粟元,李舒婷,許文濤,2*
1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院,北京食品營養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心,北京 100083;2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué),農(nóng)業(yè)農(nóng)村部轉(zhuǎn)基因生物食用安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(北京),北京 100083
隨著我國經(jīng)濟(jì)水平的提升,物理、化學(xué)、生物等各學(xué)科飛速發(fā)展,對不同領(lǐng)域的檢測技術(shù)提出了更高的要求,如靈敏度更高、特異性更好、檢測時間更短、成本更低和能夠現(xiàn)場檢測等。
核酸作為重要的生物大分子,在生物生命活動中具有重要的作用。近年來,基于核酸的生物傳感器在食品、醫(yī)藥、環(huán)境檢測等方面廣泛應(yīng)用,其主要通過熒光、顏色、電化學(xué)信號、試紙條等模式實(shí)現(xiàn)信號轉(zhuǎn)化。
氣體生物傳感器主要利用氣體實(shí)現(xiàn)檢測,具有簡單、方便、快速等特點(diǎn)。目前,氣體生物傳感器多是將識別信號轉(zhuǎn)化為顏色而實(shí)現(xiàn)對各種靶物質(zhì)的檢測,檢測范圍主要集中在生物標(biāo)志物、癌細(xì)胞、甲胎蛋白和端粒酶等。本文從氣體信號輸出的角度出發(fā),介紹了氣體生物傳感器的性質(zhì),總結(jié)了氣體生物傳感器的分類,綜述了氣體生物傳感器的信號識別原理和信號輸出方式,最后對氣體生物傳感器的傳感材料、搭建方式提出了展望,以期為氣體傳感器的相關(guān)研究提供參考。
氣體廣泛存在于各行各業(yè)中,和人類呼吸息息相關(guān)。嗅覺在人類發(fā)展和生物社會交往中起著基礎(chǔ)性的作用,人工嗅覺是模擬生物嗅覺系統(tǒng),利用氣體電極陣列結(jié)合信號處理單元和算法而組成的系統(tǒng)。人類對人工嗅覺系統(tǒng)的研究最早可追溯至1961年,當(dāng)時Moncrieff制成了一種機(jī)械式的氣味檢測裝置。1964年,Wilkens和Hatmen建立了基于氣味分子在電極上發(fā)生氧化還原反應(yīng)的第一個人工嗅覺系統(tǒng)[1]。作為人工嗅覺的“嗅覺細(xì)胞”的氣體傳感器是很重要的,其主要用于接收關(guān)于氣體的化學(xué)信息,將它們作為輸入信息轉(zhuǎn)化成可測量的信號,并將數(shù)據(jù)發(fā)送到服務(wù)器[2],從而實(shí)現(xiàn)對可揮發(fā)性氣體樣品的快速、準(zhǔn)確、系統(tǒng)地鑒別和分析。
氣體生物傳感器是基于生物識別、生物轉(zhuǎn)化及氣體信號輸出的傳感器。其主要有3大要素:“酶”介導(dǎo)的反應(yīng)、氣體信號和傳感材料。