于宏 孫學(xué)亮 陳書奇

摘?要：為了解速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚生長及抗氧化能力的影響，以皇冠魚（Aequidens rivulatus）為試驗(yàn)對象，在其基礎(chǔ)飼料中添加0.5%的速大肥和高穩(wěn)胺，進(jìn)行對照試驗(yàn)，投喂30 d后測定其生長情況及肝臟過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量。結(jié)果表明，0.5%速大肥添加量對皇冠魚的生長起促進(jìn)作用，降低了飼料系數(shù)，增強(qiáng)了機(jī)體抗氧化能力。高穩(wěn)胺對皇冠魚的抗氧化能力有顯著作用。投喂高穩(wěn)胺飼料后機(jī)體SOD活性與MDA含量均有所提高，其對皇冠魚的生長起增益效果。因此，速大肥和高穩(wěn)胺可用作皇冠魚飼料添加劑大幅提高皇冠魚產(chǎn)量。

關(guān)鍵詞：速大肥;高穩(wěn)胺;皇冠魚（Aequidens rivulatus）;抗氧化

皇冠魚（Aequidens rivulatus），英文名Green Terror，隸屬硬骨魚綱，輻鰭亞綱，鱸形總目，鱸亞目，慈鯛科。主要分布在南美洲、非洲、東南亞等地區(qū)的熱帶淡水水域中[1]。自1999年從南美輸入到我國香港，不久便傳至廣州、北京、天津等地，該魚體態(tài)壯碩威武，性成熟后，尤其是雄魚，色彩較為艷麗，加之容易飼養(yǎng)且容易繁殖，所以有不少水族愛好者非常喜歡飼養(yǎng)[2]。成年雄魚攻擊性強(qiáng)，背鰭、臀鰭末端尖長，頭部高聳外突，特別像戴著皇冠，給人一種長壽富貴的感覺，是一種極具觀賞價值的中高檔熱帶淡水觀賞魚[3]。

速大肥是一種抗生素類促生長飼料添加劑，其有效成份是維吉尼亞霉素（virginiamycin），又稱為純霉素或高桿霉素，是動物專用的飼料添加劑。速大肥用于豬、雞和鴨的研究較多，使用效果十分顯著[4-6]。但用在水產(chǎn)動物中的研究還比較薄弱。由于速大肥具有優(yōu)良的特性，在國內(nèi)外已被逐漸嘗試添加于水產(chǎn)飼料中[7]。高穩(wěn)胺，其主要成分為半胱胺鹽酸鹽。半胱胺鹽酸鹽具有顯著提高瘦肉率和消化液的分泌，顯著提高生長速度，降低飼料系數(shù)等特性，其穩(wěn)定性好，吸收性好，顆粒均勻，無靜電，流動性好，與其他營養(yǎng)素直接混合不發(fā)生拮抗，不易吸濕，易于保存。近年來，高穩(wěn)胺在畜牧業(yè)的發(fā)展得到了大幅提升，特別是其主要成分半胱胺及其鹽酸鹽在畜牧業(yè)中已有相對廣泛的研究與應(yīng)用[8-9]。目前為止，速大肥和高穩(wěn)胺這類藥物在魚類尤其是皇冠魚方面的試驗(yàn)及應(yīng)用極為少見。本研究探討速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚生長及抗氧化能力的影響，旨在為以后水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥提供理論基礎(chǔ)。

1?材料與方法

1.1?試驗(yàn)用魚

本試驗(yàn)用魚為天津市金海馬水產(chǎn)養(yǎng)殖有限責(zé)任公司所購買的皇冠魚，隨機(jī)選取魚體強(qiáng)壯，活力好，攝食正常，表面無損傷，無寄生蟲以及其它病害的個體運(yùn)送到天津市西青區(qū)青泊洼凱潤農(nóng)業(yè)園漁場進(jìn)行試驗(yàn)。魚體重21.35 g±5.00 g，體長7.16 cm±1.0 cm。

