楊智芳，陳澤慧，陳安林，周 婷，陳先戀，楊韋家，蔡 甜

(1.遵義醫(yī)科大學附屬醫(yī)院 醫(yī)學檢驗科，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)科大學 研究生院，貴州 遵義 563099；3.遵義醫(yī)科大學，貴州 遵義 563099)

金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)是一種臨床上最常見的革蘭陽性球菌，是醫(yī)院交叉感染的重要病原菌，可引起皮膚軟組織、關節(jié)、植入物和導管相關性感染，以及肺炎、敗血癥和各種中毒性休克[1-3]。近年來隨著抗菌藥物的廣泛應用，金黃色葡萄球菌耐藥問題日益突出，特別是出現(xiàn)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistantstaphylococcusaureus,MRSA)之后，耐藥問題成為全球關注的熱點，一旦感染MRSA菌株，臨床治療尤為棘手，嚴重影響治療效果和愈后[4-5]。自1961年英國報道第1例MRSA以來，世界各地不斷出現(xiàn)MRSA感染病例，且近年來院內(nèi)感染MRSA呈迅速上升趨勢[6]。為了給臨床用藥提供參考依據(jù)以及防止耐藥菌的院內(nèi)傳播，分析我院2012～2016年臨床送檢標本中分離的S.aureus及MRSA菌株的臨床分布與耐藥變遷，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 收集2012年1月至2016年12月遵義醫(yī)科大學附屬醫(yī)院臨床各科室送檢的分泌物、痰液、膿液等標本中分離的菌株，去除同一患者相同部位重復菌株。

1.1.2 儀器及試劑 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間VITEK 質(zhì)譜儀及其基質(zhì)液，購于法國梅里埃公司；VITEK-2 compact 全自動微生物鑒定和藥敏分析儀、配套鑒定卡和藥敏卡，購于法國梅里埃公司。

1.1.3 細菌鑒定及藥敏檢測質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853，均購于上海寶錄生物科技有限公司。

1.2 方法 標本采集和分離培養(yǎng)按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行；細菌鑒定用1 μL接種環(huán)挑取少許單個菌落均勻涂在靶板點位上，立即加1 μL CHCA 基質(zhì)液，待基質(zhì)液完全干燥后使用 MALDI-TOF-MS(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization - Time of Flight - Mass Spectrometer) 進行細菌鑒定；應用VITEK-2 Compact全自動微生物鑒定分析儀進行藥敏試驗，參照2011～2015年美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI)標準判讀。

1.3 統(tǒng)計分析 采用WHONET 5.6統(tǒng)計軟件對檢測結果進行統(tǒng)計，采用例(n)和構成比(%)對結果進行描述。

2 結果

2.1S.aureus臨床標本種類及構成比 在2012～2016年S.aureus臨床科室送檢標本中，5年共分離3 278株S.aureus，標本來源占首位的是分泌物(45.6%)，其次是痰液(17.5%)和膿液(15.4%)，見表1。

表1S.aureus臨床標本來源及構成比(n，%)

標本類型2012年株數(shù)構成比2013年株數(shù)構成比2014年株數(shù)構成比2015年株數(shù)構成比2016年株數(shù)構成比合計株數(shù)構成比分泌物21741.926142.930847.432845.738048.51 49445.6痰液10219.710517.310716.514420.111714.957517.5膿液9017.49415.59013.88912.414218.150515.4血液5210.0599.76710.3699.68310.633010.1拭子305.8498.1396.045.7314.01905.8穿刺引流液101.991.581.2121.7121.5511.6尿液40.891.560.9182.550.6421.3其它132.5223.6253.8172.4141.8912.8合計518100.0608100.0650100.0718100.0784100.03 278100.0

2.2S.aureus科室分布及構成比 2012～2016年檢出S.aureus前5位科室分別是燒傷整形科(14.6%)、兒科(14.1%)、皮膚科(13.2%)、骨科(8.6%)及ICU(5.4%)，見表2。

表22012～2016年臨床科室S.aureus分布及構成比(n，%)

科室2012年株數(shù)構成比2013年株數(shù)構成比2014年株數(shù)構成比2015年株數(shù)構成比2016年株數(shù)構成比合計株數(shù)構成比燒傷整形10620.57913.07912.210514.611114.248014.6兒科5610.89816.110315.89012.511414.546114.1皮膚科499.5569.29214.212116.911514.743313.2骨科336.4538.76610.2537.4779.82828.6ICU356.8426.9284.3537.4506.42086.3神經(jīng)科336.4254.1274.2507.0425.41775.4甲乳科356.8243.9324.9273.8526.61705.2門急診275.2447.2264.0263.6405.11635.0心腦血管科203.9304.9335.1304.2314.01444.4腫瘤科356.8264.3294.5202.8212.71314.0內(nèi)分泌科112.1254.1192.9212.9192.4952.9泌尿科112.1193.1142.2233.2172.2842.6呼吸科203.9122.0162.5162.2131.7772.3胃腸消化173.3152.5152.381.1202.6752.3其他科室305.8609.97110.97510.4627.92989.1合計518100.0608100.0650100.0718100.0784100.03 278100.0

