薛 麟 肖 翔

原發(fā)性肝癌(肝癌)是臨床常見的惡性腫瘤之一，在我國的發(fā)病率較高，居世界首位，每年約有30多萬人死于肝癌，占世界肝癌死亡率的55%[1-2]。由于肝癌患者早期臨床癥狀隱匿，侵襲性較強，且大多伴有不同程度的肝炎、肝硬化等，手術切除率不足20%[3]，且手術患者的組織損傷較大，術后恢復慢，預后較差，生存率低[4]。對于中晚期肝癌的患者，常采用非手術方法進行治療，包括肝動脈介入治療、系統(tǒng)治療、放療和中醫(yī)藥治療[5]。肝動脈介入治療是首選，可延長患者的生存時間，改善患者的生活質量，但同時該方法不能完全去除腫瘤病灶，殘留率高達90%，且對患者的免疫功能會造成影響[6]。放療特別是三維適形放射治療可顯著提高原發(fā)性肝癌的治療效果[6]。近年來，隨著細胞免疫學和分子生物學的不斷發(fā)展，肝癌的生物免疫治療逐步應用于臨床，自體細胞免疫治療成為目前常用的方法[7]。由于單一治療手段的局限性，聯(lián)合治療成為提高肝癌臨床效果的重要手段。因此，本文探討了自體CIK細胞肝動脈灌注聯(lián)合放化療對原發(fā)性肝癌患者免疫功能及生活質量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2018年1月我院診治的原發(fā)性肝癌患者98例進行回顧性分析，所有患者均符合原發(fā)性肝癌的診斷和分級標準。按照治療方法不同分為2組，對照組給予肝動脈介入化療和三維適形放療，觀察組在對照組的基礎上給予自體CIK細胞肝動脈灌注治療。對照組50例，男性33例，女性17例；年齡42～65歲，平均(51.32±5.41)歲；Child-Pugh分級：A級26例，B級24例；腫瘤數(shù)目：單發(fā)38例，多12例。觀察組48例，男性32例，女性16例；年齡41～65歲，平均(50.84±5.12)歲；Child-Pugh分級：A級25例，B級23例；腫瘤數(shù)目：單發(fā)37例，多11例。2組患者一般資料相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 入選標準

納入標準：①所有患者均經(jīng)病理學診斷確診；②Child-Pugh分級為A級和B級；③病灶無遠端轉移；④預計生存期6個月以上。排除標準：①合并其他器官功能障礙者；②嚴重凝血功能異常者；③對本研究所用藥物過敏者；④妊娠哺乳期婦女及精神異常者。

1.3 方法

對照組給予肝動脈介入化療和三維適形放療。肝動脈介入化療：經(jīng)股動脈右側穿刺，在超滑導絲引導下將導管置于腹腔干造影，明確血管走向及腫瘤供血動脈，將微導管超選至腫瘤供血動脈進行化療藥物灌注，順鉑60～100 mg，絲裂霉素10～30 mg，阿霉素40～60 mg。完成后用碘油10～20 ml栓塞，再用明膠海綿栓塞，4～6周重復介入化療1次。三維適形放療：采用螺旋CT掃描患者中腹部，將獲得的數(shù)據(jù)進行三維立體重建，明確腫瘤大體區(qū)域及體積，由醫(yī)生和物理師勾畫患者腫瘤靶區(qū)及危及器官，依據(jù)腫瘤靶區(qū)及危及器官確定入射方向，根據(jù)劑量曲線和體積直方圖對權重和射入方向進行調整，采用西門子直線加速器進行放療，使腫瘤邊緣總劑量達(46～60)Gy/(23～30)F/(4.5～6)W，全肝平均劑量小于30 Gy。在第2次化療結束后1周開始放療，放療結束1個月后酌情進行后續(xù)化療。

觀察組：在對照組的基礎上給予自體CIK細胞肝動脈灌注治療。肝動脈介入化療前采集患者的自體外周血，分離并培養(yǎng)CIK細胞，細菌和真菌培養(yǎng)陰性，細胞數(shù)量合格后進行生理鹽水洗滌，用100 ml生理鹽水重懸細胞制備成回輸液(含20%人血蛋白5 ml，IL-2 20萬U)。經(jīng)股動脈左側穿刺，在超滑導絲引導下將導管置于肝固有動脈，造影證實后將CIK細胞行肝固有動脈灌注，時間30 min，完成后留置導管，肝素水封管，1次/天，連續(xù)灌注3 d，3 d灌注完成后拔除導管，穿刺點按壓后進行加壓包扎。每月培養(yǎng)1次，連續(xù)灌注3個月，治療結束后2～3周檢測外周血T細胞亞群。