1.2?試驗(yàn)飼料

皇冠魚基礎(chǔ)飼料購自天津市大洋飼料有限公司，蛋白含量32%。常溫碾磨成粉末后，分別添加0.5%的速大肥和高穩(wěn)胺，再重新制作成4 mm粒徑的顆粒飼料，置干燥通風(fēng)處晾干后裝袋，并存放于陰涼干燥處備用。

1.3?試驗(yàn)試劑與儀器

速大肥和高穩(wěn)胺（杭州高成生物營養(yǎng)有限公司）、考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒、過氧化氫酶（CAT）測定試劑盒、丙二醛（MDA）測定試劑盒和超氧化物歧化酶（SOD）測定試劑盒（試劑盒均購自南京建成科技有限公司）、無水乙醇、冰乙酸、雙蒸水、生理鹽水（0.9%）（天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠）等。

試管、燒杯，移液管（天津市北方玻璃儀器制造廠）、移液槍（eppendorf）、離心機(jī)（eppendorf Centrifuge5810R，3 500 r/min）、島津紫外可見光分光光度計(jì)（UVmini-1240）、電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司，BSA224S-CW）、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠，GZX-9240MBE）、水浴鍋（江蘇沙沙醫(yī)療器械廠，WSZ-133-75）、飼料粉碎機(jī)（9FQ36-25，棗莊市山亭區(qū)海成機(jī)械廠）和聯(lián)軸器飼料顆粒機(jī)（KSP350，棗莊市山亭區(qū)海成機(jī)械廠）等。

1.4?試驗(yàn)方法

1.4.1?試驗(yàn)魚分組與養(yǎng)殖?皇冠魚經(jīng)過暫養(yǎng)后，選出健康的540尾進(jìn)行隨機(jī)分組，本試驗(yàn)共3個處理組（一個對照組、兩個試驗(yàn)組），每組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)60尾魚?；使隰~馴養(yǎng)一周后用于試驗(yàn)，試驗(yàn)期間，按體重3%左右確定投喂量（以飼料吃完為準(zhǔn)），每天投喂3次（時間分別為：09：00、13：00、17：00）。試驗(yàn)池24 h曝氣，每3 d換水30%左右，在試驗(yàn)開始前一天及試驗(yàn)數(shù)據(jù)采集當(dāng)天停食。水質(zhì)環(huán)境為：水溫26 ℃±1 ℃，pH值 8.0～8.2，溶解氧6.5 mg/L±0.5 mg/L，氨氮1.2～1.3 mg/L，水質(zhì)符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。

1.4.2?組織樣品的提取?飼養(yǎng)30 d后分別將魚撈出，先測定體長和體重，之后解剖魚體，取出肝臟，置于-80 ℃冰箱中冷凍保存?zhèn)溆?。組織測定指標(biāo)前，先將肝臟用電動勻漿機(jī)（DY89-Ⅱ）研磨（1 000 r/min），將勻漿液倒入離心管中，于4 ℃離心30 min后吸取上清液進(jìn)行各指標(biāo)的測定。在正式試驗(yàn)前，先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，確定組織勻漿的最佳取樣濃度及最佳取樣量。

1.4.3?皇冠魚生長指標(biāo)的計(jì)算?試驗(yàn)開始前后分別測量初始和結(jié)束的體重及體長等指標(biāo)，根據(jù)測定的體重、體長和食用的飼料量計(jì)算其生長指標(biāo)，計(jì)算公式如下：

1.4.4?皇冠魚抗氧化指標(biāo)的測定?根據(jù)預(yù)試驗(yàn)得到組織勻漿的最佳取樣濃度及最佳取樣量。按照試劑盒說明書用分光光度計(jì)分別進(jìn)行考馬斯亮藍(lán)蛋白、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和丙二醛（MDA）的測定，計(jì)算方法及公式如下：

1.5?數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果利用SPSS 13.0 進(jìn)行分析處理。經(jīng)方差分析后，通過T檢驗(yàn)分析試驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性（P<0.05）。

