王連平，謝昀燁，方麗，金立新，陳春華，王漢榮*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護與微生物研究所，浙江 杭州 310021；2.杭州市富陽區(qū)農(nóng)林局，浙江 富陽 311400)

蘆筍(AsparagusofficinalisL)屬百合科天門冬屬，原產(chǎn)于地中海沿岸地區(qū)。19世紀傳入我國，經(jīng)長期發(fā)展，中國已成為世界蘆筍生產(chǎn)和貿(mào)易的大國[1]。浙江省是我國南方綠蘆筍主產(chǎn)區(qū)，早期蘆筍均為露地栽培，現(xiàn)多為設(shè)施栽培，極少露地栽培。蘆筍為多年生宿根作物，一經(jīng)栽培可存續(xù)10余年，故生產(chǎn)后期連作障礙問題較為突出。

蘆筍根腐病是由尖孢鐮刀菌(FusariumoxysporumSchl．)、串珠鐮刀菌(FusariummoniliformeSheld)、再育鐮刀菌(FusariumproliferatumSheld)等多種鐮刀菌引起的根部病害[2-5]。近年來，隨著設(shè)施蘆筍的大力發(fā)展，莖枯病發(fā)生趨輕，根腐病發(fā)生趨重。由于根腐病有較高的毀種風(fēng)險，是現(xiàn)階段筍農(nóng)關(guān)注的重要病害。本研究調(diào)查了設(shè)施蘆筍根腐病的發(fā)生情況，測定了土壤中根腐病菌菌量，明確與種植時間的關(guān)系，研究蠶沙對根腐病菌的抑制、對連作土壤的改良及根腐病防治作用，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 設(shè)施連作蘆筍根腐病與根腐病菌調(diào)查

1.1.1 調(diào)查方法

2017年7月在杭州市蘆筍集中種植區(qū)富陽和蕭山調(diào)查設(shè)施連作蘆筍根腐病發(fā)病情況。按蘆筍種植年限劃分，設(shè)1、3、5、7、9、11年共6個調(diào)查處理，每處理隨機選10個左右的設(shè)施，調(diào)查蘆筍根腐病發(fā)生情況，取土樣測定土壤根腐病菌的菌量。

1.1.2 設(shè)施連作蘆筍根腐病調(diào)查

于選定設(shè)施中隨機取3點，每點隨機取15叢調(diào)查蘆筍根腐病，計算所調(diào)查設(shè)施蘆筍根腐病的發(fā)病率。

1.1.3 設(shè)施連作蘆筍根腐病與根腐病菌土樣采集與菌量測定

于選定的設(shè)施中采用五點取樣法取土樣，每點采取耕作層土樣約100 g，將所采5點土樣破碎、混勻，從中取約100 g土樣帶回實驗室，測定該設(shè)施土壤根腐病菌的菌量。土壤根腐病菌的菌量測定采用鏈霉素PDA平板法[6]。

1.2 蠶沙對蘆筍根腐病菌抑制作用的室內(nèi)生物測定

采用液體培養(yǎng)法測定蠶沙對蘆筍根腐病菌抑制作用[6]。將蠶沙(來自浙江海寧)烘干、粉碎，加蒸餾水浸漬24 h，過濾得蠶沙水浸漬液，將其與PDA培養(yǎng)液混合制成含0.5%、1.0%、2.0%蠶沙水浸漬液的PDA培養(yǎng)液，并滅菌待用。上述3種處理培養(yǎng)液與PDA培養(yǎng)液(CK培養(yǎng)液)每種取3瓶，每瓶均含培養(yǎng)液100 mL，接種蘆筍根腐病菌菌株后在搖床中培養(yǎng)。所用蘆筍根腐病菌菌株為FU15-36，為尖孢鐮刀菌。搖床培養(yǎng)條件是溫度28 ℃，轉(zhuǎn)速120 r·min-1。培養(yǎng)7 d后，先測定病菌的大型孢子產(chǎn)量，再測定病菌的生物產(chǎn)量(干重)，計算蠶沙水浸漬液對根腐病菌的抑制效果。

對大型孢子產(chǎn)量的抑制效果=(CK孢子產(chǎn)量-處理孢子產(chǎn)量)/CK孢子產(chǎn)量×100。

對病菌生物產(chǎn)量的抑制效果=(CK生物產(chǎn)量-處理生物產(chǎn)量)/CK生物產(chǎn)量×100。

1.3 蠶沙對設(shè)施連作土壤改良和對蘆筍根腐病的防病作用

采用盆缽試驗法研究蠶沙對設(shè)施連作土壤改良和對蘆筍根腐病的防病作用。試驗蠶沙來自浙江海寧(同上)，試驗土壤來自富陽，為設(shè)施種植蘆筍9年的土壤。將試驗蠶沙與試驗土壤充分混合制成含0、0.5%、1.0%、2.0%蠶沙的土壤。將上述4種含蠶沙試驗土裝入盆缽，每種90盆，澆水浸濕土壤。10 d后，測定上述盆缽中土壤pH值。每盆種植1株筍苗，品種為特綠龍，種植時筍苗高約30 cm。在種植時測株高，在種植60 d后再測株高，計算株高日增速。種植65 d后調(diào)查根腐病發(fā)生情況，計算根腐病株發(fā)病率。

