蔡而瑋，趙 誠，吳燕燕，許圳鵬，林 峰

（福建中醫(yī)藥大學附屬人民醫(yī)院，福建 福州 350004）

伴隨著臨床疾病的多樣性，創(chuàng)面的修復問題逐漸增多，同時也增加家庭和社會的經(jīng)濟負擔［1］。紫白膏是福建中醫(yī)藥大學附屬人民醫(yī)院院內(nèi)制劑，能有效減輕肛腸疾病術后滲出、水腫等癥狀，促進創(chuàng)面愈合。前期臨床研究也證實紫白膏可減少滲液、出血，緩解術后水腫，促進創(chuàng)面愈合［2-3］。本研究將通過大鼠創(chuàng)傷模型實驗來進一步探討紫白膏對創(chuàng)面修復的作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 雄性SD大鼠120只，8～10周齡，體質(zhì)量270～310 g，購自福建醫(yī)科大學實驗動物中心，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（閩）2012-0001。動物自由飲食，飼養(yǎng)于標準動物房內(nèi)。適應性喂養(yǎng)2周后進行試驗。

1.2 實驗藥物 紫白膏（福建中醫(yī)藥大學附屬人民醫(yī)院制劑科提供）；紅霉素軟膏（馬應龍藥業(yè)集團股份有限公司）；凡士林（振德醫(yī)療用品股份有限公司）。

1.3 實驗試劑 金黃色葡萄球菌（上海魯微科技有限公司，批號：ATCC6538）；蘇木素伊紅（HE）染色試劑盒（碧云天生物技術有限公司，編號：C0105）

1.4 實驗儀器 CX31生物倒置顯微鏡（日本OLYMPUS公司）；石蠟超薄切片機（德國Leica公司）；石蠟包埋機（上海精宏實驗設備有限公司）；EP管、槍頭（美國Axygen公司）。

2 實驗方法

2.1 創(chuàng)面模型的制作 通過常規(guī)手術在大鼠背部脊柱兩側對稱部位做皮膚全層切口，深達筋膜，制成直徑約2.5～3.0 cm大小的創(chuàng)面。創(chuàng)面內(nèi)點狀種植金黃色葡萄球菌，總共約0.6 mL，連續(xù)種植2 d，至傷口出現(xiàn)膿性分泌物為止，并在局部取材做病理組織學檢驗證實感染形成。

2.2 分組處理 創(chuàng)面模型制作成功后將120只SD大鼠稱重后按照隨機區(qū)組法隨機分為凡士林對照組、紅霉素軟膏組、紫白膏組各40只。根據(jù)干預第3、7、14、21天 4個時間點，每組再分為 4個亞組，每亞組各10只。造模成功后第3天用藥前3組均正常取材，取材后3組以消毒棉簽將紫白膏、紅霉素、凡士林藥物均勻涂抹于對應大鼠的創(chuàng)面上，厚約1 mm，每日1次。清潔包扎創(chuàng)面，分籠飼養(yǎng)，每日換藥至創(chuàng)面完全愈合為止。

2.3 觀察指標及方法 肉眼觀察3組大鼠創(chuàng)面色澤和結痂情況，對3組創(chuàng)面愈合情況及愈合時間進行統(tǒng)計分析。應用HE染色觀察不同時間點大鼠創(chuàng)面肉芽生長情況。

2.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20.0進行統(tǒng)計數(shù)據(jù)。計量資料符合正態(tài)分布以（）表示，采用單因素方差分析。

3 結 果

3.1 不同時間點3組大鼠創(chuàng)面愈合情況 第3天換藥時觀察創(chuàng)面，創(chuàng)面少許滲血，較多組織滲出，創(chuàng)緣組織紅腫，部分痂皮形成。第7天開始3組大鼠創(chuàng)面均見痂皮組織，創(chuàng)緣水腫減輕，但紫白膏組增生肉芽組織明顯并向心性爬行生長。第14天時，3組創(chuàng)緣均有上皮組織，紫白膏組與紅霉素軟膏組及凡士林對照組比較創(chuàng)面明顯縮小。至第 21天，3組創(chuàng)面均明顯縮小，但紫白膏組大鼠創(chuàng)面痂皮基本脫落，大鼠創(chuàng)面基本修復；紅霉素軟膏組及凡士林對照組可見部分痂皮，創(chuàng)面未完全修復。見圖1～4。3.2 不同時間點3組大鼠創(chuàng)面組織HE染色 第3天，3組大鼠創(chuàng)面組織鏡下可見不同程度的表面壞死組織，炎性細胞增生。第7天紫白膏組大鼠創(chuàng)面組織表面壞死組織及炎性細胞較其他兩組減少。術后第14天，紫白膏組肉芽組織較其他兩組明顯增生，可見少許炎性細胞浸潤，3組均有成纖維細胞增生。術后第21天，再生上皮基本覆蓋創(chuàng)面，纖維組織增生并炎性細胞明顯減少。見圖5～8。

