黃建華 唐 偉

永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南永州425000

規(guī)模化養(yǎng)豬生產(chǎn)過程中，豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病、口蹄疫等依然是危害當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病。免疫預(yù)防依然是豬場疫病防控的重要手段，免疫效果受諸多因素影響，血清學(xué)抗體檢測顯得尤為重要。通過血清學(xué)抗體檢測可以實(shí)時(shí)監(jiān)測群體免疫狀況，了解豬群免疫水平，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題及潛在風(fēng)險(xiǎn)，從而能夠更好地指導(dǎo)豬場制定科學(xué)的疫病防控計(jì)劃。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2018年3月，筆者對湖南某存欄母豬800 頭左右的商品豬場進(jìn)行采樣。根據(jù)豬場豬群類別及生長階段，種豬按照公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬，生長豬按照30、60、90、120、160 不同日齡采集血清。統(tǒng)一前腔靜脈采血，采血過程中做好標(biāo)記，血液采集完畢后置于30～37℃孵育0.5 h，待血液凝固、血清析出后帶回實(shí)驗(yàn)室分離血清。采樣方案見表1。

1.2 主要儀器及試劑

豬瘟病毒（CSFV）抗體檢測試劑盒、藍(lán)耳病病毒（PRRSV） 抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病毒gB（PRVgB）抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病毒gE（PRV gE）抗體檢測試劑盒由IDEXX 公司生產(chǎn)?？谔阋逴型（FMD-O）抗體檢測試劑盒由意大利IZSLER 公司生產(chǎn)。全自動ELISA 工作站由TECAN 生產(chǎn)。酶標(biāo)儀采用Thermo Fisher 酶標(biāo)儀。移液器采用Sartorius生產(chǎn)的。

1.3 檢測方法

嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行抗體檢測與結(jié)果判定。

CSFV 結(jié)果判定：阻斷率≥40 為陽性，阻斷率≤30 為陰性，阻斷率在30%～40%為臨界/可疑；PRRS結(jié)果判定：S/P 值＜0.4 為陰性，S/P 值≥0.4 為陽性；PRV gE gB 結(jié)果判定：S/N 值≤0.60 為陽性，S/N＞0.70 為陰性，0.60＜S/N≤0.70 為可疑；口蹄疫O 型抗體檢測結(jié)果判定：阻斷率≥50為陽性，阻斷率＜50為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 豬瘟抗體檢測結(jié)果分析

公豬豬瘟抗體陽性率和合格率均為100%，抗體水平不錯，免疫效果較好。后備母豬有個(gè)別豬瘟免疫不合格，建議補(bǔ)免，豬瘟抗體合格后方可進(jìn)入生產(chǎn)群。經(jīng)產(chǎn)母豬群豬瘟抗體陽性率為100%、合格率為95.6%，阻斷率均值74.08，離散度17.28，抗體整齊，免疫效果較好；分生產(chǎn)階段看，哺乳母豬群抗體水平稍低于懷孕母豬，可能與哺乳期抗體、體質(zhì)下降過快等因素有關(guān)。30日齡和60日齡豬瘟抗體水平不理想，說明一免后效果不好，可能豬群在保育階段的健康度不整齊，或存在母源抗體干擾，需調(diào)整首免日齡；2 次豬瘟苗免疫后，90～160日齡檢測的結(jié)果可知，二免的效果不錯。詳情見表2。

表1 豬場各類豬群血清采集方案 份

2.2 藍(lán)耳病抗體檢測結(jié)果分析

母豬（后備母豬、懷孕母豬和哺乳母豬）的抗體陽性率均達(dá)到96.7%，且S/P 值大于2.5的比例為0.00%，表明母豬的藍(lán)耳病抗體水平處于較為穩(wěn)定的狀態(tài)。公豬的藍(lán)耳病抗體陽性率為85.7%，S/P 值沒有高于2.5，公豬藍(lán)耳情況較為穩(wěn)定。生長豬群：從30日齡、60日齡、90日齡、120～160日齡豬群藍(lán)耳病抗體變化規(guī)律可以看出，抗體陽性率呈上升的趨勢，且S/P 值大于2.0的比率在保育期至育肥前中期逐漸升高，隨后又下降，很可能保育中后期到育肥期豬群的藍(lán)耳病處于不穩(wěn)定的狀態(tài)。建議：做好相關(guān)防治及生物安全工作，有條件的豬場，在做好抗體檢測的同時(shí)應(yīng)做好病原檢測，尤其是種用后備公母豬引種之前，必須隔離和檢測，了解豬群的藍(lán)耳病狀態(tài)，盡可能避免將野毒引起豬場。詳情見表3。

2.3 偽狂犬抗體檢測結(jié)果分析

公豬群偽狂犬gE 野毒抗體陽性率達(dá)62.5%，平均抗體滴度在中等水平（平均S/N 值0.366，值越低說明感染越嚴(yán)重）；送檢經(jīng)產(chǎn)母豬群陽性率為95.65%；后備母豬有2 頭偽狂犬gE 抗體陽性；生長豬群在保育階段偽狂犬gE 抗體陽性率比較低，到育肥后期偽狂犬gE 抗體陽性率逐漸上升，則說明豬群受到了野毒攻擊，且野毒攜帶率較高。建議：1）加強(qiáng)種豬群偽狂犬監(jiān)測與免疫工作，普免1年4次，至少3 次，商品肥豬分別在60日齡和120日齡各注射1 次；2）公豬群全群檢測，堅(jiān)決淘汰陽性帶毒公豬，種豬一旦感染偽狂犬病毒后，會終身帶毒，通過水平傳播給其它豬群或垂直傳播給下一代，特別是偽狂犬抗體陽性的公豬（精液傳播），中和抗體是無法突破血睪屏障的，所以從全場健康及凈化角度看淘汰偽狂犬gE 陽性的公豬；3）做好后備豬免疫和補(bǔ)欄前的隔離監(jiān)測工作，確保引進(jìn)的后備豬均為偽狂犬野毒陰性。詳情見表4和表5。

表2 各階段豬群豬瘟血清檢測結(jié)果

表3 各階段豬群PRRS血清檢測結(jié)果

表4 各階段豬群PR-gE血清檢測結(jié)果

表5 各階段豬群PR-gB血清檢測結(jié)果

2.4 口蹄疫抗體檢測結(jié)果分析

公豬群和經(jīng)產(chǎn)母豬群口蹄疫抗體陽性率和合格率均為100%，抗體整齊，免疫效果較好。后備母豬口蹄疫抗體陽性率為50%，合格率僅為25%，抗體水平比較差，建議加強(qiáng)免疫。生長豬群整個(gè)保育期至育肥前期口蹄疫抗體水平都不理想（可能受首免日齡、豬群健康或其他因素影響），育肥中后期抗體水平比較高（說明口蹄疫二免或三免效果良好）。詳情見表6。

表6 各階段豬群FMD血清檢測結(jié)果

3 討論

根據(jù)監(jiān)測結(jié)果豬場免疫程序需做適當(dāng)調(diào)整，特別是仔豬豬瘟首免日齡需要調(diào)整，藍(lán)耳病的免疫必須加強(qiáng)。

對引進(jìn)的種豬需做檢測，經(jīng)檢測后，偽狂犬gE為陰性、豬瘟抗體合格、藍(lán)耳病免疫穩(wěn)定的種豬才能引進(jìn)。引進(jìn)后還需要經(jīng)過隔離觀察、馴化完成后才能合群。

為了豬場能長期增效，豬場要加強(qiáng)豬偽狂犬病毒凈化工作，加強(qiáng)檢測和免疫工作，制定3年凈化方案。