2.3S.aureus耐藥情況 藥敏結果顯示，2012～2016年S.aureus對青霉素幾乎全耐藥，5年耐藥率均>96%，其次為紅霉素(>60%)、四環(huán)素(>40%)，對慶大霉素、利福平、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星耐藥率分別為33.9%～6.6%、21.2%～4.4%、28.8%～9.3%、28.8%～9.6%、18.9%～8.9%，對萬古霉素和替加環(huán)素耐藥率為0.0%，見表3。

表32012～2016年S.aureus耐藥情況(n，%)

抗生素名稱2012年2013年2014年2015年2016年青霉素513(98.2)587(98.0)631(97.8)692(97.4)752(96.1)苯唑西林513(41.3)587(32.7)631(36.9)691(39.2)752(39.0)慶大霉素513(33.9)587(15.3)631(11.3)692( 9.8)752( 6.6)利福平513(21.2)587( 7.8)631( 5.7)692( 5.2)752( 4.4)環(huán)丙沙星513(28.8)587(13.1)631(11.3)692(10.3)752( 9.3)左氧氟沙星513(28.8)587(12.9)631(11.3)691(11.0)752( 9.6)復方新諾明513( 9.4)587(20.8)631(16.8)692(18.8)752(14.8)紅霉素513(69.0)587(65.2)631(62.4)691(63.7)752(61.8)萬古霉素513( 0.0)587( 0.0)631( 0.0)692( 0.0)752( 0.0)奎奴普丁/達福普汀513( 5.7)587(15.7)631(19.3)689(16.8)744(18.5)四環(huán)素513(57.3)587(46.5)631(42.9)692(42.5)752(40.7)呋喃妥因512( 1.0)585( 0.7)631( 0.2)692( 0.1)668( 0.0)莫西沙星106(18.9)582(11.7)631(10.1)692( 9.4)751( 8.9)利奈唑胺106( 0.0)582( 0.2)630( 0.0)686( 0.0)749( 0.0)替加環(huán)素105( 0.0)581( 0.0)631( 0.0)691( 0.0)750( 0.0)頭孢西丁2 (100.0)14 (42.9)631(36.9)692(39.2)752(39.0)

()外代表藥敏試驗的菌株數(shù)，()里表示檢測菌株的耐藥率。

2.4 2012～2016年檢出MRSA情況 在2012～2016年我院分離3 278株S.aureus中，MRSA為1 156株，占35.3%，見表4。

表42012～2016年臨床檢出S.aureus與MRSA情況(n，%)

年份S.aureusMRSAMRSA/S.aureus2012年51821541.52013年60819131.42014年65022935.22015年71825134.92016年78427034.4總數(shù)3 2781 15635.3

2.5 MRSA的耐藥情況 5年檢出的MRSA菌株對抗菌藥物的耐藥情況顯示，對紅霉素耐藥率在80%以上，對四環(huán)素的耐藥率大于59%，萬古霉素和替加環(huán)素未出現(xiàn)耐藥菌株，見表5。

表52012～2016年MRSA的耐藥情況(n，%)

()外代表藥敏試驗的菌株數(shù)，()里表示檢測菌株的耐藥率。

3 討論

S.aureus是引發(fā)患者感染的主要病原菌[7]。本次研究結果顯示，2012～2016年從送檢的標本中分離出S.aureus菌株數(shù)量逐年增多。菌株標本來源以分泌物為首，各年分離率均在40%以上，與文獻報道相近[8]。從科室分布情況可以看出，燒傷整形科、兒科、皮膚科、骨科及ICU等臨床科室S.aureus分離率較高。據(jù)報道，S.aureus是導致燒傷感染患者死亡及產(chǎn)生并發(fā)癥最常見的革蘭陽性球菌，嚴重威脅燒傷感染患者的生命[9]，主要原因是燒傷患者天然屏障遭到破壞，S.aureus分泌大量蛋白酶和毒力因子，破壞皮膚組織結構，溶解中性粒細胞，妨礙傷口愈合，從而引起創(chuàng)面常見的條件致病菌S.aureus感染，能否有效控制燒傷創(chuàng)面感染，對患者預后具有重要意義。

近5年，在我院分離的3 278株S.aureus中，MRSA檢出率維持在30%～40%之間，MRSA對β-內(nèi)酰胺類、紅霉素、四環(huán)素表現(xiàn)出較高的耐藥率，臨床上應避免該類藥物的過度使用；對氨基糖苷類、喹諾酮類等藥物的耐藥率呈現(xiàn)逐年下降趨勢，主要原因可能是近年來我院限制了耐藥率較高的抗菌藥物的使用，從而使部分藥物敏感性得到恢復。盡管我院未出現(xiàn)耐萬古霉素的S.aureus菌株，但有研究報道指出，已出現(xiàn)對萬古霉素耐藥的S.aureus菌株及對萬古霉素異質(zhì)性耐藥的MRSA菌株[10-13]。因此， 密切關注細菌的臨床分布及耐藥性變遷情況，重視臨床科室細菌耐藥性及多重耐藥菌株的監(jiān)測，加強院內(nèi)感染控制工作，對減少和預防耐藥菌的發(fā)生發(fā)展具有十分重要的意義。