陳佳羽 樓招歡 俞靜靜 顏美秋

浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 浙江 杭州 311402

高脂血癥（hyperlipidemia，HLP）是由于血清中異常的脂質(zhì)代謝，血清膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）過(guò)高，高密度脂蛋白（HDL-C）過(guò)低而引發(fā)的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)水平失衡的疾病。據(jù)全國(guó)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，高TC血癥發(fā)病率為4.9%，低HDL-C血癥患病率為33.9%，高TG血癥患病率為13.1%，自2010年起，我國(guó)的心血管病事件將因人群血清TC水平在往后20年期間增長(zhǎng)近920萬(wàn)?，F(xiàn)代科學(xué)研究證明，桑抹茶對(duì)高血脂、肥胖、高血糖病癥的改善起到輔助作用。本文通過(guò)采用膽固醇耐受性好的金黃地鼠作為造模對(duì)象，研究并探討桑抹茶對(duì)高脂血癥金黃地鼠血脂水平及血液流變學(xué)的作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物：金黃地鼠，雄性，體質(zhì)量100±5g，28只，由浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心屏障環(huán)境，自由飲食飲水。

1.2 藥品與試藥：桑抹茶由杭州沃亞生物科技有限公司供應(yīng)，臨用前取適量的桑抹茶，用純水配置成60 mg/ml的混懸液，即得。陽(yáng)性對(duì)照：依折麥布［MSD Pharma(Singapore)Pte.Ltd.］，臨用前用蒸餾水配制成濃度為1mg/ml的混懸液。從寧波美康生物科技有限公司購(gòu)置TC、TG、HDL-C、LDL-C四類(lèi)試劑盒。從特洛菲飼料科技有限公司購(gòu)置高脂高糖飼料。

1.3 儀器：ACCUTE TBA-40FR全自動(dòng)生化分析儀（東芝三廠醫(yī)療株式會(huì)社）；Power wave 340酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-TEK儀器有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組與給藥：將地鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后，稱(chēng)定體質(zhì)量，隨機(jī)分為正常對(duì)照組和造模組，除正常對(duì)照組地鼠外，其余地鼠均給予高脂飼料，2周后禁食12h后眼眶靜脈叢采血，根據(jù)測(cè)定的血清中TC水平隨機(jī)分為4組：正常組、模型組、桑抹茶組(600mg/kg)、陽(yáng)性藥組（依折麥布1.0mg/kg），每組7只。除正常組外，其他地鼠皆提供高脂高糖飼料，持續(xù)5周，自由采食飲水。自造模第l天起，除正常組和模型組灌服蒸餾水外，相應(yīng)劑量的藥物分別灌胃提供給剩余兩組，灌胃容積為1ml/100g體質(zhì)量，每日1次，持續(xù)4周。

2.2 血液生化學(xué)指標(biāo)檢測(cè)：給藥2、4周，眼眶采血，將所得血清進(jìn)行離心，分離，由全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)金黃地鼠血清血脂生化指標(biāo)（TC、TG、LDL-C、HDL-C）。

2.3 血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè)：末次給藥后2h，腹腔注射水合氯醛麻醉地鼠，腹主動(dòng)脈采血，肝素抗凝，全自動(dòng)血液流變儀檢測(cè)金黃地鼠血漿粘度等血液流變學(xué)指標(biāo)。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：計(jì)量資料數(shù)據(jù)以±s表示，正常對(duì)照和模型對(duì)照兩組間比較采用t檢驗(yàn)，模型組及各給藥組間比較采用單因素方差分析多重比較，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對(duì)高脂血癥模型地鼠血脂水平的影響：表1、表2結(jié)果示，與正常組比較，給予高脂飼料2周，模型組金黃地鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均顯著升高（P＜0.05，P＜0.01）；與模型組比較，桑抹茶組金黃地鼠血清TC、LDL-C、HDL-C水平顯著下降（P＜0.01，P＜0.05）。造模第4周，模型組金黃地鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平仍顯著高于正常組（P＜0.01），但與第2周比，TC水平有下降趨勢(shì)，TG、LDL-C有增加趨勢(shì)；與模型組比較，桑抹茶能使高脂血癥地鼠血清TG、LDL-C水平顯著下降。

