趙楊
摘 要 本實驗用20%ABS紅色塑膠液灌注牛蛙主動脈和肺動脈,待定型后,經(jīng)過37%的鹽酸腐蝕,自來水沖洗及人工修整等過程,制作出牛蛙心肝肺血管聯(lián)合鑄型標本。在腐蝕過程中,牛蛙的其他組織被腐蝕掉,僅剩下心肝肺的管道鑄型,從而制作出了既顯示心肝肺原有的形態(tài),又可以清楚地觀察到心肝肺血液循環(huán)系統(tǒng)的血管鑄型標本。該標本為更加深入對牛蛙心肝肺血管的研究提供了重要的材料依據(jù),具有重大意義。
關(guān)鍵詞 牛蛙;心肝肺;鑄型
鑄型標本可以用來研究各管道器官特別是血管系統(tǒng)復雜的位置關(guān)系和分布情況,是展示生物體全身各器官管道概況的標本,具有三維立體感強、構(gòu)型美觀、色澤鮮艷的顯著特點,在臨床、科研、解剖學研究和教學等方面有其獨到之處。
牛蛙(Bull frog)原產(chǎn)于美國東部數(shù)州,后被引進西部各州和其他國家,1959年我國引進牛蛙馴養(yǎng),1986年在我國中部和南部大量飼養(yǎng)。體綠或棕色,腹部白色至淡黃色,四肢有黑色條紋。體長約20cm,后肢長達25cm。成體大者體重超過0.5kg。常生活于靜水中或其附近。春季繁殖,卵產(chǎn)于水中。蝌蚪呈綠褐色帶有深色斑點。蝌蚪階段持續(xù)1-3年,決定于氣候條件。許多牛蛙可供食用或用作實驗材料。
實驗部分
1 制作器械和材料準備
1.1 器材和藥品
止血鉗,鑷子,剪刀,大方盤,自制套管,大頭針,蛙板,棉球,量筒,托盤天平,塑料注射器(10ml, 20ml),燒杯(10ml ,40ml,50ml 和1000ml),耐酸缸,縫線;乙醚(上海市馬陸制藥廠生產(chǎn)),丙酮(上?;瘜W試劑總廠生產(chǎn)),ABS塑料,鹽酸(重慶川江試劑廠生產(chǎn)),顏料(上海馬利牌)。
2 試驗前準備和試驗操作
2.1 試驗前的準備
選用20%ABS丙酮溶液作為填充劑。該填充劑的配方為20.00gABS塑料,100.00ml丙酮和適量紅色顏料。它的配置操作為首先用量筒量取丙酮100.00ml并且轉(zhuǎn)移入合適的試劑瓶中,用托盤天平準確稱取ABS塑料20.00g,投入到盛有100.00ml丙酮的試劑瓶中,充分搖勻后加入適量紅色顏料(上海馬利牌),約2.5h后,ABS顆粒完全溶解在丙酮溶液里,即配置成濃度為20%的紅色ABS丙酮溶液。
2.2 試驗過程
2.2.1 麻醉
將蘸取乙醚的棉球與牛蛙一起放入1000ml的燒杯中,倒置燒杯。待牛蛙出現(xiàn)規(guī)則的胸腹式呼吸,全身肌肉松弛,胸腹式呼吸,全身肌肉松弛,眼瞼、角膜、結(jié)膜的反射變?nèi)?,表明牛蛙進入外科麻醉期,即為最佳麻醉狀態(tài),此時將牛蛙取出。
2.2.2 插管
根據(jù)所研制標本的目的和要求選擇灌注的血管,我們通過主動脈與肺動脈對心肝肺進行插管灌注。根據(jù)管徑的大小及位置選擇適合的灌注套管。插管的具體操作如下:
在插管之前,首先在動脈圓錐與肺動脈連接處用縫線結(jié)扎肺動脈,接著再進行插管。主動脈向心插管:找到主動脈被剪斷的開口,把自制套管針頭沿向心方向穿入主動脈中,然后用縫線結(jié)扎牢固,再用止血鉗固定針頭,以防其滑動或穿透血管壁。肺動脈離心插管:首先用眼科剪在靠近肺動脈結(jié)扎處0.5cm左右將肺動脈壁剪一針空大小的剪口;接著將自制套管針頭沿血流(離心)方向插入肺動脈中并且用縫線結(jié)扎牢固,再用止血鉗固定針頭。
3 結(jié)果觀察
從制作的心肝肺標本可以看出,鑄型的輪廓清楚,成型美觀。管道主干飽滿,疏密有致;正確地顯示心臟的動脈,心室及左右心房的形態(tài)結(jié)構(gòu);牛蛙肝臟血管分支相互交錯,可以清楚地看出肝臟的分葉。肺臟血管細小分支顯示較為完整。整個標本完整的顯示了心肝肺的毗鄰關(guān)系,展示了心肝肺血管的分布情況。
4 討論
4.1 ABS的優(yōu)點
填充劑按其性質(zhì)可以分為兩大類:化學固化型和溶劑揮發(fā)固化型。ABS屬于溶劑揮發(fā)固化型,它不需要保持在一定的溫度下進行,操作簡便,容易為初學者掌握,制作出來的鑄型也美觀。ABS是目前使用較廣泛的鑄型劑,溶解度高、溶解速度快,注入管道后溶劑揮發(fā),留下凝固的ABS,它顆粒細小,易于與色料均勻混合,色彩鮮艷且不褪色,來源廣泛,價格低廉,在各大試劑商店均有售。丙酮為一種有機溶劑,揮發(fā)性強,水溶性好,填充劑注入管道后,快速經(jīng)管壁滲入臨近組織間隙,再從組織表面揮發(fā),加快管道內(nèi)鑄型劑成形。
4.2 自制套管的優(yōu)點
由于牛蛙心肝肺較人類小,主動脈與肺動脈亦很細小,若用常規(guī)的套管在主動脈與肺動脈插管灌注填充劑[12][13],會對心肝肺傷害嚴重,且操作難度大,不易成功。在本實驗中,我們根據(jù)牛蛙肺動脈和主動脈血管直徑的大小制備出了灌注套管。實驗表明,這樣的灌注套管只需在每次使用之后用丙酮沖洗,放于陰涼處保存即可,可以重復利用,價格低廉,并且灌注過程中套管不易自動脫落,操作方便,在對血管直徑較細的標本制作中起到了事半功倍的效果。
4.3 細致設計操作
制作多器官聯(lián)合鑄型標本,不同于單一器官鑄型標本的制作,操作比較復雜,設計制作時一定要認真細致,才可以避免操作中出現(xiàn)差錯,造成血管灌注不全、浪費材料,增大實驗成本。
5 結(jié)論
通過實驗,制作出了牛蛙心肝肺鑄型標本,其輪廓清楚,成型美觀。管道主干飽滿,疏密有致;正確地顯示出了心臟的動脈、心室及左右心房的形態(tài)結(jié)構(gòu);牛蛙肝臟血管分支相互交錯,可以清楚地看出肝臟的分葉。肺臟血管細小分支顯示較為完整。整個標本完整的顯示了心肝肺的毗鄰關(guān)系,展示了心肝肺血管的分布情況。
參考文獻:
[1] David Michael McMullan, Frank L. Hanley ,R. Kirk Riemerb. A method for selectively limiting lumen diameter in corrosion casting[J]. Microvascular Research.2008,67(3):21 5-217.
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[3] 石謹,王興海,李忠華等. 心肺肝鑄型標本的設計與制作 [J].解剖學雜志,2007,22(6):561-562.