信號識別的原理是構(gòu)建基于“酶”的氣體發(fā)生體系,當(dāng)目標(biāo)氣體與傳感材料接觸,氣體分子在傳感材料表面或體系中反應(yīng),引起傳感材料的電學(xué)特性、光學(xué)特性或其他特性發(fā)生變化;“酶”泛指各種具有產(chǎn)氣催化活性的物質(zhì),其作為氣體生物傳感器的信號轉(zhuǎn)化器,將氣體信號轉(zhuǎn)化為靶物質(zhì)量;最后利用氣體濃度檢測儀、氣壓儀、pH計將它們轉(zhuǎn)化成可視氣體的濃度值、氣壓值、pH或觀察顏色變化,通過不同濃度的靶物質(zhì)引起體系“酶”量的變化,進(jìn)而引起氣體物質(zhì)的量發(fā)生變化,最后通過建立濃度、氣壓、pH、顏色與靶物質(zhì)間的關(guān)系(其中,氣體濃度值、氣壓值、pH、顏色作為縱坐標(biāo),不同濃度的靶物質(zhì)作為橫坐標(biāo)),從而實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)的快速、準(zhǔn)確、靈敏地定量定性檢測。
氣體生物傳感器種類多樣,根據(jù)信號轉(zhuǎn)化方式的不同,可將氣體生物傳感器劃分為蛋白酶介導(dǎo)的氣體生物傳感器、核酸酶介導(dǎo)的氣體生物傳感器、模擬酶介導(dǎo)的氣體生物傳感器、生物細(xì)胞介導(dǎo)的氣體生物傳感器、生化反應(yīng)介導(dǎo)的氣體生物傳感器5大類。
本文總結(jié)了氣體生物傳感器的搭建原理及分類,如圖1所示。以我國傳統(tǒng)的太極圖為基礎(chǔ),圖1中心圓分為黑白兩部分,以陽動、陰靜為標(biāo)志,即陰陽交錯。白色部分(陽極)呈現(xiàn)了反應(yīng)體系產(chǎn)生的各種氣體,如O2、NH3、H2S、NO2、H2等。當(dāng)氣體與不同的傳感材料接觸時,不同的傳感材料會發(fā)生相應(yīng)的變化,這些變化主要呈現(xiàn)在黑色部分(陰極)。這些主要包括電學(xué)特性變化和光學(xué)特性變化,電學(xué)特性如電阻、電壓、電流,光學(xué)特性如吸收光譜、波長等,所以將相應(yīng)變化呈現(xiàn)在陰的部分。陰陽運(yùn)動所需的基本傳感介質(zhì)“酶”如五行(金、木、水、火、土),對應(yīng)本文提出的“酶”的5大分類,即蛋白酶、核酸酶、模擬酶、生物細(xì)胞、生化反應(yīng)。蛋白酶通過酶量變化使靶物質(zhì)的量發(fā)生變化;核酸酶通過構(gòu)象變化使相連的靶物質(zhì)量發(fā)生變化;模擬酶通過形貌和價態(tài)發(fā)生變化使靶物質(zhì)的量發(fā)生變化;生物細(xì)胞通過酶的基因表達(dá)使靶物質(zhì)的量發(fā)生變化;生化反應(yīng)通過微生物的分解產(chǎn)生氣體使靶物質(zhì)含量發(fā)生變化。環(huán)繞五行的衛(wèi)星表示每一類氣體生物傳感器中具體的“酶”,蛋白酶介導(dǎo)的氣體生物傳感器中的“酶”包括辣根過氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)、脲酶(urease)、過氧化氫酶(catalase,CAT);核酸酶介導(dǎo)的氣體生物傳感器中的“酶”是G-四鏈體;模擬酶介導(dǎo)的氣體生物傳感器中的“酶”分為納米酶[如碳納米管(carbon nanotube,CNT)、石墨烯、納米纖維等]、金屬有機(jī)骨架(metal-organic frameworks,MOFs)、小分子物質(zhì)(例如熒光素FAM)等;生物細(xì)胞介導(dǎo)的氣體生物傳感器中的“酶”包括芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、李斯特菌、銅綠假單胞菌等;生化反應(yīng)介導(dǎo)的氣體生物傳感器主要是指通過發(fā)酵反應(yīng)產(chǎn)生氣體,利用氣體物質(zhì)的量實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)的質(zhì)量控制。
