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        豬捷申病的流行、診斷與防治

        2019-12-11 06:58:42申識(shí)川王文芳王冠杰
        養(yǎng)殖與飼料 2019年12期
        關(guān)鍵詞:免疫吸附脊髓炎血清型

        申識(shí)川 王文芳 王冠杰

        1.河南省濮陽市檢驗(yàn)檢疫服務(wù)中心,河南濮陽457000;2.河南省濮陽市水利局,河南濮陽457000;3.河南省濮陽市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,河南濮陽457000

        豬捷申?。╬orcine teschen disease,PTD)又名豬傳染性腦脊髓炎、豬塔爾凡病,是由小RNA病毒科(Picornaviridae)捷申病毒屬(teschovirus)的豬捷申病毒(porcine teschovirus,PTV)引起的豬腦脊髓灰質(zhì)炎、繁殖障礙、肺炎、下痢、心包炎和心肌炎、皮膚損傷及無癥狀等多種表現(xiàn)的一種病毒性傳染病[1]。世界上首例豬捷申病的報(bào)道出現(xiàn)在1929年,發(fā)病地為捷克斯洛伐克的捷申城,故名豬捷申病,主要臨床癥狀為腦脊髓灰質(zhì)炎[2],發(fā)現(xiàn)該病的早期階段,這種疾病在歐洲中部的一些國家一直散在流行,并逐漸蔓延至整個(gè)歐洲,給歐洲的工業(yè)化養(yǎng)豬造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近年亞洲國家中日本有該病流行的報(bào)道,2003年中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所的馮力等首次從內(nèi)蒙古某發(fā)病豬場分離到了1 株豬捷申病毒[3],表明我國豬場也存在該病。

        1 豬捷申病流行情況

        1.1 豬捷申病流行病學(xué)

        根據(jù)目前的研究結(jié)果,該病至少有11個(gè)血清型,多數(shù)血清型致病力不強(qiáng),但是血清I 型中的Talfan 毒株致病力比較強(qiáng),其引發(fā)的豬捷申病發(fā)病率可達(dá)50%,病死率可達(dá)70%~90%,因此血清I 型引發(fā)的腦脊髓灰質(zhì)炎被國際獸醫(yī)局(OIE)列為B 類傳染病。豬是捷申病毒的唯一宿主,各種日齡的豬均易感,幼齡豬易感性最強(qiáng),病豬和帶毒豬是本病的主要傳染源,主要通過健康豬和發(fā)病豬的口鼻接觸傳播,被糞便污染的飼料和水也可傳染本病。

        1.2 國內(nèi)豬捷申病流行情況

        根據(jù)表1和表2可知,自2003年豬捷申病在內(nèi)蒙古被首次發(fā)現(xiàn)以來,該病陸續(xù)在江蘇、黑龍江、河北、吉林、河南、北京、云南、上海、山東、貴州、廣東、江西等12個(gè)省市的豬場暴發(fā),我國獸醫(yī)科技工作者根據(jù)發(fā)病豬的臨床癥狀,結(jié)合最新的分子生物學(xué)診斷技術(shù)確診了該病,表明該病在我國已經(jīng)蔓延開來,疫區(qū)在逐漸擴(kuò)大。

        2 臨床癥狀

        捷申病在發(fā)病初期表現(xiàn)為后肢無力、走路后驅(qū)搖晃、發(fā)熱、厭食、精神萎靡,隨著病情的加重,然后出現(xiàn)眼球震顫、共濟(jì)失調(diào)、抽搐、角弓反張和昏迷;接著發(fā)病豬會(huì)出現(xiàn)麻痹,呈犬坐或側(cè)躺的姿勢,和其他引起神經(jīng)癥狀的病毒病非常相似,如果發(fā)病豬只受到觸摸或驚嚇刺激,可能出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào),多數(shù)還伴有腹瀉。在發(fā)病后3~4 h 內(nèi),發(fā)病豬往往因呼吸肌麻痹而窒息死亡。如果動(dòng)物急性發(fā)病后食欲恢復(fù),一些病豬經(jīng)過耐心照料可以恢復(fù),但耐過豬可能出現(xiàn)肌肉萎縮或者后遺性癱瘓。

        表1 豬捷申病毒病原學(xué)調(diào)查匯總數(shù)據(jù)[4]

        表2 豬捷申病毒病原學(xué)調(diào)查匯總數(shù)據(jù)

        2.1 腦脊髓炎

        腦脊髓炎是豬捷申病最典型的癥狀,各血清型的豬捷申病均可引起腦脊髓炎,然而毒株不同致病性不同,血清I 型毒株感染引起的腦脊髓炎最為嚴(yán)重。

        2.2 繁殖障礙

        母豬感染該病毒后可出現(xiàn)繁殖障礙,表現(xiàn)為產(chǎn)死胎、木乃伊胎和不孕。

        2.3 肺炎、支氣管炎

        用分離到的捷申病毒豬只回歸試驗(yàn)30 d 后剖檢可見肺臟嚴(yán)重壞死,肺的心葉、尖葉和中間葉有灰色實(shí)變區(qū),肺泡和支氣管內(nèi)充滿滲出液。

