夏天，韓耀宗

(株洲市白蟻防治管理辦公室，湖南 株洲 412000)

吡蟲啉(imidacloprid)是一種新型吡啶雜環(huán)廣譜煙堿類殺蟲劑[1]，其作用機(jī)理為抑制昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿受體，使昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)的正常傳導(dǎo)受到阻斷，進(jìn)而使昆蟲麻痹死亡[2]，具有內(nèi)吸、胃毒和觸殺特性[3-4]。以懸浮劑為劑型的農(nóng)藥制劑是水基性制劑中成本低、市場發(fā)展前景好、加工工藝成熟和可加工的農(nóng)藥活性成分多的新劑型，具有清潔生產(chǎn)對環(huán)境友好、低毒性和低刺激性、以水為介質(zhì)成本低和不會發(fā)生易燃易爆的特點(diǎn)[5]。由于吡蟲啉在土壤中作用緩慢，環(huán)境安全性高的特性，以懸浮劑為劑型的吡蟲啉制劑目前廣泛應(yīng)用于白蟻防治工程[6-11]。在對吡蟲啉懸浮劑的藥劑分析中，側(cè)重于對混配制劑的分析方法的研究[12-14]。吡蟲啉原藥的分析方法雖已有國標(biāo)[15]，但對常用于白蟻防治工程中吡蟲啉懸浮劑單一制劑的分析方法報(bào)道較少。本文的分析方法具有簡便、快速，精密度和準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)，為藥劑的質(zhì)量控制及應(yīng)用研究提供參考和幫助。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260 infinityⅡ型高效液相色譜儀；VWD紫外可變波長檢測器；1260 infinityⅡ型四元泵；自動進(jìn)樣器；KQ-250TDE超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司OpenLAB CDS Chemstation工作站)；AUY220型分析天平(日本島津公司)。

吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品(質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.1%，上海市農(nóng)藥檢定所)；針頭過濾器(0.45 μm孔徑有機(jī)膜)；乙腈(色譜純)；15%吡蟲啉懸浮劑試樣(藥劑廠家提供)。

1.2 液相色譜操作條件

色譜柱為Agilent 5 HC-C18 (250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相為乙腈:水為70:30(V/V)；流量為1.0 mL·min-1；柱溫25 ℃；進(jìn)樣體積5 μL；檢測波長為270 nm；保留時(shí)間約3.07 min。

上述操作參數(shù)為本單位實(shí)驗(yàn)室最優(yōu)化的操作要素。不同實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)自身儀器特點(diǎn)，為獲得最優(yōu)結(jié)果，對給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。

1.3 測定方法

1.3.1 吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

用分析天平稱取吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)0.1 g(精確至0.000 2 g)，在分析天平中靜置1 min后，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀釋并定容至刻度，用移液管移取上述溶液10 mL于100 mL容量瓶中，用流動相定容于刻度，超聲波清洗器超聲溶解，冷卻備用。

1.3.2 吡蟲啉懸浮劑試樣溶液的制備

根據(jù)已制備好的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液質(zhì)量濃度，得出吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量，計(jì)算吡蟲啉懸浮劑有效成分理論含量，制備與吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液質(zhì)量濃度相近的試樣溶液的質(zhì)量濃度，即用電子分析天平稱取15%吡蟲啉懸浮劑試樣0.066 7 g(精確至0.000 2 g)，在分析天平中靜置1 min后，置于100 mL容量瓶中，用流動相定容于刻度，用超聲波清洗器超聲10 min，冷卻，用針頭式過濾器過濾，置于進(jìn)樣瓶中。

1.3.3 測定

在上述1.2的儀器操作條件下，待液相色譜儀泵的壓力和基線平穩(wěn)后，連續(xù)注入數(shù)針吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，待連續(xù)2針吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液的響應(yīng)值相對變化小于1.5%后，按照吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液、吡蟲啉懸浮劑試樣溶液、吡蟲啉懸浮劑試樣溶液、吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液的順序進(jìn)行測定。

1.3.4 吡蟲啉質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)算

將測得的2針吡蟲啉懸浮劑試樣溶液峰面積響應(yīng)值和吡蟲啉懸浮劑試樣溶液前后2針的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液的峰面積響應(yīng)值進(jìn)行平均，計(jì)算吡蟲啉懸浮劑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 流動相

根據(jù)本試驗(yàn)自身?xiàng)l件，選用Agilent 5 HC-C18色譜柱，并依據(jù)吡蟲啉的特性，選擇水和乙腈作為流動相，分別選用水和乙腈體積比為40∶60、30∶70、20∶80、10∶90等4種條件進(jìn)行測試，得出水∶乙腈體積比為30∶70時(shí)分離效果較好，出峰時(shí)間短。結(jié)果表明，吡蟲啉約3.07 min出峰，靈敏度高，出峰時(shí)間短，基線平穩(wěn)，峰形對稱、尖銳。

2.1.2 檢測波長

本實(shí)驗(yàn)室的高效液相色譜儀配置的是VWD檢測器，不具備DAD檢測器所具備的光譜掃描功能，查閱相關(guān)文獻(xiàn)[12-14]，設(shè)定檢測波長為270 nm。

2.2 線性關(guān)系的測定

根據(jù)本試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度和試樣溶液濃度，配制具有濃度梯度的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，使其質(zhì)量濃度分別為25、50、100、200、500 mg·L-1。按照1.2節(jié)儀器條件測定，以吡蟲啉的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吡蟲啉的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)，計(jì)算得出吡蟲啉線性關(guān)系為y=22.976x+127.77，R2為0.999 7。結(jié)果表明，在所需測定的吡蟲啉懸浮劑試樣溶液濃度范圍內(nèi)，呈現(xiàn)出符合方法要求的線性關(guān)系。

圖1 吡蟲啉線性關(guān)系

2.3 精密度測定

按照1.3節(jié)測定方法分別對同一樣品平行測定5次，測得15%吡蟲啉懸浮劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為14.93%，15.09%，14.89%，14.90%，14.95%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.081，變異系數(shù)為0.54%。該方法具有較好的精密度，符合試驗(yàn)要求。

2.4 準(zhǔn)確度的測定

通過在已知含量的15%吡蟲啉懸浮劑添加具有濃度梯度的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，測定本試驗(yàn)方法的回收率，以驗(yàn)證準(zhǔn)確度是否符合試驗(yàn)要求，即通過在已知含量15%吡蟲啉懸浮劑分別添加50、100、200 mg·L-1吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，進(jìn)行5次平行測定，測定有效成分的含量，計(jì)算得出回收率。由表1可知，此方法回收率符合準(zhǔn)確度的要求。

表1 不同吡蟲啉添加量的回收率

3 小結(jié)

利用高效液相色譜測定吡蟲啉懸浮劑中有效成分含量的方法，具有快速、簡便，線性關(guān)系好的特點(diǎn)，準(zhǔn)確度和精密度較高，適用于吡蟲啉懸浮劑的有效成分含量檢測。