圖1 氣體生物傳感器的分類Fig.1 Classification of gas biosensors
根據(jù)傳感方法,氣體生物傳感器的氣體信號識別機(jī)理可分為3類:一是利用基于電測量的轉(zhuǎn)導(dǎo)原理,使電學(xué)信號發(fā)生變化,如電阻、電壓、電流;二是利用光學(xué)測量使光學(xué)信號發(fā)生變化,如熒光、顏色、波長、偏振;三是利用其他特性發(fā)生變化,如質(zhì)量變化、溫度變化[3]、壓力變化、酸堿性變化、顏色變化等。
3.1.1電阻變化 電阻變化是電學(xué)信號識別模式的主要方式,大部分傳感材料與氣體接觸時會使電阻發(fā)生變化,利用不同的傳感材料檢測不同的氣體,根據(jù)傳感材料的類別不同可分為金屬氧化物材料、納米材料和有機(jī)高分子材料。
①金屬氧化物材料。金屬氧化物材料具有比表面積大、機(jī)械柔韌性好、對不同氣體的響應(yīng)靈敏度高和化學(xué)穩(wěn)定性好等優(yōu)勢。其機(jī)理是氣體分子在傳感材料表面進(jìn)行還原反應(yīng),引起金屬氧化物表面的電子變化,從而使傳感材料電導(dǎo)率發(fā)生變化[4]。常用的金屬氧化物傳感材料可分為3類:單一金屬氧化物材料、復(fù)合金屬氧化物材料、混合金屬氧化物材料。單一金屬氧化物材料包括SnO2、WO3、In2O3、TiO2、ZnO、Cu2O。Lu等[5]使用微機(jī)電系統(tǒng)技術(shù)生產(chǎn)雙面SnO2薄膜乙醇?xì)怏w傳感器,測量結(jié)果表明其對乙醇具有較好的感應(yīng)SnO2的能力。復(fù)合金屬氧化物材料包括Zn2SnO4、NiCuO。Xu等[6]通過乙二胺輔助水熱法合成Zn2SnO4層狀微球。由微球制成的傳感器在170°C時對H2S表現(xiàn)出良好的響應(yīng)和選擇性,最低檢測限(limit of detection,LOD)為50 pg/mL?;旌辖饘傺趸锊牧习⊿nO2-TiO2-In2O3、CeO2-SnO2、MoO3-TiO2、CeO2-TiO2[6]。Ali等[7]采用單步法沉積CeO2-TiO2復(fù)合薄膜,以研究其光電化學(xué)(photoelectrochemistry,PEC)特性。復(fù)合薄膜的PEC研究表明,在N型CeO2和N型TiO2之間形成的異質(zhì)結(jié)促進(jìn)了電子和空穴的分離和傳輸,在550℃下制造的膜具有更高的孔隙率,能夠形成更大的接觸界面,從而產(chǎn)生更高的光活性。
②納米材料。納米材料具有較高的單位質(zhì)量表面積,具有獨(dú)特的力學(xué)、光學(xué)、電學(xué)、催化和磁性能。除此之外,當(dāng)粒子在納米尺度上時,新的物理和化學(xué)性質(zhì)出現(xiàn)。納米碳材料容易與其他納米材料雜交,尤其是納米顆粒貴金屬和氧化物,可以增強(qiáng)氣體傳感器的性能。近年來,基于碳納米管、石墨烯、碳納米纖維和炭黑等納米材料的新一代氣體傳感器已經(jīng)深入人心。下文分別對這幾種納米材料進(jìn)行介紹。
