陸德玲，張耀中，黃延昌，張國福，吳亞玉*

(1.山東濱農(nóng)科技有限公司，山東濱州 256600；2.山東省農(nóng)藥檢定所)

冬棗葉斑病又稱冬棗黑斑病，為冬棗常見病害，病原菌為細極鏈格孢菌(Alternariatenuissima)，主要危害冬棗葉片和果實。葉片感病初期失綠，后產(chǎn)生淺褐色小斑點，嚴重時葉片脫落。果實發(fā)病初期病斑為淺褐色針頭狀麻點，隨著棗果的膨大病斑逐漸擴大，果皮味苦失去食用價值，嚴重影響冬棗的產(chǎn)量和品質(zhì)。目前，冬棗葉斑病仍以化學(xué)防治為主，但取得農(nóng)藥登記證的農(nóng)藥寥寥無幾，合法藥劑嚴重缺乏，生產(chǎn)中亂用、濫用藥現(xiàn)象較嚴重。

吡唑醚菌酯屬于甲氧基丙烯酸酯殺菌劑，其環(huán)境相容性好[1]、有植物保健增產(chǎn)作用[2,3]，對多種作物病害防治具有很好效果[4-7]，丙環(huán)唑為三唑類殺菌劑之一，對多種植物病害有較好的防治效果。筆者以冬棗葉斑病為靶標(biāo)，分別對吡唑醚菌酯和丙環(huán)唑進行了室內(nèi)活性測定及田間藥效試驗，以明確兩種藥劑對冬棗葉斑病的防治效果，為合理使用提供參考。

1 試驗材料

供試藥劑：①97.5%吡唑醚菌酯原藥，巴斯夫歐洲公司生產(chǎn)；②95%丙環(huán)唑原藥，江蘇豐登作物保護股份有限公司生產(chǎn)；③250g/L吡唑醚菌酯微乳劑，山東濱農(nóng)科技有限公司提供；④250g/L丙環(huán)唑乳油，山東濱農(nóng)科技有限公司提供。

供試菌株：冬棗葉斑病菌，采自沾化縣古城鎮(zhèn)大王村冬棗園。經(jīng)室內(nèi)PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)分離培養(yǎng)獲純菌株，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院鑒定。

試驗棗園3處：分別在山東省沾化縣大高鎮(zhèn)東黃村、山東省無棣縣水灣鎮(zhèn)劉王村、河北省黃驊市齊家務(wù)鎮(zhèn)桃園村。栽植普通冬棗品種，樹齡分別為8年、10年、8年，株行距2m×3m。試驗植株長勢、栽培條件和雜草覆蓋一致。

2 試驗方法

2.1 室內(nèi)毒力測定

采用含毒介質(zhì)法[8]，將吡唑醚菌酯原藥、丙環(huán)唑原藥分別用丙酮溶解，制成母液，用含0.1%吐溫-80無菌水配制成5個有效成分系列濃度(吡唑醚菌酯640、320、160、80、40mga.i/L；丙環(huán)唑320、160、80、40、20mga.i/L)。于無菌操作臺上，在滅菌的錐形瓶中加入45mL滅菌的液體培養(yǎng)基，從低濃度到高濃度依次吸取5mL藥液，分別加入上述錐形瓶中，搖勻，倒入9cm培養(yǎng)皿中，待其凝固，制成含毒平板。每處理重復(fù)4次，以不含藥劑的平板為空白對照。用直徑5mm打孔器自菌落邊緣切取菌餅，接種于已凝固的含藥平板中央，菌絲面朝下，蓋上皿蓋，置于26±1℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種第7天，用十字交叉法測定菌落直徑，取其平均值，計算菌絲生長抑制率。根據(jù)菌絲生長抑制率，求毒力回歸方程、EC50(菌絲生長抑制率為50%時的藥劑濃度)、EC90(菌絲生長抑制率為90%時的藥劑濃度)及95%置信區(qū)間。

菌落直徑增長量(cm)=實測菌落直徑-0.5

菌絲生長抑制率(%)=(1-處理組菌落直徑增長量/對照組菌落直徑增長量)×100

2.2 田間藥效試驗

2014年進行田間防治試驗，試驗設(shè)計如表1。試驗藥劑濃度丙環(huán)唑根據(jù)藥劑的登記劑量設(shè)定，吡唑醚菌酯根據(jù)沾化區(qū)大高鎮(zhèn)東黃村棗農(nóng)常用劑量設(shè)定。

表1 試驗設(shè)計處理

于冬棗葉斑病發(fā)病初期施藥，用機動噴霧器全樹均勻噴霧至葉片正反兩面均勻著藥稍下滴為宜(666.7m2用液約75L)，連噴3次，間隔期10天。每處理重復(fù)4次，每小區(qū)5株樹，各小區(qū)隨機區(qū)組排列。

