王 妍，何春曉，王 瑩

(隴東學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院,甘肅 慶陽 745000)

1 引言

復(fù)方土槿皮酊為常用外用酊劑,含有苯甲酸和水楊酸,具有軟化和溶解角質(zhì)以及抑制真菌的作用,臨床用于治療干燥未破裂的手足癬、疊瓦癬等,被收于《中國(guó)人民解放軍醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)范》[1]。目前市售的大部分酸酊制劑產(chǎn)品說明書往往只給出其總酸含量，沒有具體標(biāo)明每種酸的含量，因此找到一種快速、準(zhǔn)確測(cè)量藥品中酸含量的方法是較有意義的一項(xiàng)工作[2-3]。國(guó)內(nèi)制劑手冊(cè)多采用酸堿滴定法測(cè)定苯甲酸和水楊酸的總量,無法檢測(cè)出其各自的準(zhǔn)確含量，且操作費(fèi)時(shí)、誤差大，但成本低[4-6]。高效液相色譜法用流動(dòng)相直接對(duì)待測(cè)品進(jìn)行稀釋測(cè)定,能最大限度的消除了溶劑峰對(duì)溶質(zhì)吸收峰的影響,同時(shí)操作簡(jiǎn)單快速、結(jié)果準(zhǔn)確，但是所需儀器價(jià)格比較昂貴,且對(duì)操作的要求較高[7-8]。

本文采用紫外分光光度法和酸堿滴定法對(duì)復(fù)方土槿皮酊中苯甲酸和水楊酸的含量進(jìn)行了測(cè)定，并將兩種方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，紫外分光光度法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，樣品不用分離，重復(fù)性好，測(cè)定結(jié)果令人滿意。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

試劑：NaOH(AR)，C7H6O2(AR)，C6H4(OH)(COOH)(AR)，KHC8H4O4(AR)，無水乙醇，去離子水，蒸餾水，酚酞，復(fù)方土槿皮酊(規(guī)格:每瓶15ml,批號(hào):國(guó)藥準(zhǔn)字Z44020858)。

儀器：電子天平(BS11OS)，紫外可見分光光度計(jì)(Cary 60 UV-Vis)。

2.2 溶液配制

(1)樣品處理

準(zhǔn)確量取經(jīng)活性炭吸附過的復(fù)方土槿皮酊1mL于100mL容量瓶中，用75%乙醇溶液稀釋至刻度線，放置備用。

(2)苯甲酸和水楊酸儲(chǔ)備液的配制

分別準(zhǔn)確稱取29.9mg苯甲酸和28.9mg水楊酸于小燒杯中，加入20mL75%乙醇溶液使其溶解，定容至100mL，搖勻備用。

2.3 紫外光譜圖

取上述苯甲酸、水楊酸儲(chǔ)備液各25mL，分別用75%乙醇溶液定容至100mL，搖勻。以75%乙醇溶液為參比，分別在210～400nm紫外波長(zhǎng)區(qū)域內(nèi)進(jìn)行波長(zhǎng)掃描得到苯甲酸和水楊酸的紫外吸收曲線，如圖1所示。從苯甲酸和水楊酸的吸收曲線圖中得到苯甲酸在222nm有一個(gè)吸收峰；水楊酸在297nm和222nm處各有一個(gè)吸收峰。

圖1 水楊酸和苯甲酸紫外光譜圖

2.4 苯甲酸和水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

在7個(gè)100mL容量瓶中分別加入2mL，3mL，4mL，6mL，7mL，8mL，10mL的上述水楊酸溶液，用75%乙醇溶液定容，搖勻。以75%乙醇溶液為參比，在297nm和222nm處測(cè)量吸光度，以水楊酸濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。苯甲酸同上，但在222nm處測(cè)量吸光度，以苯甲酸濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5 復(fù)方土槿皮酊中苯甲酸和水楊酸的含量測(cè)定

紫外分光光度法：取樣品2mL，用75%乙醇溶液定容至100mL，在297nm和222nm處測(cè)定樣品的吸光度，計(jì)算苯甲酸和水楊酸的含量。

酸堿滴定法：準(zhǔn)確吸取樣品30 mL，加2滴酚酞，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色，平行測(cè)定三組，記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算樣品總酸量。

2.6 回收率實(shí)驗(yàn)

準(zhǔn)確量取已知含量的樣品1mL三份，按表4、表5加入一定量的水楊酸和苯甲酸，測(cè)定加標(biāo)后樣品中苯甲酸和水楊酸的含量，計(jì)算總酸量回收率。

3 數(shù)據(jù)處理與結(jié)果分析

3.1 苯甲酸和水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

由圖2和圖3可得水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的相關(guān)系數(shù)分別為R2=0.9969和R2=0.9971，說明當(dāng)水楊酸的濃度在0.002890～0.01445mg/mL之間時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線有很好的線性關(guān)系。由圖4可得苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的相關(guān)系數(shù)為R2=0.9914，說明當(dāng)苯甲酸的濃度在0.0007474～0.003737mg/mL之間時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線有很好的線性關(guān)系。

圖2 297nm處水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖3 222nm處水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖4 222nm處苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

3.2 復(fù)方土槿皮酊中苯甲酸和水楊酸的含量

由表1、表2可知，紫外分光光度法測(cè)定的復(fù)方土槿皮酊總酸量的相對(duì)誤差要小于酸堿滴定法測(cè)定的總酸量。

表1 紫外分光光度法測(cè)得三種樣品中水楊酸和苯甲酸的含量及總酸量

表2 酸堿滴定法測(cè)得三種樣品的總酸量

3.3 回收率實(shí)驗(yàn)

表3 紫外分光光度法測(cè)定復(fù)方土槿皮酊回收率實(shí)驗(yàn)

表3(續(xù))

表4 酸堿滴定法測(cè)定復(fù)方土槿皮酊回收率實(shí)驗(yàn)回收率實(shí)驗(yàn)

注：以上數(shù)據(jù)均為三次測(cè)量平均值

由表3、表4可知，紫外分光光度法測(cè)得樣品總酸量回收率的RSD為0.095%，,酸堿滴定法測(cè)得樣品總酸量回收率固體RSD為0.67%。通過對(duì)比可得紫外分光光度法系統(tǒng)誤差小，方法準(zhǔn)確、可靠，而酸堿滴定法系統(tǒng)誤差較大，方法不準(zhǔn)確，不可靠。

4 結(jié)論

本文采用紫外分光光度法和酸堿滴定法測(cè)定復(fù)方苯甲酸、水楊酸的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，紫外分光光度法操作簡(jiǎn)便，系統(tǒng)誤差小，測(cè)定過程中樣品不用分離，且重復(fù)性好，方法準(zhǔn)確、可靠。酸堿滴定法雖成本低，但操作費(fèi)時(shí)、系統(tǒng)誤差大，故該方法不準(zhǔn)確，不可靠。