一般來說,碳納米管可分為3類,即單壁碳納米管(single-walled carbon nanotube,SWCNT)、雙壁碳納米管(double-walled carbon nanotubes,DWCNT)和多壁碳納米管(multi-walled carbon nanotubes,MWCNT)[8]?;趩伪谔技{米管的氣體傳感器對NO2高度敏感。Latif等[9]發(fā)現(xiàn)半導(dǎo)體單壁碳納米管在NO2和NH3等氣體中的電導(dǎo)率變化可以高達(dá)三個數(shù)量級,且電導(dǎo)率迅速增加和降低。SO2、NH3、NO2等有毒分子在小于100 pg/mL的濃度范圍內(nèi)特別敏感。隨著單壁碳納米管的成功,多壁碳納米管也被廣泛地用于氣體傳感。Chung等[10]報道了基于多壁碳納米管的氣體傳感器的早期工作。他們發(fā)現(xiàn),由于碳納米管的外殼和內(nèi)殼之間存在氧化連接,多壁碳納米管氣體傳感器對氧氣敏感。Cava等[11]開發(fā)了一種自組裝方法,以獲得應(yīng)用于電阻式氣體傳感器器件的多壁碳納米管薄膜,氧氣傳感器裝置的靈敏度是通過常規(guī)鑄造沉積制成的薄膜的3.4倍。
石墨烯是具有蜂窩狀晶格結(jié)構(gòu)的碳原子單層結(jié)構(gòu),具有優(yōu)異的熱、電子和光學(xué)性能。氣體分子與石墨烯表面接觸,被吸附在石墨烯表面,誘導(dǎo)石墨烯電導(dǎo)率的改變。由于石墨烯具有較高的電子遷移率,理論分析預(yù)言石墨烯有望作為氣敏材料的候選材料[12]。
納米纖維復(fù)合氣體傳感器對各種有機(jī)蒸氣具有較高的靈敏度。Kang等[13]報道了用CNT代替炭黑以聚丙烯腈為原料制備納米碳纖維,制備的NO氣敏元件對NO氣體的敏感性提高了約8倍,響應(yīng)時間減少約60%。
炭黑材料應(yīng)用于氣體分子傳感的應(yīng)用較少。其傳感原理是當(dāng)暴露于蒸汽時,炭黑材料的膨脹行為是可逆的。將炭黑-聚合物復(fù)合薄膜涂覆在預(yù)先形成圖案的電極上,其電阻由于待測試的蒸汽引起的體積變化而變化。
應(yīng)用納米復(fù)合材料的納米雜化體系結(jié)構(gòu)在氣體傳感中得到了廣泛的研究。許多金屬納米顆粒及其化合物,包括Mg、Al、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Zn、Mo、Rh、Pd、Sn、W、Pt、Au和Pb,已經(jīng)被用來修飾單壁碳納米管薄膜,以增強(qiáng)基于碳納米管、石墨烯的氣體傳感器的傳感性能[14]。Lone等[15]研究發(fā)現(xiàn),金納米顆粒裝飾的SWCNT傳感器能夠?qū)H3顯示出極好的靈敏度。與原始SWCNT傳感器相比,Au裝飾的SWCNT傳感器具有快速響應(yīng)和恢復(fù)、高電阻變化、高質(zhì)量可重復(fù)性、長期穩(wěn)定性和出色的選擇性等優(yōu)勢。Jyoti等[16]制備了還原型氧化石墨烯(reduced graphene oxide,rGO)薄膜和rGO-ZnO復(fù)合薄膜。研究表明rGO-ZnO復(fù)合材料是制備高選擇性室溫NO2氣體傳感器較好的候選材料,rGO-ZnO復(fù)合傳感器的LOD為4 mg/kg。
③有機(jī)高分子材料。導(dǎo)電聚合物對揮發(fā)性有機(jī)化合物的敏感性是通過電阻的變化來測量的。導(dǎo)電聚合物通常由相應(yīng)單體的化學(xué)或電化學(xué)氧化合成,最廣泛使用的傳感器涂層單體是聚吡咯、聚苯胺和聚噻吩[8]。此外,酞菁薄膜由于其高的熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性而應(yīng)用廣泛,薄膜對NO2顯示出最高敏感性。近年來,卟啉、卟吩和它們的衍生物、絡(luò)合物、蒽、二萘嵌苯、β-胡蘿卜素等也作為氣敏材料的研究對象,并五苯、鈷酞菁、氯化鈷酞菁和有機(jī)紅色甲基染料在氨和乙醇蒸氣作用下具有電阻敏感性能。