1.4 觀察指標

①比較2組患者的臨床有效性。按照實體瘤評價標準[8]對患者的治療效果進行評價，完全緩解：基線病灶消失且維持4周；部分緩解：基線病灶長徑總和縮小≥30%并維持4周；穩(wěn)定：基線病灶長徑總和縮小，但未達到緩解水平，或增加但未達到進展水平；進展：基線病灶長徑總和增加≥20%或有新病灶出現(xiàn)。有效率=完全緩解率+部分緩解率。②比較2組患者免疫功能相關指標的變化情況，分別于治療前和治療結束后2～3周抽取患者空腹靜脈血5 ml，采用EPICSXI流式細胞儀檢測外周血T淋巴細胞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)的變化情況。③比較2組患者的生活質量，分別于治療前后采用KPS評分法對患者的生活質量進行評價，改善：KPS評分提高>10分；穩(wěn)定：KPS評分提高或下降≤10分；惡化：KPS評分下降>10分。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 2組患者治療效果比較

觀察組的有效率為91.67%(44/48)，顯著高于對照組74.00%(37/50)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=5.331，P=0.021)，見表1。

表1 2組患者治療效果比較(例，%)

2.2 2組患者治療前后外周血T淋巴細胞群變化情況

2組患者治療前CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，治療后2組CD3+、CD4+、和CD4+/CD8+顯著升高，CD8+顯著降低，且觀察組變化更明顯(P<0.05)，見表2。

表2 2組患者治療前后外周血T淋巴細胞群變化情況

注：a為與本組治療前相比，P<0.05，b為與治療后對照組相比，P<0.05。

2.3 2組患者生活質量比較

觀察組患者生活質量改善率顯著高于對照組(P>0.05)，見表3。

表3 2組患者生活質量比較(例，%)

3 討論

目前肝癌的發(fā)病率逐年增加，且死亡率較高，嚴重影響患者的健康和生活質量[9]。隨著醫(yī)學影像及診斷技術的不斷發(fā)展及高危人群肝癌早期篩查的普及，肝癌的檢出率逐年上升[10]。手術和肝移植是根治肝癌的重要手段，也是目前臨床治療的首選[11]。但手術預后差，生存率低，肝移植遠期效果不理想，且由于合并肝炎、肝硬化等原因，肝癌患者的手術率較低，大部分患者需采用非手術方式進行治療[12]。肝動脈介入治療聯(lián)合放療成為目前非手術治療肝癌的首選，兩者聯(lián)合可增強治療效果，提高腫瘤的壞死率，但仍然存在一定的問題，如放化療后患者的免疫功能低下、不利于患者的康復等[13]。

自體免疫細胞治療以多種細胞因子誘導體外血單個核細胞，分離細胞誘導的殺傷細胞(CIK)，應用于肝癌患者的治療[14]。CIK是T細胞為主要效應細胞的特質性細胞群，具有抗腫瘤特性，可以非特異性免疫的方式根除患者體內(nèi)的小微腫瘤或殘留病灶，重建患者的免疫功能[15]。對于自體免疫細胞的輸注方式對治療效果的影響，有研究顯示[16]，肝動脈灌注自體DC-CIK細胞對原發(fā)性肝癌的治療效果優(yōu)于靜脈回輸自體DC-CIK細胞。因此，本研究采用肝動脈灌注的方式進行自體免疫細胞灌注治療。本研究結果顯示，觀察組患者的臨床有效率顯著高于對照組，且CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平均顯著優(yōu)于對照組，說明自體CIK細胞肝動脈灌注聯(lián)合放化療可顯著提高原發(fā)性肝癌患者的臨床治療效果，改善患者的免疫功能。這是由于CIK細胞兼具T淋巴細胞強大的抗腫瘤活性和自然殺傷細胞的殺瘤活性，且在體內(nèi)外增值能力較強，是一種具有高效殺瘤抑瘤活性的效應細胞[17]。自體免疫細胞進入人體后，效應細胞能否直接到達腫瘤部位發(fā)揮作用是該治療方法的關鍵。本文采用肝動脈灌注治療避免了肝首過效應，可直接到達腫瘤部位并在肝臟聚集，提高局部濃度，從而提高腫瘤的殺滅作用，而分3次輸注更有利于CIK細胞流向腫瘤區(qū)域，促進其增殖活化，形成免疫連續(xù)刺激，從而增強療效[18]。

生活質量是評價癌癥患者治療效果的重要指標之一，本研究結果顯示，觀察組患者的生活質量改善率顯著高于對照組，說明自體CIK細胞肝動脈灌注聯(lián)合放化療可顯著改善患者的生活質量，可能與其可有效抑制并殺滅腫瘤，提高患者的免疫功能有關。

綜上所述，自體CIK細胞肝動脈灌注聯(lián)合放化療可顯著提高原發(fā)性肝癌的臨床治療效果，提高患者的免疫功能和生活質量，值得臨床借鑒。