜蓿生產(chǎn)系統(tǒng)中具有廣泛的應(yīng)用前景。