表1 桑抹茶干預(yù)2周對(duì)HLP模型地鼠血脂水平影響（±s）

表1 桑抹茶干預(yù)2周對(duì)HLP模型地鼠血脂水平影響（±s）

注：與正常組比較，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

分組正常組模型組陽(yáng)性藥組桑抹茶組劑量（g/kg）- -0.001 0.6 TC（mmol/L）3.74±0.26 6.99±0.60ΔΔ 2.99±0.32**5.74±0.61**TG（mmol/L）1.56±0.53 2.83±1.19Δ 1.42±0.22*2.20±0.61 LDL-C（mmol/L）0.85±0.07 1.72±0.30ΔΔ 0.54±0.08**1.40±0.25*HDL-C（mmol/L）1.36±0.11 2.01±0.09ΔΔ 1.26±0.14**1.77±0.20**

表2 桑抹茶干預(yù)4周對(duì)HLP模型地鼠血脂水平影響（±s）

表2 桑抹茶干預(yù)4周對(duì)HLP模型地鼠血脂水平影響（±s）

注：與正常組比較，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；與模型組比較，**P＜0.01。

分組正常組模型組陽(yáng)性藥組桑抹茶組劑量（g/kg）- -0.001 0.6 TC（mmol/L）4.03±1.33 6.82±0.77ΔΔ 2.84±0.24**6.70±0.61 TG（mmol/L）1.05±0.25 2.67±1.45Δ 1.06±0.19*1.82±0.48**LDL-C（mmol/L）0.88±0.10 1.93±0.75ΔΔ 0.55±0.07**1.47±0.24**HDL-C（mmol/L）2.38±0.42 3.51±1.64ΔΔ 2.33±0.23 4.57±0.52**

3.2 對(duì)血液流變學(xué)的影響：表3、表4結(jié)果顯示，至造模周期末，與正常組比較，模型組金黃地鼠全血粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)和電泳指數(shù)顯著增加（P＜0.01，P＜0.05），提示此時(shí)模型地鼠存在血液高粘狀態(tài)；與模型組比較，桑抹茶組上述血液流變學(xué)指標(biāo)顯著降低（P＜0.01，P＜0.05）。

表3 桑抹茶對(duì)高脂血癥金黃地鼠全血粘度及血漿粘度的作用（±s）

表3 桑抹茶對(duì)高脂血癥金黃地鼠全血粘度及血漿粘度的作用（±s）

注：與正常組比較，ΔΔP＜0.01；與模型組比較，**P＜0.01。

分組正常組模型組陽(yáng)性藥組桑抹茶組劑量（g/kg）- -0.001 0.6粘度200 7.63±0.86 8.83±0.96ΔΔ 7.41±0.43**6.55±0.44**粘度30 8.73±0.92 9.96±1.00ΔΔ 8.50±0.43**7.60±0.49**粘度3 16.02±1.27 17.52±1.27ΔΔ 15.71±0.48**14.65±0.81**血漿粘度1.69±0.14 1.65±0.13 1.59±0.15 1.73±0.17

表4 桑抹茶對(duì)高脂血癥金黃地鼠血液流變學(xué)其他指標(biāo)的作用（±s）

表4 桑抹茶對(duì)高脂血癥金黃地鼠血液流變學(xué)其他指標(biāo)的作用（±s）

注：與正常組比較，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

分組正常組模型組陽(yáng)性藥組桑抹茶組劑量（g/kg）- -0.001 0.6高切還原粘度11.99±1.96 14.56±2.75Δ 12.38±0.94*10.99±2.22*中切還原粘度13.98±2.14 16.67±2.97Δ 14.48±1.01*13.08±2.69**低切還原粘度27.15±3.37 30.68±4.54Δ 28.41±1.65 27.14±6.06紅細(xì)胞聚集指數(shù)9.55±1.25 11.46±1.65ΔΔ 9.94±1.06*8.39±1.38**紅細(xì)胞電泳指數(shù)28.62±3.24 32.48±3.92Δ 27.80±1.61**24.58±1.66**