3.1.2電壓變化 電壓變化包括催化極化反應(yīng)和離子反應(yīng)。①催化極化反應(yīng)。在金屬-絕緣層-半導(dǎo)體結(jié)構(gòu)裝置中,可滲透的金屬柵極允許氫氣通過,進(jìn)入柵極-絕緣體界面[17],當(dāng)氣體與催化活性表面相互作用時,催化金屬和氧化層的表面與界面發(fā)生極化,從而引起功函數(shù)的變化[18],閾值電壓隨著柵極材料(通常是催化金屬)與某些氣體(如氫氣)的相互作用而變化[19]。
②離子反應(yīng)。有的氣敏材料在氣體中會產(chǎn)生離子,如固體電解質(zhì),它是依靠離子或質(zhì)子來實(shí)現(xiàn)傳導(dǎo)的一類固態(tài)物質(zhì),其原理是氣敏材料在一定氣體中會產(chǎn)生離子,離子的遷移和傳導(dǎo)形成電勢差,根據(jù)電勢差來實(shí)現(xiàn)氣體濃度大小的測定。這種材料在一定溫度下靈敏度好、選擇性好,目前已經(jīng)用于檢測空氣中的PH3、H2S、NH3等有害氣體。Wang等[20]利用一種固體聚合物鉑電極實(shí)現(xiàn)了對H2S的定量檢測,此方法響應(yīng)速率快(10 s),線性范圍良好(0~100 mg/L)。而且此固體聚合物電解質(zhì)傳感器在每天以100 mg/L的濃度連續(xù)進(jìn)樣4 h的條件下,可連續(xù)用7個月,有極好的穩(wěn)定性。
3.1.3電流變化 部分傳感材料通常由一層貴金屬組成,例如將與碳結(jié)合的金涂覆在疏水膜上。在室溫下,待測氣體分子催化傳感材料表面的揮發(fā)性分子發(fā)生電化學(xué)氧化或還原[21],目前可用于各種有毒氣體的檢測,并通過測量傳感器中流動的電流來確定氣體濃度。當(dāng)應(yīng)用于電化學(xué)活性氣體的檢測和測量時,該技術(shù)具有良好的相關(guān)性,但它們對多種化合物,尤其是芳烴不敏感[22]。
光學(xué)傳感通用性良好,能夠充分利用氣相分子之間的相互作用,吸附在敏感層上,如光纖化學(xué)材料,從而導(dǎo)致其光學(xué)性質(zhì)的變化[22]。
3.2.1熒光變化 熒光指示劑尼羅紅染料沉積在具有不同極性、疏水性、孔徑、彈性和膨脹傾向的聚合物基質(zhì)的光纖中,能夠與蒸汽分子相互作用形成不同的獨(dú)特傳感區(qū)域[23]。Terra等[24]用聚甲基丙烯酸甲酯(polymethyl methacrylate,PMMA)的靜電紡絲納米纖維作為傳感材料,研究表明其發(fā)光強(qiáng)度與氯仿濃度的曲線能夠確定所開發(fā)的傳感平臺的靈敏度、線性范圍和檢測限。
3.2.2吸收光譜變化 不同的氣體物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)不同、濃度不同和能量分布的差異而有各自不同的吸收光譜。許多化學(xué)物質(zhì)在電磁光譜的紫外/可見光、近紅外或中紅外區(qū)域表現(xiàn)出強(qiáng)烈的吸收,吸收線或吸收帶對每一物種都是特定的,這是它們被檢測和測量的基礎(chǔ);不同光譜區(qū)域的吸收光譜具有不同的特性,在紅外指紋區(qū)域,氣相吸收光譜表現(xiàn)出窄線作為離散能級的分子振動[25]。Larsen等[26]提出了利用紫外燈輔助紅外吸收光譜法測定H2S氣體的方法,空氣中的氧氣先將H2S轉(zhuǎn)化成SO2,而SO2在一定紅外光譜區(qū)域內(nèi)有很強(qiáng)的吸收峰,通過測定SO2可實(shí)現(xiàn)H2S的檢測。
