蔡子田 姚學(xué)強(qiáng) 周鳳蓮 周莉

摘要：目的 ?應(yīng)用FUS-2000全自動(dòng)尿液分析工作站對(duì)精液進(jìn)行精子計(jì)數(shù)。方法 探討FUS-2000全自動(dòng)尿液分析工作站與計(jì)數(shù)池對(duì)精液進(jìn)行檢測(cè)計(jì)數(shù)，將兩者結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果 FUS-2000尿液分析工作站與計(jì)數(shù)池結(jié)果的比較，t=1.42，p﹥0.05，兩者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 FUS-2000全自動(dòng)尿液分析工作站可用于臨床精液精子檢測(cè)計(jì)數(shù)，操作快速方便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

關(guān)鍵詞：FUS-2000全自動(dòng)尿液分析工作站;計(jì)數(shù)池;精子;計(jì)數(shù)

【中圖分類號(hào)】R319 ???【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B ??【文章編號(hào)】2107-2306（2019）04-266-02

精液常規(guī)檢查是實(shí)驗(yàn)室最基本的檢查，計(jì)數(shù)池對(duì)精液精子計(jì)數(shù)仍是基層實(shí)驗(yàn)室最常用的方法，現(xiàn)階段仍是精液精子計(jì)數(shù)的金標(biāo)準(zhǔn)。由于計(jì)數(shù)池影響因數(shù)很多，計(jì)數(shù)誤差較大。為提高精液計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，減少誤差因數(shù)，實(shí)驗(yàn)室探討FUS-2000全自動(dòng)尿液分析工作站（以下簡(jiǎn)稱工作站）的臨床應(yīng)用價(jià)值，用工作站與計(jì)數(shù)池進(jìn)行精液檢測(cè)計(jì)數(shù)并對(duì)照分析。

1 臨床資料

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來(lái)源 2018年1月至2018年3月門診患者 精液標(biāo)本30份。

1.1.2精液的采集方法 ?要求患者精液采集前，一般應(yīng)禁欲3～7天 ; 采集時(shí)在的廁所內(nèi)用手淫的方法采集，收集所有精液于一次的無(wú)菌尿杯中，放37℃保溫30-60分鐘檢測(cè) 。

1.1.3 儀器和試劑 工作站（長(zhǎng)春迪瑞）及其配套試劑;OLYMPUS-31.顯微鏡.血細(xì)胞計(jì)數(shù)池。

1.1.4 標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控 工作站標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控為迪瑞廠家提供的原裝配套產(chǎn)品.

1.2方法

1.2.1工作站檢測(cè) 按儀器說(shuō)明，嚴(yán)格操作;每日檢測(cè)前均進(jìn)行質(zhì)控.用血紅蛋白吸管吸取液化精液40ul，于3.96ml精液稀釋液中（100倍稀釋）上機(jī)檢測(cè)。因統(tǒng)計(jì)學(xué)上符合泊松分布規(guī)律，為減少取樣誤差，必須計(jì)數(shù)足夠數(shù)量的精子，最好計(jì)數(shù)400個(gè)以上的精子，使計(jì)數(shù)精密度能達(dá)到5%;精子的參考范圍為15-213 *10^9/L[1].即15-213 *10^3/ul，均值為114*10^3/ul，稀釋100倍后均值為1140/ul，能達(dá)到要求范圍，同時(shí)便于工作站準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。

1.2.2計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù) 用血紅蛋白吸管吸取液化精液20ul，加入380u1精子稀釋液中。精液與稀釋液混勻后滴入計(jì)數(shù)池內(nèi)，靜止5分鐘左右，讓所有精子細(xì)胞沉積下來(lái)，按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第四版精液檢驗(yàn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.2.3將工作站與計(jì)數(shù)池檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行配對(duì) t 檢驗(yàn).