4 討論

脂質(zhì)結(jié)構(gòu)失衡是誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）形成及惡化的關(guān)鍵因素。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，HLP能造成內(nèi)皮細(xì)胞功能性損傷并出現(xiàn)灶狀脫落，增加動(dòng)脈血管壁的通透性，促使脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)至內(nèi)膜于局部異常堆積。其中過(guò)量的LDL-C不僅在動(dòng)脈血管內(nèi)膜堆積其運(yùn)載的膽固醇，還能與蛋白多糖結(jié)合后刺激纖維結(jié)締組織增生，誘導(dǎo)粥樣斑塊的發(fā)生。而脂蛋白中的HDL-C可將膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟進(jìn)行分解，抑制細(xì)胞對(duì)LDL-C的攝取。臨床研究發(fā)現(xiàn)，高血壓患者TC水平與動(dòng)態(tài)AS指數(shù)呈正相關(guān)。近年來(lái)大量臨床研究證明血清TG水平的提高是AS性疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且與ASCVD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈顯著性正相關(guān)。根據(jù)表1～2研究結(jié)果顯示，與模型組相比，桑抹茶能降低HLP地鼠血清中TC、TG、LDL-C水平，提高HDL-C水平，提示桑抹茶可通過(guò)改善脂質(zhì)的異常代謝防治AS。前期研究結(jié)果顯示[1]，桑抹茶能增加肝X受體α(LXRα）、血管過(guò)氧化物酶體增殖物激活型受體γ(PPARγ)表達(dá)量以及血清一氧化氮（NO）水平，改善血管內(nèi)膜損傷，促進(jìn)膽固醇流出，減少脂質(zhì)在血管內(nèi)壁的富集，明顯減緩AS病理的發(fā)展，與本實(shí)驗(yàn)研究成果相一致。

研究表明，高脂血癥患者的紅細(xì)胞聚集指數(shù)、全血低切比粘度等指標(biāo)多數(shù)存在顯著異常。常寧[2]通過(guò)超聲診斷得到紅細(xì)胞聚集征患者的纖維蛋白源（Fbg）、D-二聚體（D-D）指標(biāo)皆顯著超過(guò)正常組（P＜0.01），證明紅細(xì)胞聚集征是血栓發(fā)生前的病理狀況之一。血液流變學(xué)異常可能通過(guò)減少腦血流量，產(chǎn)生低灌注，誘導(dǎo)腦缺血及血栓的發(fā)生。表3、表4研究結(jié)果顯示，與模型組比較，桑抹茶能夠改善HLP地鼠的血液流變性，表現(xiàn)在以下兩點(diǎn)：①與模型組相比，全血粘度顯著降低（P＜0.01或P＜0.05），表明桑抹茶能夠降低HLP地鼠的血流阻力，提高血流速度；②與模型組相比，紅細(xì)胞電泳指數(shù)及紅細(xì)胞聚集指數(shù)顯著降低（P＜0.01），表明桑抹茶具有對(duì)抗紅細(xì)胞及血小板的聚集，提高血液流動(dòng)性，促使血液粘度下降，具有減少血栓形成的作用。

綜上所述，桑抹茶可通過(guò)降低TG、LDL-C、TC等脂質(zhì)水平及血液粘度，抑制紅細(xì)胞及血小板的聚集，改善血管內(nèi)皮功能，減少血栓形成，對(duì)抗AS有潛在的防治作用。