張錫峰，黃媛，邢鼐，劉海濱，盛尚春

(成都大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科 四川 成都 610081)

我國60歲以上的人口達到1.6億，已經(jīng)逐漸進入人口老齡化的社會[1]。由于老年人免疫功能下降，各器官逐漸老化，導(dǎo)致老年人細菌感染逐漸增加。當(dāng)老年人感染細菌時，需要快速診斷細菌所導(dǎo)致的疾病，如敗血癥，菌血癥等，有助于老年患者早日康復(fù)。革蘭陰性桿菌感染是細菌感染的主要致病菌，能引起各系統(tǒng)感染[2-3]。脂多糖是革蘭陰性桿菌細胞壁上的特有結(jié)構(gòu)，與感染有密切關(guān)系[4-5]。對老年患者進行革蘭陰性桿菌脂多糖檢測，可能會有助于診斷感染。本文旨在研究脂多糖在老年患者革蘭陰性桿菌感染中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017年6月至2018年5月住院的老年患者238例，男118例，女120例。入組標(biāo)準(zhǔn)：年齡大于60歲，24h內(nèi)未使用抗生素，知情同意者。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在外傷、燒傷等外科疾病者。

1.2 材料 MB-80微生物快速動態(tài)檢測系統(tǒng)，T01智能恒溫儀，動態(tài)內(nèi)毒素檢測試劑盒,(批號EKT110，EKT150，EKT200)，無熱源采血管，吸頭，標(biāo)準(zhǔn)平底試管，均由北京金山川科技發(fā)展公司提供，全自動微生物分析儀(包括配套試劑與板條)和藥敏紙片購于德國西門子公司；M-H瓊脂購于美國BD公司；血瓊脂和巧克力平板購于成都瑞琪科技實業(yè)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 革蘭陰性桿菌培養(yǎng) 采集患者血液、痰液等標(biāo)本進行培養(yǎng)及藥敏試驗，依據(jù)培養(yǎng)的結(jié)果分為陽性觀察組和陰性對照組。兩組在年齡、性別等比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 陽性觀察組和陰性對照組年齡和性別比較

1.3.2 血漿制備 用一次性無菌無熱源真空采血管采取靜脈血4ml，進行3000r/min離心10min。取血清0.1ml，加入含有0.9ml樣本處理液中，混勻70℃孵育10min，取出立刻放入冷卻槽中5min，即為待測血清樣品。

1.3.3 測定分析 取待測血請0.2ml直接加入酶反應(yīng)主劑中，溶解混勻后使用微量加樣器全部移至9×65mm標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)無熱源平底試管中(不能產(chǎn)生氣泡)。立即插入MB-80微生物快速動態(tài)檢測系統(tǒng)中進行反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束由標(biāo)準(zhǔn)曲線自動計算出待測血漿中脂多糖的含量，整個操作過程，注意避免微生物及細菌污染，若反應(yīng)曲線掉下，立即重做。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陽性觀察組與陰性對照組脂多糖水平比較陽性觀察組老年患者的脂多糖含量明顯高于陰性對照組老年患者，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。 見表 2。

表2 陽性觀察組與陰性對照組脂多糖水平比較

2.2 陽性觀察組細菌分布 其中銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌占比最高，見表3。

表3 陽性觀察組細菌分布

2.3 細菌的病區(qū)分布 呼吸內(nèi)科和ICU檢出革蘭陰性菌最高，見表4。

表4 628株細菌的病區(qū)分布構(gòu)成比

3 討論

隨著老齡化程度不斷攀升，老年人體質(zhì)差，抗病能力較差，因此老年人成了細菌感染的易感人群，使得老年人生活質(zhì)量下降。近年來，老年革蘭陰性桿菌感染有逐年增加的趨勢，早期抗菌藥物的選擇方向非常關(guān)鍵[6-7]，由于細菌培養(yǎng)鑒定及藥敏實驗一般要36～48小時后出結(jié)果。一定程度上延遲了治療，有可能延誤病情。

脂多糖是細菌致病診斷的一個重要方面，通過誘導(dǎo)宿主一系列的病理改變，脂多糖是革蘭陰性桿菌細胞壁的成分，細菌死后溶解釋放出來。因此，革蘭陰性桿菌的數(shù)量和脂多糖成正比[8-9]。因此，對老年患者進行血清脂多糖測定，對早期診斷、評價感染源、細菌感染的鑒別以及控制細菌感染都有重要意義。

本次研究結(jié)果顯示，革蘭陰性桿菌感染的老年患者血清脂多糖的水平明顯高于非革蘭陰性桿菌感染老年患者，因此，脂多糖對判斷革蘭陰性桿菌感染有重要作用。早期的脂多糖的明顯升高和感染有關(guān)[10-11]?？勺鳛樵缙诟腥镜念A(yù)測指標(biāo)，臨床醫(yī)生可以根據(jù)脂多糖水平對老年革蘭陰性菌感染患者及時采取治療[12-13]。而且通過培養(yǎng)得到老年感染革蘭陰性菌最為常見的菌是銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌，大腸埃希菌，和醫(yī)院感染主要革蘭陰性菌基本一致[14]。這為臨床醫(yī)生治療革蘭陰性桿菌感染提供一定依據(jù)。

通過對科室分布構(gòu)成比可以看到，呼吸科和重癥監(jiān)護室的老年患者，感染革蘭陰性桿菌的機會比較大。在這兩個科室，患者病情重，抵抗力差，一旦出現(xiàn)感染會不同程度加重患者的原發(fā)疾病，特別是肺部陰性菌感染[15]，例如肺炎克雷伯菌[16]感染，因此，早發(fā)現(xiàn)中高危患者很重要，而且早選擇抗菌藥物對病情的緩解也是十分重要的。測定血清脂多糖可以節(jié)約時間，提高治療效果。

綜上所述，脂多糖檢測方法簡便快速，克服痰培養(yǎng)，血培養(yǎng)等常規(guī)培養(yǎng)，檢測結(jié)果滯后等缺點，老年患者測定血清脂多糖可以幫助診斷革蘭陰性桿菌感染，也有助于指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物，預(yù)測患者疾病轉(zhuǎn)歸。