每次施藥前當(dāng)天和末次施藥后10天分別調(diào)查病情指數(shù)，共4次。每小區(qū)隨機選取3株樹標(biāo)定，在植株的東、西、南、北、中5個方位各選取2個棗吊標(biāo)記，調(diào)查棗吊的葉片總數(shù)和各級病葉數(shù)。

病葉分級：0級，無病斑；1級，病斑面積占整個葉片面積的5%以下；3級，病斑面積占整個葉片面積的6%～10%；5級，病斑面積占整個葉片面積的11%～20%；7級，病斑面積占整個葉片面積的21%～30%；9級，病斑面積占整個葉片面積的31%以上。

病情指數(shù)=Σ(各級病葉數(shù)×相對級數(shù))/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×9)×100。

防效(%)=(1-對照組藥前病指×處理組藥后病指)/(對照組藥后病指×處理組藥前病指)×100

2.3 數(shù)據(jù)分析

采用統(tǒng)計軟件DPS 7.05[9]對室內(nèi)數(shù)據(jù)分析，求做毒力回歸方程，EC50值、EC90值及其95%置信區(qū)間等，對田間試驗所得數(shù)據(jù)進行方差分析和鄧肯氏新復(fù)極差法多重比較。

3 結(jié)果與分析

3.1 室內(nèi)毒力測定結(jié)果

由表2可知，以藥劑濃度(mga.i/L)對數(shù)值為自變量x，菌絲生長抑制率值為因變量y，建立的吡唑醚菌酯原藥和丙環(huán)唑原藥的毒力回歸方程分別為y=3.2449+1.6782x和y=3.4537+1.7017x，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，線性相關(guān)性好。吡唑醚菌酯原藥、丙環(huán)唑原藥EC50分別為11.11和8.30mga.i/L；EC90分別為64.49和38.81mga.i/L，兩種藥劑的EC50和EC90均小于100mga.i/L，對冬棗葉斑病菌絲生長抑制作用明顯。

表2 吡唑醚菌酯、丙環(huán)唑?qū)Χ瑮椚~斑病菌室內(nèi)毒力結(jié)果

3.2 田間藥效試驗結(jié)果

如表3，山東無棣、山東沾化、河北黃驊三地田間試驗表明，250g/L吡唑醚菌酯微乳劑和250g/L丙環(huán)唑乳油兩種藥劑每10天噴藥1次連噴3次噴藥后，對冬棗葉斑病均有較好防治效果。250g/L吡唑醚菌酯微乳劑2500～1500倍液病情指數(shù)控制在1.91以下，防效在80%以上；250g/L丙環(huán)唑乳油3000～1500倍液病情指數(shù)控制在1.63以下，防效在83%以上。防效隨時間延長逐步提高，至30天(第3次噴藥10天)時，3個地方均達到最高。防效隨藥劑濃度升高而升高，均以1500倍液的防效始終最高，至30天時，兩種藥劑的防效達最高(>90%)，均顯著高于低濃度的防效。兩種藥劑之間的防效無顯著差異，各濃度噴施后冬棗均無明顯藥害反應(yīng)，對有益生物也無明顯不良反應(yīng)。

表3 兩種藥劑對冬棗葉斑病田間防治效果(2014)

注：表中同地點的同列數(shù)字旁小寫字母表示P<0.05水平差異顯著，大寫字母表示P<0.01水平差異極顯著。

4 小結(jié)與討論

吡唑醚菌酯和丙環(huán)唑都是內(nèi)吸性殺菌劑，但二者作用機制不同。吡唑醚菌酯屬于甲氧基丙烯酸酯類，為線粒體呼吸抑制劑；丙環(huán)唑為三唑類殺菌劑，主要通過阻礙真菌麥角甾醇的生物合成而影響真菌細胞壁的形成。

在冬棗葉斑病發(fā)生初期，間隔10天連續(xù)施藥3次，250g/L吡唑醚菌酯微乳劑2500～1500倍液控制病情指數(shù)1.92以下，防效在80%以上；250g/L丙環(huán)唑乳油3000～1500倍液控制病情指數(shù)1.63以下，防效在83%以上；兩種藥劑以1500倍液防效最高，均達90%以上，二者差異不顯著。對環(huán)境和有益生物無不良影響，可作為防治冬棗葉斑病的藥劑在生產(chǎn)上推廣使用。施藥間隔期7～10天，連續(xù)用藥3～4次。為了延緩抗藥性產(chǎn)生和延長藥劑使用壽命，建議防治冬棗葉斑病時兩種藥劑輪換施用。

室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，吡唑醚菌酯和丙環(huán)唑均能有效抑制冬棗葉斑病菌的菌絲生長，二者對孢子是否具有抑制作用及抑制作用的大小，仍需要進一步試驗驗證。