劉 娜，魏 霞，蘇昕宇，祝清芬*，鄧淑芬，周清濤，朱義松

（1.山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院 藥理毒理室，山東 濟(jì)南 250101；2.保齡寶生物股份有限公司，山東 禹城251200）

隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏加快、飲食習(xí)慣的改變，便秘、肥胖患者越來越多。兩者對人體內(nèi)環(huán)境、內(nèi)分泌系統(tǒng)均有一定的影響，日久也可能誘發(fā)或加重相關(guān)疾病，影響患者的生活質(zhì)量[1-2]。目前，針對便秘、肥胖，傳統(tǒng)的藥物治療不斷出現(xiàn)明顯的副作用，如高血壓、嚴(yán)重的情緒障礙、明顯的心肌病理改變和死亡率的增加。近年，膳食纖維作為補(bǔ)充劑成為便秘或肥胖患者的有效選擇之一[3]。抗性糊精是具代表性的低黏性水溶性膳食纖維，由于含抗人體消化酶（如淀粉酶等）作用的難消化成分，在消化道中不會(huì)被消化吸收，可直接進(jìn)入大腸，可作為膳食纖維發(fā)揮各種生理作用，如降低血糖、降低膽固醇和改善腸道等[4-5]。英國、日本等均將抗性糊精列為安全物質(zhì)，且無攝取量限制。我國衛(wèi)生部亦公布抗性糊精作為普通食品無限量添加于各種食品中。目前國內(nèi)關(guān)于抗性糊精單獨(dú)配方的藥效數(shù)據(jù)相對缺乏。本文根據(jù)國食藥監(jiān)保化[2012]107號和《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003年版檢驗(yàn)方法[6-7]，采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對抗性糊精的減肥和通便功效進(jìn)行了研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器

PB602-E電子天平（瑞士Mettler公司）；BSA4202S電子天平（德國Sartorius公司）。

1.2 試劑與試藥

抗性糊精（保齡寶生物，批號：20170317）；活性碳粉，阿拉伯樹膠粉（天津科密歐，批號：20110410）；復(fù)方地芬諾酯片（山東仁和堂藥業(yè)，批號161101，規(guī)格：每片含鹽酸地芬諾酯2.5 mg，硫酸阿托品0.025 mg）。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料

SPF級SD大鼠，雄性，體重180～220 g；SPF級ICR小鼠，雄性，體重18～22 g，均購自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司，許可證號：SCXK（魯）2014 0007，質(zhì)量合格證：No.37009200007639。飼養(yǎng)環(huán)境：屏障級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，許可證號：SYXK（魯）20130012。溫度：20～26 ℃，濕度：40 %～70 %。

大小鼠生長繁殖飼料及高熱量模型飼料，均購自北京科澳協(xié)力飼料有限公司，飼料生產(chǎn)許可證號：京飼證（2014）06054，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號（飼料）：SCXK（京）2014-0012。

2 方法

2.1 抗性糊精減肥功能檢測

本品食用方法及食用量[8-9]：每日3次，每次10 g，成人按60 kg體重計(jì)，相當(dāng)于0.5 g/kg BW。根據(jù)國食藥監(jiān)保化[2012]107號減肥功能檢驗(yàn)方法，大鼠的低、中、高劑量分別為2.5，5，7.5 g/kg BW（相當(dāng)于人體推薦量的5，10，15倍）。用純化水分別配成0.25，0.5，0.75 g/ml的溶液，灌胃體積均為10 ml/kg BW。采用大鼠肥胖模型進(jìn)行試驗(yàn)。SPF級SD大鼠，70只，雄性，體重180～220 g。適應(yīng)期結(jié)束后按體重隨機(jī)分成2組，10只給予維持飼料作為空白對照組，60只給予高熱量飼料作為模型組。2周后，模型組大鼠按體重增重排序，淘汰體重增重較低的1/3大鼠。將篩選出的40只大鼠按體重隨機(jī)分為4組，分別為模型組和3個(gè)劑量組，繼續(xù)給予高熱量模型飼料。各劑量組灌胃給予不同劑量的抗性糊精，模型組和空白組給予等量的純化水，連續(xù)給予6周。每周記錄攝食量，稱量體重1次。試驗(yàn)結(jié)束后，稱體重，1 %戊巴比妥鈉（5 ml/kg BW）麻醉，解剖取腎及睪丸周圍的脂肪，并稱重，計(jì)算脂/體比。