圖1 換藥第3天3組大鼠創(chuàng)面愈合情況

圖2 換藥第7天3組大鼠創(chuàng)面愈合情況

圖3 換藥第14天3組大鼠創(chuàng)面愈合情況

圖4 換藥第21天3組大鼠創(chuàng)面愈合情況

圖5 術后第3天大鼠創(chuàng)面組織HE染色圖（×100）

圖6 術后第7天大鼠創(chuàng)面組織HE染色圖（×100）

圖7 術后第14天大鼠創(chuàng)面組織HE染色圖（×100）

圖8 術后第21天大鼠創(chuàng)面組織HE染色圖（×100）

3.3 3組大鼠創(chuàng)面愈合時間比較 見表1。

表1 3組大鼠創(chuàng)面愈合時間比較（）d

表1 3組大鼠創(chuàng)面愈合時間比較（）d

注：與紫白膏組比較，1）P＜0.05。

組別凡士林對照組紅霉素軟膏組紫白膏組n 40 40 40愈合時間23.50±1.591）23.05±1.661）21.02±1.23

4 討 論

中醫(yī)藥在促進創(chuàng)面愈合方面具有良好療效，臨床上采用辨證論治的原則，綜合應用多種療法，不同的治則對應不同的“證”。根據(jù)中醫(yī)辨證論治，可分為外治法和內(nèi)治法。外治法是利用中藥以散、膏、熏、敷、貼等多種不同形式作用于病變局部，藥物借助腧穴進入皮毛，吸收后再經(jīng)過經(jīng)絡的作用，使藥物有效成分直達病灶，以達到祛除毒邪、消腫止痛、去腐生肌之功效；內(nèi)治法的主要劑型是湯劑，常以清熱解毒、涼血止血等藥物為主。不管外治或內(nèi)治，最終目的均為充分發(fā)揮中藥的功效，以達到積極防治并發(fā)癥的作用。利用中藥的清熱解毒作用，局部外用有殺菌、抗炎作用，內(nèi)服又能清除血液中有害物質(zhì)，可通絡化瘀，修復血管內(nèi)膜，改善血流狀態(tài)。清熱解毒中藥還能降低創(chuàng)面局部溫度，利于減少創(chuàng)面局部滲出及肉芽水腫，加速肉芽生成，促使創(chuàng)面愈合，與中醫(yī)“化瘀利于生肌”的治療思想一致［4］。

紫白膏是我院肛腸科臨床常用外用膏劑，主要用于治療肛門病術后，應用歷史悠久，臨床療效顯著。紫白膏主要由紫草、大黃、白及、煅石膏等組成，其中是以紫草、大黃為君，煅石膏、白及為臣。紫草取其涼血、活血、清熱解毒之功效，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)紫草具有抗菌、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化等功效［5］；大黃具有清熱瀉火、活血祛瘀之功，藥理研究表明大黃有瀉下、止血、抗病原微生物、抗腫瘤、抗氧化等作用［6］，兩味共為君藥以增強清熱解毒、活血祛瘀之功。石膏有瀉火清熱、斂瘡生肌之功［7］；白及有收斂止血、消腫生肌之功，二味同用，可增加君藥消腫生肌之功，促進傷口的愈合。

創(chuàng)面愈合可以分為止血期、炎癥期、增殖期和組織重塑期，是一個動態(tài)的過程［8］。創(chuàng)面愈合又是一個復雜、連續(xù)的生物化學和細胞活動過程［9］。多種細胞因子參與創(chuàng)口愈合的過程，并彼此之間相互作用，使得創(chuàng)面的愈合順利進行［10］。同時創(chuàng)面愈合過程中，重要的條件是毛細血管新生［11］。創(chuàng)傷局部的肉芽增生及新生的血管，能夠保證組織修復過程所需要的營養(yǎng)，同時促進壞死物質(zhì)的運輸及吸收［12］。近年來，大量中藥制劑應用于臨床治療各種急慢性創(chuàng)面，創(chuàng)面的愈合速度明顯加速，效果明確［13］。研究發(fā)現(xiàn)，外用中藥能促進創(chuàng)面肉芽組織相關生長因子的釋放，同時創(chuàng)面氧自由基的量和活性也進一步降低，機體抗感染能力得到提高［14］。課題組成員在前期的臨床研究也進一步說明紫白膏能有效控制術后創(chuàng)面炎癥反應，促進創(chuàng)面的愈合［15］。本課題研究基于中醫(yī)“化瘀利于生肌”的治療思想及紫白膏的清熱解毒、祛瘀生肌之功效，進一步將紫白膏應用于大鼠創(chuàng)面模型。研究發(fā)現(xiàn)在創(chuàng)面修復的不同時期，紫白膏相對于紅霉素軟膏和凡士林，表現(xiàn)出對創(chuàng)面肉芽組織的炎性細胞調(diào)節(jié)較好，明顯加速創(chuàng)面肉芽組織增生，減低炎性細胞的浸潤，加快創(chuàng)面愈合的速度，提高創(chuàng)面愈合的質(zhì)量。

綜上所述，本課題探討紫白膏在大鼠創(chuàng)面愈合過程中影響，但是其干預的具體機制未明，而在創(chuàng)面愈合過程中存在著多種細胞因子、基因等的不斷作用，是下一步研究重點。