朱國(guó)權(quán) 唐真正 鐘寶珠 呂朝軍

(1海南省儋州市農(nóng)林科學(xué)院 海南儋州571700;2中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所 海南文昌571339)

椰心葉甲［Brontispa longissima（Gest ro）]屬鞘翅目鐵甲科，是棕櫚上的重要害蟲之一，主要危害心葉組織，造成心葉大量死亡，嚴(yán)重影響棕櫚植物的景觀度和植株的健康生長(zhǎng)［1]。該蟲在中國(guó)屬于外來(lái)入侵性害蟲，與其它物種一樣，其由于原產(chǎn)地缺乏天敵的持續(xù)控制，在中國(guó)南方棕櫚種植區(qū)大量發(fā)生，已經(jīng)對(duì)椰子、檳榔等棕櫚作物造成了嚴(yán)重災(zāi)害。椰心葉甲嚙小蜂（Tetrastichus brontispae）是原產(chǎn)于印度尼西亞的椰心葉甲的蛹寄生蜂［2]，隸屬于膜翅目姬小蜂科，已經(jīng)被很多國(guó)家引進(jìn)用于椰心葉甲的防治，并取得了很好的效果［3-5]。

作為控制該蟲的一種手段，中國(guó)于2004年11月從中國(guó)臺(tái)灣引入椰心葉甲嚙小蜂到海南，目前用于防治椰心葉甲，效果顯著［6]。但在椰心葉甲危害嚴(yán)重的地區(qū)，仍需噴施殺蟲劑來(lái)迅速抑制其蟲口數(shù)量。植物源農(nóng)藥因其在環(huán)境中易降解、殘留少的特點(diǎn)，目前施用越來(lái)越普遍。為此，筆者在前期田間試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇對(duì)椰心葉甲防效較好的4種植物源殺蟲劑，采用室內(nèi)生物測(cè)定法，研究了其對(duì)椰心葉甲及椰心葉甲嚙小蜂的選擇毒性，旨在為椰心葉甲生物防治和化學(xué)防治技術(shù)的協(xié)調(diào)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試蟲源

椰心葉甲采自海南文昌、海口、三亞等地，續(xù)代隔離飼養(yǎng)于中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所椰心葉甲天敵寄生蜂繁育室內(nèi)，以椰心葉甲卵、4齡幼蟲、蛹和成蟲作為供試材料。

椰心葉甲嚙小蜂從中國(guó)臺(tái)灣引入，以椰心葉甲蛹為寄主，續(xù)代隔離飼養(yǎng)于中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所椰心葉甲天敵寄生蜂繁育室內(nèi)，以接蜂后1 d（卵期）、7 d（幼蟲期）、14 d（蛹期）的寄生蛹和羽化4 h的成蜂作為供試材料。

1.1.2 供試殺蟲劑

10%印楝素和98%苦參堿，由廣州翔博生物科技有限公司提供；95%煙堿和80%魚藤酮，由廣州健陽(yáng)生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲卵、幼蟲、蛹和成蟲4個(gè)蟲態(tài)的毒力測(cè)定

根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果，用蒸餾水將參試藥液稀釋5～6個(gè)濃度。椰心葉甲幼蟲、成蟲毒力測(cè)定用浸葉法。將椰子心葉剪成10 cm左右長(zhǎng)，浸入藥液中約10 s，取出自然風(fēng)干；用毛筆挑取椰心葉甲4齡幼蟲和成蟲至經(jīng)藥劑處理的椰子心葉上，放入保濕的飼養(yǎng)盒里，置于26℃、RH 80%、L：D=12：12的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)；24 h后檢查試蟲死亡率，檢查時(shí)用毛筆尖輕觸蟲體，腹足不動(dòng)者視為死亡。

椰心葉甲卵、蛹的測(cè)定方法為浸漬法。將產(chǎn)在椰子心葉上的卵、蛹置于不銹鋼網(wǎng)內(nèi)，包住，浸入供試藥液內(nèi)并不斷搖晃5 s后取出；用濾紙吸去多余藥液，置于上述恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)，待卵孵化和蛹羽化后分別統(tǒng)計(jì)死亡率。每濃度處理試蟲或卵20頭，重復(fù)5次，清水處理為對(duì)照。試驗(yàn)結(jié)果用Abbot公式校正，并用SAS統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)求得毒力回歸式和致死中濃度（LC50）。