2.2 抗性糊精通便功能檢測

2.2.1 小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn) SPF級ICR小鼠，50只，雄性，體重18～22 g，隨機(jī)分為抗性糊精5，10，15 g/kg劑量組、模型對照組及空白對照組，共5組，每組10只，各組小鼠灌胃給予相應(yīng)濃度的藥物20 ml/kg，模型組和空白組給予等容積的純化水。7 d后，各組小鼠禁食不禁水16 h，然后模型組和3個(gè)劑量組灌胃給予復(fù)方地芬諾酯（5 mg/kg BW），空白組給予純化水，0.5 h后，各劑量組分別給予含相應(yīng)樣品的墨汁，空白和模型組灌胃給予墨汁。25 min后立即脫臼處死動(dòng)物，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度為“小腸總長度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長度”，計(jì)算墨汁推進(jìn)率。

2.2.2 排便時(shí)間、糞便粒數(shù)和糞便重量測定 SPF級ICR小鼠，50只，雄性，體重18～22 g，隨機(jī)分為抗性糊精5，10，15 g/kg各劑量組及模型對照組，各組小鼠灌胃給予相應(yīng)濃度的藥物20 ml/kg，模型組和空白組給予等容積的純化水。7 d后，各組小鼠禁食不禁水16 h后，空白組給純化水，模型組和高、中、低劑量組給予復(fù)方地芬諾酯10 mg/kg BW，0.5 h后，空白和模型組小鼠用墨汁灌胃，各劑量組給予含相應(yīng)樣品的墨汁，動(dòng)物均單籠飼養(yǎng)，正常飲水進(jìn)食。從灌墨汁開始，記錄每只動(dòng)物首粒排黑便時(shí)間、6 h內(nèi)排黑便粒數(shù)及重量。

2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

各個(gè)指標(biāo)均采用SPSS19.0單因素ANOVA進(jìn)行分析計(jì)算，以±s表示。墨汁推進(jìn)率需進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換，式中P為墨汁推進(jìn)率，用小數(shù)表示。

3 結(jié)果與分析

3.1 抗性糊精對大鼠體重、體重增重的影響

結(jié)果見表1。由表1可見，與空白組相比，從給藥第5周開始，模型組大鼠體重及體重增重顯著增高（P＜0.05，P＜0.01），說明高熱量飼料具有增重作用，肥胖模型成立?？剐院?、高劑量組大鼠第6周體重、體重總增重均顯著低于模型組（P＜0.05，P＜0.01），提示抗性糊精可一定程度上抑制大鼠體重增長。

表1 抗性糊精對大鼠體重及增重的影響（n=10）

3.2 抗性糊精對大鼠體內(nèi)脂肪重量、脂肪體重比的影響

結(jié)果見表2。由表2可見，與空白組相比，模型組腎周脂肪重、睪丸周脂肪重、總脂肪重及總脂/體比均顯著增高（P＜0.01），顯示喂飼高熱量飼料后大鼠肥胖模型成立。與模型組相比，高劑量組腎周脂肪重量顯著降低（P＜0.05）；中、高劑量組睪丸周脂肪重量、總脂肪重量均顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）；高劑量組總脂/體比顯著降低（P＜0.05），提示抗性糊精對大鼠脂肪組織的生成具有一定的抑制作用。

