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        前哨淋巴結(jié)組織冷凍切片與標(biāo)準(zhǔn)化操作方法的探討

        2019-11-18 07:26:02程宇
        智慧健康 2019年29期
        關(guān)鍵詞:前哨正確率切片

        程宇

        (浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院,浙江 杭州 310008)

        0 引言

        乳腺癌是一種較為常見的乳腺疾病,據(jù)相關(guān)研究表明:乳腺癌的發(fā)病率約占女性惡性腫瘤總數(shù)的10 %,該疾病的發(fā)病因與遺傳、年齡有關(guān),好發(fā)于婦女絕經(jīng)期前后,該疾病也會(huì)發(fā)于男性患者,但數(shù)量較少,約占乳腺癌總數(shù)的1 %。該疾病不僅嚴(yán)重影響患者的心理健康,更威脅了患者的生命健康安全[1]。乳腺癌腋窩淋巴轉(zhuǎn)移是乳腺癌中較為重要的獨(dú)立預(yù)后因素,該因素決定了治療方案的最終選擇[2]。特別是在乳腺外科手術(shù)范圍不斷精準(zhǔn)及縮小的形式下,對(duì)腋窩淋巴結(jié)的處理成為了當(dāng)前的主要問題[3]。前哨淋巴結(jié)主要是指收納器官或某區(qū)域組織淋巴結(jié)液的第一站淋巴結(jié),如前哨淋巴結(jié)未發(fā)生轉(zhuǎn)移,就不需要對(duì)腋窩淋巴結(jié)進(jìn)行清掃[4-5]。因此,如何準(zhǔn)確、迅速地對(duì)其進(jìn)行診斷,成為了臨床所需要思考的問題[6-7]。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取我院病理科2018 年7 月至2019 年7 月收治的680 例乳腺癌患者,隨機(jī)分為對(duì)照組及觀察組,每組各340 例。對(duì)照組患者均為女性,年齡24~68歲,平均(38.84±4.53)歲,病程時(shí)長(zhǎng)3 個(gè)月至6年,平均(2.43±0.23)年;觀察組患者均為女性,年齡22~69 歲,平均(38.87±4.52)歲,病程時(shí)長(zhǎng)4 個(gè)月至6 年,平均(2.42±0.25)年。兩組患者一般資料無明顯差異,P<0.05,具有可比性。

        1.2 方法

        對(duì)照組使用術(shù)后石蠟切片進(jìn)行診斷:選取個(gè)人綜合素質(zhì)較高的醫(yī)生進(jìn)行操作,需要使用的相關(guān)儀器包括:醫(yī)用鑷子、手術(shù)刀、紗布、組織脫水機(jī)(Therom)、切片機(jī)。需要使用的試劑:蘇木精染色液、水溶性伊紅、梯度酒精、二甲苯、石蠟溶液以及10 %福爾馬林溶液。在術(shù)后選取患者新鮮前哨淋巴結(jié),放入10 %福爾馬林溶液中臨時(shí)固定,后再將組織放入組織脫水機(jī)中固定、脫水、浸臘,制成組織蠟塊,切片經(jīng)HE 染色待用。觀察組則使用冷凍切片進(jìn)行病理診斷:選取個(gè)人綜合素質(zhì)較高的醫(yī)生進(jìn)行操作,術(shù)前對(duì)相關(guān)儀器進(jìn)行消毒,需要使用的相關(guān)儀器及試劑包括:OCT 包埋劑、1 %鹽酸乙醇分化液、蘇木精染色液、水溶性伊紅及梯度乙醇、恒溫冰凍切片機(jī)、玻璃立缸。在術(shù)后選取患者新鮮病變組織,大小一般為1.5 cm×1.5 cm×0.4 cm,將其放置于倒有少量OCT 包埋劑的金屬標(biāo)本托盤上,將其冷凍,冷凍時(shí)間分為2 min、5 min、10 min,并切為2 μm、4 μm、6 μm、8 μm 的切片樣本,采用100 mL 95 %乙醇溶液作為固定液,將切好的冰凍切片浸入玻璃立缸,常溫下固定時(shí)間為2 min。隨后將固定的切片進(jìn)行清洗,再加入蘇木精染液染色,染色后用1 %鹽酸乙醇分化液分化并用清水藍(lán)化25 s,再加入伊紅染液染色。完成后放入梯度乙醇內(nèi)脫水,再浸入二甲苯使切片透明,以中性樹膠封片。