3.3.1質(zhì)量變化 當(dāng)交流電壓施加在壓電石英晶體上時,材料以共振頻率振蕩,通常在10~30 MHz之間[27],產(chǎn)生的三維波在整個晶體中傳播,薄膜沉積在晶體表面,當(dāng)暴露于蒸汽中時,該層吸收氣體,導(dǎo)致其質(zhì)量增加,常用于檢測蒸汽[28]。
3.3.2溫度變化 當(dāng)可燃性氣體氧化燃燒或者在催化劑作用下燃燒,燃燒產(chǎn)生的熱量使電熱絲(細(xì)鉑絲線圈)升溫,從而使氣敏元件電阻值發(fā)生變化,通過測量電阻值變化可以得到氣體濃度。這種傳感器對不燃燒氣體不敏感。
3.3.3濃度變化 當(dāng)氣體與氣體濃度儀接觸,氣體濃度儀將待測氣體信息轉(zhuǎn)變?yōu)榕c氣體成分、濃度或時間相關(guān)的可測物理信號組,通過信號采集電路獲取數(shù)字信號,經(jīng)過模式識別單元對含有待測氣體綜合氣味信息和隱含特征的數(shù)字信號的分析,最終得到氣體濃度。
3.3.4壓力變化 當(dāng)氣體與壓力傳感器接觸時,基片的距離發(fā)生改變,使電容容阻發(fā)生變化,從而使電流發(fā)生變化,進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為氣壓值顯示。由反應(yīng)體系產(chǎn)生的氣體導(dǎo)致密封裝置氣壓變化,利用便攜式氣壓計檢測氣壓差,壓力傳感器構(gòu)成的便攜式氣壓計一般采用陶瓷或金屬材料,其結(jié)構(gòu)簡單,檢測速度快。
3.3.5酸堿性變化 不同氣體所具有的溶解度和酸堿性不同,可以利用某些氣體溶于水后體系pH的變化實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)的定量檢測。
3.3.6顏色變化 某些氣體在一定的反應(yīng)體系中會發(fā)生化學(xué)反應(yīng)引起反應(yīng)體系顏色的變化,通過觀察顏色的深淺實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)定性或半定量分析。
對于不同氣體需要選擇不同傳感材料,各種傳感材料的優(yōu)缺點(diǎn)如表1所示。近年來,化工廠、汽車排放、食品腐敗等會產(chǎn)生氨氣,對氨氣的檢測需求隨之大幅增加,以用于氨氣檢測的傳感材料為例,圖2顯示了不同傳感材料對氨的響應(yīng)時間和檢測下限的差異[4]。
表1 不同傳感材料的比較Table 1 Comparison of different sensing materials.
通過蛋白酶、核酸酶、模擬酶、生物細(xì)胞及特殊的生化反應(yīng)構(gòu)建產(chǎn)氣體系,產(chǎn)生的氣體作為氣體生物傳感器的信號輸入,利用氣體濃度儀、氣壓儀、pH計將氣體物理化學(xué)信息轉(zhuǎn)化成氣體濃度值、氣壓值和pH,利用濃度值、氣壓值、pH實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)的定量檢測;除此之外,某些反應(yīng)體系中產(chǎn)生的氣體會使體系顏色發(fā)生變化,直接通過肉眼實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)的可視化定性檢測,靶物質(zhì)量作為氣體生物傳感器的信號輸出。
圖2 不同傳感器材料對NH3傳感響應(yīng)時間和傳感檢測下限的差異[4] Fig.2 Comparison of response time and the detection lower limit of NH3 sensing with different sensor materials[4].