1.2.2 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂卵、幼蟲、蛹及成蟲4個(gè)蟲態(tài)的毒力測(cè)定

椰心葉甲嚙小蜂成蟲毒力測(cè)定采用試管藥膜法。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果，用清水將參試藥液稀釋5～6個(gè)濃度；將供試藥液倒?jié)M試管，靜置10 s后倒掉藥液，自然晾干，形成藥膜；引入供試成蜂，以10%蜂蜜液的飽和棉球作為食料；24 h后統(tǒng)計(jì)死亡率，以蜂不能爬動(dòng)視為死亡。椰心葉甲嚙小蜂卵、幼蟲和蛹的毒力測(cè)定同1.2.1浸漬法。將經(jīng)藥劑處理后的寄生蛹置于上述恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)，待僵蛹出蜂后統(tǒng)計(jì)死亡率，以不能羽化出蜂的僵蛹視為死亡。每濃度處理僵蛹20頭、成蜂30頭，重復(fù)5次，以清水處理為對(duì)照。試驗(yàn)結(jié)果用Abbot公式校正，并用SAS統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)求得毒力回歸式和LC50。

1.2.3 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂的安全性評(píng)價(jià)

參照許春靄等［7]的方法。將各殺蟲劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂的致死中濃度（LC50）與椰心葉甲最不敏感蟲態(tài)的致死中濃度（LC50）相比，求得其各個(gè)蟲態(tài)的益害毒性比。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲4個(gè)蟲態(tài)的毒力測(cè)定

研究結(jié)果表明（表1），供試的4種植物源殺蟲劑均對(duì)椰心葉甲表現(xiàn)出一定的生物活性。其中通過(guò)浸漬法獲得煙堿、苦參堿、魚藤酮和印楝素對(duì)椰心葉甲卵的LC50分別為0.008、0.009、0.009、和0.015mg/mL，對(duì)蛹的LC50分別為0.015、0.015、0.016和0.016 mg/mL；采用浸葉法獲得的煙堿、苦參堿、魚藤酮和印楝素對(duì)椰心葉甲4齡幼蟲的LC50分別為 0.009、0.013、0.010和 0.017mg/mL，對(duì)成蟲LC50分別為0.011、0.013、0.013和0.013 mg/mL。

各藥劑毒力水平比較結(jié)果表明，煙堿、苦參堿和魚藤酮對(duì)椰心葉甲卵的活性差異不顯著，且以印楝素的活性最低，與前面3種藥劑存在顯著差異；4種藥劑對(duì)幼蟲的活性大小順序?yàn)椋簾焿A、魚藤酮＞苦參堿＞印楝素，除了煙堿和魚藤酮外，其余2種藥劑之間均存在顯著差異；4種藥劑對(duì)蛹和成蟲的活性沒(méi)有明顯差異（p＜0.05）。

2.2 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂4個(gè)蟲態(tài)的毒力測(cè)定

本研究結(jié)果表明，4種殺蟲劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂卵和成蟲的毒力水平相當(dāng)，其中對(duì)卵的LC50在0.012～0.015 mg/mL， 對(duì) 成 蟲 的LC50在 0.002～0.003mg/mL；在對(duì)椰心葉甲嚙小蜂幼蟲的毒力測(cè)定中，煙堿、苦參堿和印楝素的毒力水平相當(dāng)（LC50為0.010～0.022mg/mL），略高于魚藤酮（LC50約為0.03mg/mL）；對(duì)椰心葉甲嚙小蜂蛹的毒力測(cè)定中，煙堿、苦參堿和魚藤酮的毒力水平相當(dāng)（LC50在0.020～0.025mg/mL），略高于印楝素（LC50為0.038mg/mL）。詳見(jiàn)表2。