2 結(jié)果與分析

2.1 設(shè)施連作蘆筍根腐病與根腐病菌調(diào)查

2017年在杭州市富陽區(qū)和蕭山區(qū)調(diào)查61棟設(shè)施的不同種植年份的蘆筍根腐病發(fā)生情況。表1結(jié)果顯示，隨著蘆筍種植年份的增加，根腐病發(fā)生逐年加重，種植前3年根腐病較少見，種植7、11年的發(fā)病率分別達3.79%、7.43%。在選定的61棟設(shè)施蘆筍地取土樣，測定其根腐病菌菌量。結(jié)果表明，隨著蘆筍種植年份的增加，蘆筍地根腐病菌菌量逐年加重。種植前3年根腐病較少見，種植7、11年的根腐病菌菌量分別達3.18×102、9.82×102g-1。

表1 設(shè)施連作蘆筍根腐病與根腐病菌調(diào)查

注：不同大、小寫字母分別表示在0.01、0.05水平差異顯著。表2～3同。

2.2 蠶沙對設(shè)施連作蘆筍根腐病菌的抑制作用

以PDA培養(yǎng)液為對照，測定蘆筍根腐病菌在含0.5%、1.0%、2.0%蠶沙水浸漬液的PDA培養(yǎng)液中培養(yǎng)7 d的生物產(chǎn)量(干重)和大型孢子產(chǎn)量。表2結(jié)果表明，不同含量的蠶沙水浸漬液均不同程度抑制蘆筍根腐病菌生物產(chǎn)量(干重)和大型孢子產(chǎn)量，蠶沙水浸漬液含量越高，其抑制程度越高，2%蠶沙水浸漬液對蘆筍根腐病菌生物產(chǎn)量(干重)、大型孢子產(chǎn)量的抑制率分別達69.38%和74.65%。

表2 蠶沙對設(shè)施連作蘆筍根腐病菌抑制作用

2.3 蠶沙對設(shè)施連作土壤改良和對蘆筍根腐病的防病作用

采用盆缽試驗法研究不同使用量蠶沙對設(shè)施種植蘆筍9年的連作土壤的改良作用，以及對蘆筍根腐病的防病作用。表3表明，蠶沙明顯改善連作土壤的抗病性。一是明顯提高土壤pH值，含2.0%的蠶沙連作土pH值可達6.2；二是改善連作土壤對蘆筍的適合度，解除了連作土壤相關(guān)因素對蘆筍生長的抑制；種植在含2.0%的蠶沙連作土的蘆筍，苗株高日均增速可達9.6 mm·d-1，與對照非連作土(水稻土)相當。蠶沙可顯著減少蘆筍根腐病，種植在連作土上蘆筍根腐病發(fā)病率高達16.63%，種植在含2.0%的蠶沙連作土的無蘆筍根腐病發(fā)生。

表3 蠶沙對設(shè)施連作土壤改良和對蘆筍根腐病的防病作用

3 小結(jié)與討論

3.1 設(shè)施連作蘆筍根腐病及由其引起的連作障礙

本研究顯示，隨著蘆筍種植年份的增加，根腐病發(fā)生逐年加重；土壤中根腐病菌大幅度累積。蘆筍根腐病是引起蘆筍連作障礙的重要原因，蘆筍根腐病病原為鐮刀菌，是一種土壤習(xí)居真菌，易在土壤中累積。在設(shè)施栽培中，由于環(huán)境條件適宜，更易累積。蘆筍是引進作物，蘆筍根腐病的主要病原是尖孢鐮刀菌石刁柏?；蚚2]，蘆筍根腐病菌可能由引種進入我國；根據(jù)對筍區(qū)長期的實踐經(jīng)驗，20世紀90年代前，蘆筍根腐病很少見，此后漸多，現(xiàn)已成為一種常見的蘆筍病害。

3.2 蠶沙對設(shè)施連作土壤改良和對蘆筍根腐病的防病作用

本研究表明，蠶沙有較強的抑制蘆筍根腐病菌生長和產(chǎn)孢作用，可能是蠶沙中含有的異槲皮苷、蘆丁、紫云英苷等黃酮類和生物堿類等物質(zhì)具有抑菌作用有關(guān)[7]。蠶沙是一種安全、優(yōu)質(zhì)的有機肥，在很多作物上都有應(yīng)用[8]。盆缽試驗顯示，蠶沙對設(shè)施種植蘆筍連作土壤和蘆筍根腐病防病有明顯的正效應(yīng)。蘆筍是多年生作物，一般存續(xù)期在8年以上，由此，土壤中對蘆筍生長的正因素的連續(xù)消耗和負因素的連續(xù)累積使其越來越不適宜蘆筍，如營養(yǎng)的缺失與不平衡，根腐病菌的累積等，連作障礙越來越重。緩解(解決)連作障礙問題，不僅可提高蘆筍產(chǎn)量，還有可能延長蘆筍存續(xù)期。蠶沙作為一種有較強抑菌作用的有機肥，同時具有促進蘆筍生長和緩解蘆筍連作障礙2種作用，有較高的應(yīng)用價值，值得進一步試驗推廣。