1.2.3精密度試驗(yàn) ?選取高 中 低濃度的精液各一份使用工作站對(duì)同一份標(biāo)本重復(fù)測(cè)定20次，分析其批內(nèi)精密度。結(jié)果以變異系數(shù)（CV）表示。

2結(jié)果

2.1 ?采用t檢驗(yàn)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析， t=1.42，p﹥0.05，兩者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 工作站精密度測(cè)試結(jié)果 ：高 中 低濃度檢測(cè)批內(nèi)精密度結(jié)果符合要求。見(jiàn)下表

3 討論

精液常規(guī)檢查是平價(jià)男性生育能力的最基本的檢查方法，精子計(jì)數(shù)是其最重要的指標(biāo)。但國(guó)內(nèi)外專家均發(fā)現(xiàn)不同實(shí)驗(yàn)室間的精子計(jì)數(shù)結(jié)果可比性較差，其原因不僅包括來(lái)自精液標(biāo)本本身的影響因數(shù)，如標(biāo)本完整性、精液粘稠度等還包括來(lái)自精子計(jì)數(shù)操作過(guò)程中的技術(shù)誤差，如計(jì)數(shù)池的差異、樣本混勻、加樣、技術(shù)人員的熟練程度等。這些影響因數(shù)不僅干擾手工計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)也存在于計(jì)算機(jī)輔助的精液分析中[2]。工作站的尿有形成分測(cè)試是基于流動(dòng)式顯微成像作為原理。儀器的流體力學(xué)系統(tǒng)由特別制作的具有簿層結(jié)構(gòu)的流動(dòng)池構(gòu)成，工作站采樣后，樣本進(jìn)入流動(dòng)池，同時(shí)注射泵推動(dòng)鞘液進(jìn)入流動(dòng)池，使樣本在鞘液的包裹下進(jìn)入流動(dòng)池的簿層結(jié)構(gòu)。樣本液體在鞘液的作用下以單層細(xì)胞的厚度在流動(dòng)池的簿層結(jié)構(gòu)處流過(guò)，然后被高速拍攝成像。工作站采用了鞘流技術(shù)，高速攝像技術(shù)和人工智能識(shí)別技術(shù)。并根據(jù)被拍攝到的“粒子”的形態(tài)、紋理和頻域特征來(lái)進(jìn)行識(shí)別分類。儀器可將這些“粒子”分成12大類：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、白細(xì)胞團(tuán)、鱗狀上皮細(xì)胞、非鱗狀上皮細(xì)胞、透明管型、病理管型、結(jié)晶、細(xì)菌、酵母菌、精子、粘液絲。通過(guò)自動(dòng)有形成分識(shí)別軟件進(jìn)行分類后，根據(jù)拍攝到的“粒子”影像數(shù)量和掃描的標(biāo)本體積來(lái)計(jì)算有形成分的濃度[3]。單位體積內(nèi)的“粒子”通過(guò)分析儀全部進(jìn)行計(jì)數(shù)，對(duì)有些不能準(zhǔn)確識(shí)別的有形成分可通過(guò)人工識(shí)別加以辨認(rèn)和修正，可以得到其具體成分準(zhǔn)確結(jié)果，由于是對(duì)單位體積內(nèi)的全部“粒子”進(jìn)行儀器計(jì)數(shù)，減少了許多誤差因素，測(cè)試結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。

應(yīng)用工作站進(jìn)行精液精子計(jì)數(shù)，操作快速方便，安全可靠，減少了手工計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)中許多影響因數(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好。FUS-2000全自動(dòng)尿液分析工作站可用于精液常規(guī)檢查中精子計(jì)數(shù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 尚紅，王毓三，申子瑜。全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]。4版。北京：人民衛(wèi)生出版社，2015.1：188-193

[2] 胡毓安，陸金春，呂年青，等。4種精子計(jì)數(shù)方法的比較[J]。中華男科學(xué)雜志2006，12（3）222-227

[3] 迪瑞FUS系列全自動(dòng)尿液分析工作站用戶手冊(cè)。5-6