2.3 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲和椰心葉甲嚙小蜂的選擇毒力

根據(jù)4種植物源殺蟲劑對(duì)椰心葉甲和椰心葉甲嚙小蜂的毒力測(cè)定結(jié)果，從有效防治椰心葉甲和最大程度保護(hù)天敵的角度出發(fā)，選擇椰心葉甲對(duì)各藥劑最不敏感蟲態(tài)和天敵藥劑敏感性測(cè)定結(jié)果進(jìn)行選擇性分析。4種藥劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂不同蟲態(tài)毒力測(cè)定結(jié)果表明（表3），成蟲對(duì)供試藥劑最為敏感，其中針對(duì)煙堿、苦參堿、魚藤酮和印楝素的LC50為0.002～0.003mg/mL，僅為其它蟲態(tài)的1/5～1/10。從保護(hù)椰心葉甲嚙小蜂的方面考慮，以各藥劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂成蟲的選擇性作為最終評(píng)價(jià)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)供試的4種植物源殺蟲劑中，以煙堿和印楝素對(duì)其選擇性最高，選擇毒力指數(shù)分別為0.159和0.174，而苦參堿和魚藤酮選擇性較低，選擇毒力指數(shù)分別為0.117和0.111。4種藥劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂成蟲選擇性大小順序?yàn)椋河￠兀緹焿A＞苦參堿＞魚藤酮。

3 討論與結(jié)論

關(guān)于普通化學(xué)殺蟲劑對(duì)椰心葉甲和其寄生蜂的毒力測(cè)定已有報(bào)道。如Bar ingbing等［8]測(cè)定了除蟲脲、西維因?qū)σ娜~甲和椰心葉甲嚙小蜂的影響，呂寶乾等［9]、許春靄等［7]、唐超等［10]測(cè)定了殺蟲劑對(duì)椰心葉甲及其寄生蜂的毒性，但這些多集中在化學(xué)殺蟲劑方面，有關(guān)植物源殺蟲劑對(duì)椰心葉甲和寄生蜂的選擇毒性研究還少見(jiàn)報(bào)道。本研究結(jié)果表明，供試的4種植物源殺蟲劑對(duì)椰心葉甲和其寄生蜂椰心葉甲嚙小蜂均具有生物活性，且對(duì)不同蟲態(tài)的活性存在差異。眾所周知，田間用藥時(shí)為保證防治效果，通常會(huì)選擇殺滅害蟲最徹底的劑量，因此室內(nèi)研究中藥劑對(duì)害蟲最不敏感蟲態(tài)的劑量水平將具有很好的參考價(jià)值，而在評(píng)價(jià)藥劑對(duì)天敵昆蟲的選擇性時(shí)，天敵的最敏感蟲態(tài)應(yīng)該被優(yōu)先考慮。而本文研究結(jié)果表明，供試的藥劑對(duì)椰心葉甲嚙小蜂成蟲的活性最高；選擇性指數(shù)研究結(jié)果表明，供試的4種植物源殺蟲劑中，以煙堿和印楝素對(duì)其選擇性最高，選擇毒力指數(shù)分別為0.159和0.174，而苦參堿和魚藤酮選擇性較低。因此從殺蟲劑安全有效使用和保護(hù)椰心葉甲天敵的方面來(lái)看，在釋放椰心葉甲嚙小蜂的前后時(shí)段，應(yīng)盡量使用印楝素和煙堿等益害比較高的殺蟲劑。

表3 殺蟲劑對(duì)椰心葉甲和椰心葉甲嚙小蜂各蟲態(tài)的選擇毒力

在進(jìn)行殺蟲劑安全性評(píng)估時(shí)，藥劑的室內(nèi)毒力測(cè)定方法應(yīng)盡量接近試蟲在田間的受藥情況［11-12]，因此本實(shí)驗(yàn)針對(duì)不同試蟲的不同蟲態(tài)采用了不同的毒力測(cè)定方法，同時(shí)是在室內(nèi)進(jìn)行的，所用試蟲均是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)所得，且實(shí)驗(yàn)室條件下藥劑的揮發(fā)和降解等特性與大田條件相比存在一定差異［13]，在田間害蟲防控時(shí)，不能照搬室內(nèi)研究結(jié)果。大量研究結(jié)果表明影響藥劑防治效果的因素多種多樣［14-16]，因此本研究結(jié)果僅作為椰心葉甲生物防治和化學(xué)防治的參考，但對(duì)于該蟲的田間防治技術(shù)研究仍有一定的借鑒意義。