徐春志，張 海，景書灝，劉 霞2，楊 峰，陳 紅，袁翠霞

(1.貴陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550081；2.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550008)

2017年12月，貴州省某養(yǎng)牛場的40頭牛出現(xiàn)血便、血尿、流鼻涕、鼻鏡干燥、懷孕母牛流產(chǎn)、胎衣不下等臨床癥狀。發(fā)病后該養(yǎng)殖場曾使用青霉素、鏈霉素、磺胺嘧啶鈉、黃芪多糖等藥物治療，均無明顯效果。筆者根據(jù)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查確診為附紅細(xì)胞體與支原體混合感染?，F(xiàn)將診治情況報(bào)道如下，與同行探討。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

該場存欄牛217頭(其中：安格斯牛118頭、西門塔爾牛23頭、利木贊牛5頭、夏洛萊牛59頭、魯西黃牛10頭、荷斯坦牛2頭)，部分安格斯種牛是2016年12月從澳大利亞引進(jìn)，剛引進(jìn)時(shí)牛生長狀況較好，2017年12月后相繼出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、消瘦、血尿、血便、懷孕母牛流產(chǎn)、胎衣不下等臨床癥狀。牛場獸醫(yī)曾對發(fā)病牛使用青霉素、鏈霉素、磺胺嘧啶鈉、黃芪多糖等藥物進(jìn)行治療，無明顯好轉(zhuǎn)，病重牛很快死亡。共發(fā)病牛40頭，死亡10頭，死亡率4.61%(10/217)，病死率25%(10/40)，流產(chǎn)7頭，流產(chǎn)率3.22%(7/217)。

2 實(shí)驗(yàn)室檢查

2.1 布魯氏菌抗體檢測采集發(fā)病牛的血液4份，待血清自然析出后，以3 000 r/min離心5 min分離血清，按照國家標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》(GB/T 18646—2002)進(jìn)行檢測，同時(shí)設(shè)立陰性、陽性對照。結(jié)果：布魯氏菌抗體陰性。

2.2 血涂片鏡檢現(xiàn)場采集4頭發(fā)病牛的血液制作血涂片，帶回實(shí)驗(yàn)室使用甲醇固定10 min，吉姆薩染色15 min，鏡檢。結(jié)果：4份血涂片均發(fā)現(xiàn)大量的紅細(xì)胞變形為齒輪狀、星芒狀或不規(guī)則形狀，經(jīng)鑒定為附紅細(xì)胞體感染。見圖1。

圖1 血涂片吉姆薩染色鏡檢(10×100)

2.3 支原體病原檢測采集發(fā)病牛鼻拭子4份，加無菌PBS 1 mL混勻后，提取鼻拭子樣本DNA，按照支原體PCR檢測試劑盒(購自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司)方法進(jìn)行PCR擴(kuò)增(目的片段602 bp)，產(chǎn)物通過1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。結(jié)果：4份鼻棉拭子樣本均檢出牛支原體特異性片段，陽性率為100%(4/4)。見圖2。

圖2 牛支原體PCR擴(kuò)增結(jié)果M：2 000 bp Marker；+：陽性對照；-：陰性對照；1～4：檢測樣本

3 診斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查，確診發(fā)病牛為附紅細(xì)胞體與支原體混合感染。

4 治療

(1)治療附紅細(xì)胞體用“貝尼爾”5 mg/kg體重，深部肌肉注射，連續(xù)用藥7天；治療支原體用泰樂菌素5 mg/kg體重，肌肉注射，連續(xù)用藥7天。(2)對病情嚴(yán)重的牛，結(jié)合肌肉注射維生素 B121.5 mg/次，或內(nèi)服硫酸亞鐵，以促進(jìn)機(jī)體造血機(jī)能的恢復(fù)；用止血敏10 mL/次止血，安鈉咖5 g/次強(qiáng)心；同時(shí)配合使用磺胺嘧啶鈉0.1 g/kg治療繼發(fā)感染。

5 小結(jié)與討論

5.1附紅細(xì)胞體病是由附紅細(xì)胞體寄生于動(dòng)物的紅細(xì)胞表面及血漿中所引起的以高熱稽留、貧血和黃疸為主要臨床癥狀的傳染性疾病。附紅細(xì)胞體呈球形、卵圓形、月牙形等多種形態(tài)，游離于血漿中做搖擺、扭轉(zhuǎn)、翻滾等運(yùn)動(dòng)[1]。蟲體大多數(shù)位于紅細(xì)胞的邊緣，附著在紅細(xì)胞上時(shí)紅細(xì)胞呈齒輪狀、星芒狀或不規(guī)則形狀。

5.2牛支原體是柔膜體綱，支原體目，支原體科，支原體屬的成員，無細(xì)胞壁。感染?？梢鸱窝?、乳房炎，以及懷孕母牛流產(chǎn)、生殖器感染等多種病癥[2]。牛支原體病已在全世界范圍內(nèi)發(fā)生，對養(yǎng)牛業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失[3]。

5.3防控措施：目前附紅細(xì)胞體病還無有效的疫苗進(jìn)行預(yù)防，做好飼養(yǎng)管理和殺滅寄生蟲是預(yù)防該病的主要手段之一。牛支原體疫苗已經(jīng)上市，在發(fā)病的養(yǎng)殖場和支原體高發(fā)區(qū)域，疫苗接種是預(yù)防本病的主要和有效手段。養(yǎng)牛場不要在附紅細(xì)胞體病和支原體病高發(fā)的區(qū)域引種，同時(shí)在引種過程中要加強(qiáng)檢疫，飼養(yǎng)過程中應(yīng)加強(qiáng)疫病監(jiān)測和防控，建立和完善基本的防疫體系。建立無害化處理、生物安全管理體系并嚴(yán)格執(zhí)行。加強(qiáng)養(yǎng)牛場的日常管理，減少和消除應(yīng)激反應(yīng)等各種致病因素，在做好基礎(chǔ)免疫的同時(shí)要有效防治其他疾病特別是導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降的疾病發(fā)生。做好糞污處理，保持良好的養(yǎng)殖環(huán)境衛(wèi)生，同時(shí)加強(qiáng)環(huán)境消毒和殺蟲滅鼠。注意防治、消毒藥物的交替使用，避免產(chǎn)生耐藥性。