2?結(jié)果與分析

2.1?不同藥物對皇冠魚生長指標(biāo)的影響

皇冠魚養(yǎng)殖30 d后，各試驗(yàn)組皇冠魚的增重率、增長率、存活率和飼料系數(shù)的情況見表1-表4。

試驗(yàn)組增重率較對照組顯著升高（P<0.05），添加0.5%高穩(wěn)胺組增重率更顯著（P<0.05），見表1。

對照組體長生長不顯著，試驗(yàn)組體長增長顯著（P<0.05），添加0.5%高穩(wěn)胺組比對照組體長增長更顯著（P<0.05），見表2。

添加0.5%速大肥和高穩(wěn)胺的平均存活率分別為92.5%和94%，對照組的平均存活率為85.33%，試驗(yàn)組平均存活率顯著高于對照組（P<0.05），見表3。

所有試驗(yàn)組飼料系數(shù)較對照組顯著降低（P<0.05），見表4。

2.2?不同藥物對皇冠魚抗氧化性指標(biāo)的影響

如表5所示，所有試驗(yàn)組CAT較對照組顯著（P<0.05）;試驗(yàn)組SOD較對照組顯著（P<0.05）;試驗(yàn)組MDA較對照組顯著（P<0.05）。

3?討論

3.1?速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚生長指標(biāo)的影響

維吉尼亞霉素（速大肥）和高穩(wěn)胺作為添加劑在觀賞魚養(yǎng)殖上應(yīng)用很少，但在其它水產(chǎn)動物中已經(jīng)有相關(guān)報(bào)道。AHMAD T.S 等[10]研究了維吉尼亞霉素對尼羅羅非魚的健康狀況及表現(xiàn)的影響，研究表明，試驗(yàn)魚投喂8周不同速大肥劑量的基礎(chǔ)日糧，能促進(jìn)尼羅羅非魚的生長。葉元土[11]研究維吉尼亞霉素對鯉魚、斑點(diǎn)叉尾鮰的生長促進(jìn)作用等，向高蛋白和低蛋白中各添加維吉尼亞霉素，進(jìn)行了為期10周的試驗(yàn)，結(jié)果表明，高蛋白組明顯比低蛋白組在增長率和餌料利用率上有明顯改善。韓如正等[12]關(guān)于鯉魚種飼料中添加維吉尼亞霉素的研究表明，將含量為50%的維吉尼亞霉素以50 mg/kg添加在鯉魚種飼料中，可提高鯉魚生長效率，并降低飼料系數(shù)，提高畝產(chǎn)量和畝效益，表明在鯉魚種飼料中添加維吉尼亞霉素是可行的。同時，林黑著等[4]對凡納濱對蝦飼料中的速大肥應(yīng)用進(jìn)行研究，結(jié)果表明，投喂速大肥添加劑的對蝦生長性能明顯優(yōu)于對照組。張紅梅等[13]研究了半胱胺鹽酸鹽對哺乳類的抗氧化指標(biāo)的影響，結(jié)果表明，半胱胺鹽酸鹽能夠有效快速增加動物體重，胴體品質(zhì)也會被大大提高。這些研究結(jié)果與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。在本試驗(yàn)中，對照組體重正常增長，試驗(yàn)組魚體重、體長比對照組增長顯著，能增加皇冠魚的存活率，這與譚青松等[14]研究的結(jié)果相符。綜上所述，速大肥和高穩(wěn)胺可以用做皇冠魚的飼料添加劑，對皇冠魚的生長有明顯促進(jìn)作用。