        2.4 心肌炎和心包炎

        剖檢可見胸膜粘連,心臟表面附著灰白色纖維素性滲出物卻不易剝落,心肌壞死和漿液性纖維素性心包炎病變。

        2.5 腹瀉

        從發(fā)病豬腸道分離到的病毒再感染試驗(yàn)豬,可引起試驗(yàn)豬腹瀉,剖檢可見腸道輕微出血,腸內(nèi)充滿黃色水樣內(nèi)容物。

        3 病理變化

        豬捷申病毒感染一般不引起特征性病變,雖然有腹瀉癥狀,但是剖檢小腸一般看不到腸絨毛萎縮,很容易與冠狀病毒或輪狀病毒感染區(qū)別開來,但是能看到腸道出血、腸壁變薄、腸腔中充滿黃色水樣內(nèi)容物。剖檢可見腦膜充血和水腫,病理組織學(xué)切片觀察發(fā)現(xiàn)腦組織呈以神經(jīng)細(xì)胞變性和壞死為特征的非化膿性腦炎;肺部尖葉和心葉可見灰色實(shí)變區(qū)。

        4 診斷

        早期的動(dòng)物傳染病診斷就是獸醫(yī)工作者根據(jù)臨床上豬群的發(fā)病癥狀和剖檢時(shí)的病理變化確診為某種疾病,后來隨著混合感染的增多,單一病原引起的發(fā)病豬只死亡基本上很少,豬病越來越復(fù)雜,現(xiàn)在一般都是根據(jù)發(fā)病豬群的臨床癥狀結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行。

        4.1 病毒分離

        病毒分離屬于傳統(tǒng)的傳染病確診方法,盡管耗時(shí)長、程序復(fù)雜,成功率不高,但是迄今仍是最可靠的傳染病確診手段。病毒分離的程序:一是采集病毒感染豬的腦、肺臟、淋巴結(jié)、小腸、大腸和糞便等病料;二是在病料組織中加入PBS 研磨成組織懸液并離心取上清液;三是將離心后的上清液過濾除菌;最后將過濾除菌后的上清液接種到PK-15 細(xì)胞或IBRS-2 細(xì)胞上盲傳幾代,同時(shí)以未感染的細(xì)胞作為對(duì)照,逐日觀察細(xì)胞病變情況。病變后的培養(yǎng)細(xì)胞用陽性血清可做熒光抗體染色或免疫酶染色鑒定病毒抗原。

        4.2 血清學(xué)診斷

        豬捷申病的血清學(xué)診斷方法有間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Dot-ELISA)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、免疫組化試驗(yàn)和病毒中和試驗(yàn)(VNT)。其中應(yīng)用最廣泛的就是間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。最具有權(quán)威性的還是病毒中和試驗(yàn),不但能夠確診病原,用相應(yīng)血清型的陽性血清還可以確定屬于哪種血清型。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)容易操作,對(duì)試驗(yàn)條件和人員要求不高,能夠檢測大批量樣本,適合基層實(shí)驗(yàn)室和養(yǎng)殖場做流行病學(xué)調(diào)查。

        4.3 PCR診斷

        PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))診斷技術(shù)是多種豬捷申病診斷方法中確診病原最為準(zhǔn)確、速度最快、可以大批量檢測病料的檢測技術(shù)。PCR診斷方法的優(yōu)勢是可以檢測各種類型的病料,而且不受其他疾病的干擾,3~4 h可以給出檢測結(jié)果。隨著PCR技術(shù)的成熟和基因測序技術(shù)的發(fā)展,目前11種血清型的豬捷申病毒的全部基因序列都已被解析。目前國內(nèi)針對(duì)豬捷申病建立起來的PCR診斷方法有一步法PCR、nRT-PCR、雙重PCR、多重PCR、熒光定量PCR;有的針對(duì)VP1基因,有的針對(duì)3D基因,有的針對(duì)L基因,有的針對(duì)5’端非編碼區(qū);有的學(xué)者還建立了可以同時(shí)檢測豬瘟、圓環(huán)病毒2 型和藍(lán)耳病等幾種疾病的PCR檢測方法,研究人員可以根據(jù)自己的實(shí)際情況選擇其中的一種。

        5 防治

        在治療豬捷申病方面,目前國內(nèi)外還沒有特效抗病毒藥物。盡管在該病發(fā)生的早期,國外利用疫苗控制住了該病,但是迄今在國內(nèi)尚無有效的疫苗上市,因此應(yīng)對(duì)本病的策略是做好生產(chǎn)管理和生物安全,降低發(fā)病率和死亡率。因此,建議豬場堅(jiān)持自繁自養(yǎng),盡量減少外購豬的數(shù)量;必須引種時(shí)要做好檢疫,務(wù)必要引進(jìn)病原和抗體雙陰性的種豬。做好生產(chǎn)管理,豬群密度不要過大,冬季做好仔豬的保暖工作,為豬群提供優(yōu)質(zhì)營養(yǎng)均衡的飼料,提高豬群健康水平和自身抗病能力。搞好豬場清潔衛(wèi)生和消毒工作,及時(shí)清理糞便,對(duì)于病死豬要做無害化處理,消滅傳染源。加強(qiáng)圈舍通風(fēng),降低氨氣濃度,為豬群提供清新空氣,同時(shí)做好豬瘟、偽狂犬、藍(lán)耳病、口蹄疫基礎(chǔ)免疫,筑牢豬群健康防線。豬群一旦感染發(fā)病,除用抗菌藥物防止細(xì)菌繼發(fā)感染外,還要采取隔離措施,防止發(fā)病豬舍的病毒傳到健康舍。

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