鄧 利 勝

(廣東省龍川縣婦幼保健院 河源 517300)

地中海貧血是臨床上較為常見的貧血類型，主要是因?yàn)橹榈鞍祖湝p少或消失導(dǎo)致的血紅蛋白異常性疾病，主要表現(xiàn)為溶血性貧血，影響患者的身體健康。在地中海貧血的診斷上，主要采用PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)與其他分子生物學(xué)方法相結(jié)合的方式，但是在篩查診斷過(guò)程中操作較為繁瑣，且費(fèi)用高，故難以大面積推廣[1～2]。全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀是目前最先進(jìn)的且自動(dòng)化程度最高的儀器，能夠提供原試管連續(xù)進(jìn)樣到最后電泳結(jié)果剖析的全過(guò)程。本次研究旨在探究地中海貧血篩查中全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2016年8月～2018年6月經(jīng)我院診斷證實(shí)為地中海貧血篩查的190患者作為此次研究對(duì)象，分別給予瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)與全自動(dòng)毛細(xì)血管電泳技術(shù)進(jìn)行診斷，年齡22～32歲，平均年齡(27.15±2.23)歲。所有研究對(duì)象均采用PCR基因診斷技術(shù)進(jìn)行確診。

1.2 研究方法

采集研究對(duì)象6ml空腹靜脈血，平均放置在3個(gè)試管中，每個(gè)試管中2ml。1號(hào)試管注入已加EDTA-K2血常規(guī)管中，用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)，其余兩個(gè)試管分別采用全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)、瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)進(jìn)行血紅蛋白電泳檢測(cè)，具體的檢測(cè)方法如下。

瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)：使用法國(guó)進(jìn)口的電泳系統(tǒng)和配套掃描系統(tǒng)，配套血紅蛋白電泳試劑盒。根據(jù)儀器說(shuō)明書上的內(nèi)容，逐步進(jìn)行洗滌、溶血制作溶血液。點(diǎn)樣：在電泳單元中放入點(diǎn)樣梳，使用相應(yīng)程序進(jìn)行電泳。半小時(shí)后，儀器自動(dòng)完成電泳和烘干等步驟。完成電泳后，要將膠片及時(shí)取出，放入到儀器染色單元。選擇相應(yīng)的程序，對(duì)儀器進(jìn)行自動(dòng)沖洗、染色、脫色、烘干。染色結(jié)束后，將膠片取出，并使用配套系統(tǒng)掃描結(jié)果。

全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)：使用法國(guó)進(jìn)口的全自動(dòng)毛細(xì)血管電泳儀和配套血紅蛋白電泳試劑盒，將標(biāo)本直接放試管架，儀器自動(dòng)吸樣，溶血，稀釋，電泳，出結(jié)果。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)[3]

當(dāng)血常規(guī)結(jié)果出現(xiàn)異常且MCV<82fl、MCH<27pg，HbA2<3.2%，但是血清鐵結(jié)果正常，為α-地中海貧血；HbA2<3.5%、HbF正常或有所增加，為β-地中海貧血。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩種檢查技術(shù)檢查結(jié)果的比較

全自動(dòng)毛細(xì)血管電泳技術(shù)檢出α-地中海貧血與β-地中海貧血率均高于瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)，兩種檢查技術(shù)在HbH檢出率中比較并無(wú)差異(P>0.05)，見表1。

表1 兩種檢查技術(shù)檢查結(jié)果的比較[n(%)]

疾病類型例數(shù)瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)全自動(dòng)毛細(xì)血管電泳技術(shù)χ2Pα-地中海貧血2214(63.64)20(90.91)4.658<0.05β-地中海貧血2617(65.38)25(96.15)7.923<0.05HbH65(83.33)6(100.00)1.090>0.05

2.2 各種類型地中海貧血的紅細(xì)胞、血紅蛋白、平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量指標(biāo)對(duì)比分析

通過(guò)對(duì)各種地中海貧血患者的紅細(xì)胞、血紅蛋白、平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量等指標(biāo)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)地中海貧血患者的平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量與異常血紅蛋白病、HbCS而言相對(duì)較低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

類型紅細(xì)胞(×1012/L)血紅蛋白(g/L)平均紅細(xì)胞體積(fl)平均紅細(xì)胞血紅蛋白(pg)α-地中海貧血4.52±1.21120.25±12.5582.23±0.1526.21±0.07β-地中海貧血4.68±1.22117.84±12.2276.54±0.1226.56±0.08HbCS4.33±1.18118.49±12.4883.39±0.19a27.48±0.09aHbH病4.47±1.20117.87±12.2582.45±0.17a26.89±0.10a

注：aHbCS及HbH病比較，P<0.05。

3 討論

地中海貧血是臨床上較為常見的貧血類型，可發(fā)生于各個(gè)年齡段，其中，α型和β型地中海貧血是最為常見的[4]。現(xiàn)階段主要采用PCR基因診斷技術(shù)對(duì)地中海貧血患者進(jìn)行確診，但此種技術(shù)對(duì)操作的要求高，操作較為復(fù)雜，加上診斷費(fèi)用較高，故很難在我國(guó)人群篩查中大面積的推廣和普及[5]。

本次研究比較了全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)和瓊脂糖凝膠電泳兩種技術(shù)的篩查準(zhǔn)確率，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是在α型還是β型地中海貧血的篩查中，全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)均有較高的檢出率，說(shuō)明此種技術(shù)優(yōu)勢(shì)更為顯著。全自動(dòng)毛細(xì)血管電泳技術(shù)在充滿電泳液的石英毛細(xì)血管中進(jìn)行電泳，也就使紅細(xì)胞樣品在溶血實(shí)際中被稀釋之后再注射進(jìn)毛細(xì)管的負(fù)極端，然后實(shí)施電泳分離，經(jīng)靠近正極端的415nm光波檢測(cè)裝置進(jìn)行相對(duì)定量。而瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)在對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí)其過(guò)程較為復(fù)雜，主要以人工操作為主，極易受到外界因素的影響，而全自動(dòng)毛細(xì)血管電泳技術(shù)在處理樣品的過(guò)程中將復(fù)雜的過(guò)程簡(jiǎn)單化，自動(dòng)化的處理方法可以有效避免人工干擾對(duì)結(jié)果造成的負(fù)面影響，且精確度相對(duì)較高，持續(xù)時(shí)間更短，經(jīng)濟(jì)性較強(qiáng)[6]。此外通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)地中海貧血患者的平均紅細(xì)胞體積與平均血紅蛋白濃度比HbCS及HbH病要低，也就是說(shuō)地中海貧血患者紅細(xì)胞體積減少、脆性降低可作為篩查的標(biāo)準(zhǔn)之一。

綜上所述，在地中海貧血的篩查中，全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)的檢出率高，可為地中海貧血的診斷和治療提供科學(xué)依據(jù)，值得推廣和應(yīng)用。