3.2?速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚抗氧化指標(biāo)的影響

3.2.1?速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚機(jī)體過氧化氫酶活力的影響?過氧化氫酶（CAT）是一種普遍存在于動物、植物和好氧微生物中的氧還原酶，其主要功能是催化H2O2分解為H2O和O2，使得H2O2不至于與O2-在鐵螯合物作用下反應(yīng)生成有害的-OH，便可削減自由基和過氧化脂質(zhì)的形成，能對機(jī)體起重要的保護(hù)作用。因此，過氧化氫酶也成為水產(chǎn)動物的重要抗氧化防御性功能因子，成為機(jī)體內(nèi)活性氧自由基的天然清除劑[15]。速大肥和高穩(wěn)胺作為飼料添加劑主要應(yīng)用于畜牧動物，對于作為水產(chǎn)動物的飼料添加劑的相關(guān)報(bào)道較少。高婷婷[16]對半胱胺添加對生長豬（Susscrofa domesticus）的抗氧化的影響研究表明，其對CAT有顯著提高的趨勢，顯著降低了MDA的含量。這與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致，本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加0.5%速大肥組和添加0.5%高穩(wěn)胺組的CAT值均比對照組有顯著提高，表明兩者都可以提高機(jī)體的免疫力。

3.2.2?速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚機(jī)體超氧化物歧化酶活力的影響?超氧化物歧化酶（SOD）活力的定義是每毫升反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)到50%的時候所對應(yīng)的SOD量為1個SOD活力單位（U）。超氧化物歧化酶SOD可以將有害超氧陰離子自由基歧化為H2O2，存在于機(jī)體內(nèi)的過氧化物酶體的CAT催化H2O2等生成水和氧氣，防止自由基對細(xì)胞的毒害[17]。因此，SOD和CAT的活性變化在一定程度上可反映出機(jī)體的免疫力[18]。速大肥作為一種抗生素，被廣泛用作家禽、豬、牛等的飼料添加劑，有研究表明抗生素做為水產(chǎn)動物飼料添加劑可以提高其抗氧化能力。盧彤巖[19]等研究表明，連續(xù)投喂施氏鱘（Acipenser scherensckii）達(dá)氟沙星，其機(jī)體SOD值明顯增大，顯著提高了施氏鱘機(jī)體的免疫力。張彩鳳等[20]研究表明，乳酸菌和酵母菌復(fù)合制劑及其與維吉尼亞霉素聯(lián)合使用對肉仔雞（Gallus）血清總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性顯著升高，血清丙二醛（MDA）含量顯著降低。本試驗(yàn)添加0.5%速大肥組和添加0.5%高穩(wěn)胺組的SOD值均明顯大于對照組，表明可以提高皇冠魚機(jī)體的免疫力。

3.2.3?速大肥和高穩(wěn)胺對皇冠魚機(jī)體丙二醛含量的影響?丙二醛（MDA）是自由基脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物，是廣泛應(yīng)用于檢測機(jī)體組織中自由基水平的指標(biāo)。機(jī)體經(jīng)過酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生自由基，后者引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，從而能夠引起細(xì)胞的損傷，所以測試MDA的量常?？梢苑从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度，間接地反映細(xì)胞損傷的程度。Gu等[21]的研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠（Mus musculus）的日糧中添加半胱胺，小鼠十二指腸中T-AOC顯著升高，MDA含量顯著下降。王海梅[22]的研究結(jié)果表明，在肉仔雞的日糧中添加半胱胺，發(fā)現(xiàn)肉仔雞血漿中的MDA含量顯著減少，驗(yàn)證了半胱胺的抗氧化作用。本試驗(yàn)中添加0.5%速大肥組的MDA含量明顯低于對照組，表明速大肥和高穩(wěn)胺可以減少皇冠魚的細(xì)胞損傷。

4?結(jié)論

速大肥和高穩(wěn)胺作為一種促生長類飼料添加劑已被普遍應(yīng)用于家禽養(yǎng)殖中，它的抗菌作用、增強(qiáng)免疫力功能以及促生長機(jī)制等已經(jīng)被養(yǎng)殖業(yè)廣泛認(rèn)可。本試驗(yàn)研究表明：速大肥和高穩(wěn)胺作為皇冠魚的飼料添加劑，可以提高皇冠魚的增重率，顯著提高皇冠魚機(jī)體的過氧化氫酶和超氧化物歧化酶的活性，并降低丙二醛的含量，提高皇冠魚相關(guān)生產(chǎn)性能，降低飼料系數(shù)，并增強(qiáng)機(jī)體免疫力。

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