在反應(yīng)體系中,蛋白酶通過一定的載體與靶物質(zhì)孵育結(jié)合,反應(yīng)中蛋白酶催化底物產(chǎn)生氣體,通過加入不同濃度的靶物質(zhì),使蛋白酶結(jié)合量不同。催化過程中,隨著酶量變化,產(chǎn)生的氣體物質(zhì)量發(fā)生變化,進(jìn)而使?jié)舛戎?、氣壓值、pH、顏色發(fā)生變化,建立曲線關(guān)系后,實(shí)現(xiàn)靶物質(zhì)量的檢測。
核酸酶在一定條件下與靶物質(zhì)孵育相連,反應(yīng)中核酸酶催化底物產(chǎn)生氣體,通過加入不同濃度的靶物質(zhì),使核酸酶構(gòu)象和物質(zhì)量發(fā)生變化,從而使氣體物質(zhì)量發(fā)生變化,進(jìn)而造成濃度值、氣壓值、pH、顏色發(fā)生變化,建立曲線關(guān)系后,實(shí)現(xiàn)靶物質(zhì)量的檢測。
模擬酶通過核酸與靶物質(zhì)相連,反應(yīng)中模擬酶催化底物產(chǎn)生氣體,通過加入不同濃度的靶物質(zhì),使模擬酶的形貌和價態(tài)發(fā)生變化,產(chǎn)生的氣體物質(zhì)的量發(fā)生變化,進(jìn)而使?jié)舛戎?、氣壓值、pH、顏色發(fā)生變化,建立曲線關(guān)系后,實(shí)現(xiàn)靶物質(zhì)量的檢測。
生物細(xì)胞中的酶基因通過轉(zhuǎn)錄、翻譯成蛋白后催化底物產(chǎn)氣,靶物質(zhì)、RNA聚合酶同時競爭與啟動子的結(jié)合,在體系中加入不同濃度的靶物質(zhì),隨著酶基因的表達(dá),產(chǎn)生的氣體物質(zhì)量發(fā)生變化,進(jìn)而使?jié)舛戎怠鈮褐?、pH、顏色發(fā)生變化,實(shí)現(xiàn)靶物質(zhì)的量的檢測。
生化反應(yīng)通過微生物作用分解底物產(chǎn)生氣體,隨著微生物發(fā)揮作用,反應(yīng)速率逐漸升高或降低,測得濃度值、氣壓值、pH、顏色發(fā)生變化。通過這些變量,分析建立氣體濃度值、氣壓值、pH、顏色與不同濃度靶物質(zhì)間的關(guān)系,從而實(shí)現(xiàn)對靶物質(zhì)的定量定性檢測。
本文結(jié)合生物技術(shù)和物理電子技術(shù),介紹了基于不同“酶”催化的氣體生物傳感器的原理,根據(jù)傳感介質(zhì)“酶”的不同,總結(jié)了氣體生物傳感器的分類,歸納了氣體生物傳感器的信號識別機(jī)理及信號輸出機(jī)理,也分類闡述了識別氣體信號的不同傳感材料的特性和優(yōu)缺點(diǎn)。氣體生物傳感器在多方面都有很廣闊的發(fā)展和應(yīng)用前景[29]。
不同的傳感材料對不同氣體的響應(yīng)不同,優(yōu)缺點(diǎn)也不同。未來在開發(fā)多種靈敏性高、選擇性優(yōu)異、響應(yīng)時間短、恢復(fù)時間短及成本低的傳感材料具有廣闊前景??梢愿鶕?jù)不同氣體設(shè)計更多具有優(yōu)異性能的不同傳感材料,根據(jù)傳感材料的性質(zhì)設(shè)計一對一(檢測一種氣體)或一對多(檢測多種氣體)的傳感材料,使檢測時間、恢復(fù)時間縮短,檢測結(jié)果能夠更加穩(wěn)定、準(zhǔn)確。
除了蛋白酶、核酸酶、模擬酶、生物細(xì)胞及生化反應(yīng)外,可不斷尋找更多具有高催化效率的“酶”,從而搭建更多產(chǎn)生氣體的體系,使氣體生物傳感器具有更廣闊的應(yīng)用前景。未來可以設(shè)計更多方式方法開發(fā)制備種類多樣、高效催化的人工酶,可以將納米材料、金屬有機(jī)骨架等性能優(yōu)良的不同材料復(fù)合使用,對比篩選出高效模擬酶,使其應(yīng)用更加廣泛。