吳丹 李偉 劉冬冬 張夏平

(吉林省動物疫病預防控制中心, 長春 130062)

養(yǎng)殖業(yè)是我國現(xiàn)代化農業(yè)的支柱產(chǎn)業(yè),在農民增收以及脫貧致富方面扮演重要角色。 但在各方面因素持續(xù)作用下,動物疫病發(fā)生以及防控日漸復雜,如何快速、準確診斷各類動物疫病已成為目前急需解決的問題。 獸醫(yī)實驗室是開展動物疫病診斷重要支撐平臺,實驗室檢測結果的準確性對指導疫病防控意義重大,因此,全面、深入的分析影響檢測結果的各種因素,優(yōu)化檢測各環(huán)節(jié),對提高檢測結果準確性至關重要。

1 環(huán)境與儀器設備

1.1 環(huán)境

環(huán)境是影響檢測結果準確性的因素之一,體現(xiàn)在獸醫(yī)實驗室的濕度、溫度等方面。 某些檢測項目、檢測方法手段對實驗室環(huán)境有著比較嚴格的要求,檢測結果的準確性和環(huán)境濕度、溫度等密切相關。比如,酶聯(lián)免疫吸附試驗、血凝抑制試驗對實驗室內部溫度有著較高的要求,如果溫度過低,檢測試劑、樣品難以充分發(fā)揮作用,檢測中反應速度不在規(guī)定范圍內,導致檢測結果不準確。 此外,實驗室環(huán)境污染對檢測結果會造成較大的影響,如PCR 檢測時,陽性樣品氣溶膠污染,會造成假陽性,嚴重影響實驗結果的準確性。 因此,必須加強實驗室環(huán)境管控。

1.2 儀器設備

獸醫(yī)實驗室檢測儀器設備多樣化,其型號、規(guī)格、技術參數(shù)、性能等有著較大的差異。 一旦儀器設備使用管理不合理,加上日常校準檢查、維護等不到位,將會導致檢測結果較大的偏差。 比如,離心機有低速、高速以及常溫、冷凍之分,檢測性能、誤差系數(shù)各不相同,需要檢測內容和技術方法的要求,科學選擇使用離心機。 又比如,某些進口檢測設備,PCR儀器、全自動高壓滅菌鍋等其整體性能高于國產(chǎn)設備,它對環(huán)境要求也高于國產(chǎn)設備。 針對這種情況,實驗室運行中必須加強對環(huán)境的管理,做好日常校準及維護工作,更換老化嚴重、故障頻繁發(fā)生的儀器設備,在更新、升級基礎上提高各類儀器設備安全性以及整體性能,避免實際應用中頻繁出現(xiàn)故障問題,影響檢測結果的準確性。

2 檢測人員與樣本

檢測人員操作是否規(guī)范、樣本制作與保存是否達到要求都會在一定程度上影響實驗室檢測結果的準確性。 就人為影響因素來說,不同崗位檢測人員的職業(yè)道德素養(yǎng)、學歷層次以及對儀器設備操作的熟練程度、操作是否規(guī)范等都會影響檢測結果的準確性,使得檢測結果存在一定的偏差。 比如,在酶聯(lián)免疫吸附及血凝抑制實驗中,檢測人員不規(guī)范使用移液器,會影響實驗樣本與酶標板之間的反應,隨意改變、調整實驗操作步驟等,也都會讓檢測結果存在偏差。 加強檢驗人員培訓,規(guī)范常規(guī)試驗操作很必要。 就樣本影響因素而言,試驗樣品的種類較多,有分泌物、全血、血清、發(fā)生病變的臟器組織樣品等,采集樣品是否符合要求對檢測結果的準確性很重要。如血清是否溶血及溶血的程度,采集組織樣品是否是根據(jù)試驗目的進行采樣。 進行病原的分離鑒定,要采病原感染后含量較高的組織器官。 如,檢測偽狂犬可用腦組織,檢測豬瘟用扁桃體,檢測布病用流產(chǎn)胎兒、精液等,分離細菌去病變組織與正常組織交界地方等等。

3 試劑與檢測方法

3.1 診斷試劑

診斷試劑、檢測方法都會對檢測的結果造成不同程度的影響。 診斷試劑生產(chǎn)廠家不同、批次、敏感性、特異性等并不完全相同,即使是同一生產(chǎn)廠家不同批次其特異性和敏感性均不一樣,即使同一病原不同批次的試劑盒質量也存在較大的差異,這些都會對檢測結果的準確性造成影響。 因此在采購試劑盒之前要仔細檢查和篩選,必要時還應進行試劑盒的比對試驗后再確定要采購的試劑盒。

3.2 檢測方法

檢測結果準確性與所選用的檢測方法密切相關。 如,在進行病毒的分離鑒定時可用病毒中和試驗、血凝試驗(無血凝特性不適用)、酶聯(lián)免疫吸附試驗等。 要根據(jù)檢測項目的不同選擇合適的檢測方法,并控制操作的影響因素,在降低檢測成本的同時努力提高檢測結果的準確性。 同時,要嚴格按照試驗操作步驟進行檢測。 以“偽狂犬病”抗體檢測為例,可用的方法很多,包括酶聯(lián)免疫吸附試驗方法、乳膠凝集試驗方法,前者包括gE 野毒抗體檢測、gB免疫抗體檢測,我們要根據(jù)檢測目的不同選擇試驗法與檢測試劑盒。