        1.3 觀察指標(biāo)

        觀察以對(duì)照組為標(biāo)準(zhǔn),觀察不同冷凍時(shí)間、不同質(zhì)量的冷凍切片的診斷準(zhǔn)確率。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 18.0 處理患者資料,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,計(jì)數(shù)資料用率(%)表示,采用t和χ2檢驗(yàn),以P<0.05 為準(zhǔn),說明差異較大,具有臨床對(duì)比價(jià)值。

        2 結(jié)果

        2.1 不同冷凍時(shí)間下切片診斷正確率對(duì)比

        以石蠟切片診斷為標(biāo)準(zhǔn),觀察不同冷凍時(shí)間下冷凍切片的準(zhǔn)確性,結(jié)果表明:冷凍時(shí)間為2 min的切片診斷的準(zhǔn)確率最高,明顯優(yōu)于其他兩組,詳情見表1。

        表1 不同冷凍時(shí)間下切片診斷正確率的對(duì)比[n(%)]

        2.2 不同質(zhì)量下切片診斷正確率對(duì)比

        以石蠟切片診斷為標(biāo)準(zhǔn),觀察不同質(zhì)量下冷凍切片的準(zhǔn)確性,結(jié)果表明:切片厚度為4 μm 時(shí),診斷準(zhǔn)確率最高,明顯優(yōu)于其他兩組,詳情見表2。

        表2 不同質(zhì)量下切片診斷正確率對(duì)比[n(%)]

        3 討論

        冷凍切片在制作過程中對(duì)于切片的固定具有較為重要的作用[8]。因此,在選擇切片固定、染色時(shí),需要保持玻片和切片的溫差[9]。如發(fā)生切片脫落,應(yīng)當(dāng)仔細(xì)對(duì)情況進(jìn)行分析,一般情況下,切片脫落主要由以下原因所致:(1)載玻片存在異物;(2)固定液濃度不足;(3)組織壞死細(xì)胞過多[10]。對(duì)于上述問題,可采取以下處理方式:(1)加強(qiáng)載玻片的清潔工作,避免載玻片被污染;(2)定時(shí)更換固定液,如實(shí)驗(yàn)取樣較多時(shí),應(yīng)當(dāng)及時(shí)更換固定液;(3)在條件允許的情況下多取幾組樣品,或延長(zhǎng)切片固定的時(shí)間。

        通過此次研究發(fā)現(xiàn):不同的冷凍時(shí)間以及不同厚度的切片質(zhì)量均會(huì)對(duì)前哨淋巴組織冷凍切片的準(zhǔn)確率產(chǎn)生影響,因此,我們應(yīng)當(dāng)及時(shí)探索其規(guī)律,選取最為合理的切片質(zhì)量及冷凍時(shí)間,從而增加冷凍切片的診斷確診率。此外,還值得注意的是:除冷凍切片的質(zhì)量以及冷凍時(shí)間,脫片問題以及染色過程及其他問題也需要我們關(guān)注。冷凍切片在染色時(shí)需要注意蘇木精染液以及固定液的濃度。在染色工作完成后,應(yīng)對(duì)其進(jìn)行觀察,確保切片合格。

        綜上所述,經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn):在前哨淋巴結(jié)組織冷凍切片的制作過程中,應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格制作過程,并精準(zhǔn)控制冷凍切片的各細(xì)節(jié)步驟,并將冷凍時(shí)間控制在2 min、切片厚度控制在4 μm,以此來提高前哨淋巴組織冷凍切片的準(zhǔn)確率。

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