表2 抗性糊精對大鼠體內(nèi)脂肪重量、脂肪體重比的影響（n=10）

3.3 抗性糊精對大鼠攝食量、總攝食量、攝入總熱量及食物利用率的影響

與空白組相比，從給藥第1周開始，模型組每周攝食量、總攝食量均顯著降低（P＜0.05，P＜0.01），攝入總熱量及食物利用率均顯著高于模型組（P＜0.01），顯示喂飼高熱量模型飼料后大鼠肥胖模型成立。與模型組比較，高劑量組第1，4，5，6周攝食量、總攝食量及攝入總熱量顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）；中劑量組僅第4周、低劑量組僅第5周攝食量顯著降低（P＜0.01，P＜0.05）；中劑量組的食物利用率顯著降低（P＜0.01）。高劑量的抗性糊精使大鼠攝食量減少，因其具膳食纖維特有的增容、持水作用，在胃腸內(nèi)吸水后，使胃腸擴(kuò)張，產(chǎn)生飽腹感引起。見表3。

表3 抗性糊精對大鼠攝食量、攝入總熱量及食物利用率的影響（n=10）

3.4 抗性糊精對小鼠通便功能試驗(yàn)結(jié)果

3.4.1 抗性糊精對小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響 與空白組相比，模型組墨汁推進(jìn)率顯著降低（P＜0.01），顯示給予復(fù)方地芬諾酯后小鼠便秘模型成立。與模型組相比，抗性糊精低、中、高劑量組小鼠墨汁推進(jìn)率均顯著增加（P＜0.05，P＜0.01）。見表4。

表4 抗性糊精對墨汁推進(jìn)率的影響（n=15）

3.4.2 抗性糊精對小鼠排便時(shí)間、糞便粒數(shù)和糞便重量的影響 與空白組相比，模型組首粒排黑便時(shí)間明顯延長（P＜0.01），6 h內(nèi)排黑便粒數(shù)及重量均顯著減少（P＜0.01），顯示給予復(fù)方地芬諾酯后小鼠便秘模型成立。與模型組相比，抗性糊精高劑量組首粒排黑便時(shí)間顯著縮短（P＜0.05）；中、高劑量組6 h內(nèi)排黑便粒數(shù)顯著增加（P＜0.05）；中劑量組6 h內(nèi)排黑便重量顯著增加（P＜0.05）。見表5。

表5 通便功能試驗(yàn)小鼠排便時(shí)間、糞便粒數(shù)和糞便重量結(jié)果（n=10）

4 結(jié)論

抗性糊精作為低分子水溶性膳食纖維的一種，作為難消化性成分，在消化道中不會(huì)被消化吸收，可直接進(jìn)入大腸[4]，其吸水性強(qiáng)，膨脹后能增加糞便體積，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)?？剐院龠M(jìn)腸道蠕動(dòng)的同時(shí)可縮短腸道內(nèi)容物通過的時(shí)間，從而縮短首次排黑便的時(shí)間；結(jié)合其吸水膨脹，可增加排便粒數(shù)和重量，對于便秘、痔瘡等疾病有良好的預(yù)防效果[10-11]。甘聃等[12-13]對抗性糊精與黨參、鮮棗汁等進(jìn)行配方，研究其通便作用，結(jié)果均顯示抗性糊精具有良好的通便功能。

本文根據(jù)國食藥監(jiān)?；痆2012]107號[6]和《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003年版檢驗(yàn)方法[7]，利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對抗性糊精的減肥和通便功效進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示在不顯著影響攝食量的劑量下（5.0 g/kg BW），抗性糊精對大鼠的體質(zhì)量增長和脂肪組織的生成有一定的抑制作用，具有一定的減肥功效；抗性糊精亦可促進(jìn)腸蠕動(dòng)，縮短便秘小鼠的排便時(shí)間，增加排便次數(shù)及便重，具有一定的輔助通便作用。本研究為抗性糊精在食品行業(yè)中的開發(fā)與應(yīng)用提供了一定的理論依據(jù)。