劉路路 張麗娜 章凡

摘要：中藥復(fù)方蒲地藍(lán)是由蒲公英、板藍(lán)根、苦地丁和黃芩四味中藥配伍組成，具有清熱解毒、消腫利咽的功效，在臨床上應(yīng)用廣泛，是治療呼吸類(lèi)疾病、消化類(lèi)疾病的良方.本文通過(guò)查閱整理蒲地藍(lán)質(zhì)量研究相關(guān)研究從薄層鑒別、化學(xué)成分、蒲地藍(lán)片劑、膠囊、口服液質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究對(duì)其質(zhì)量控制研究做一綜述，為蒲地藍(lán)進(jìn)一步的研究利用提供理論依據(jù).

關(guān)鍵詞：中藥復(fù)方；蒲地藍(lán)；質(zhì)量控制；研究進(jìn)展

中圖分類(lèi)號(hào)：R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-260X（2019）03-0104-03

蒲地藍(lán)由四味中藥蒲公英、板藍(lán)根、苦地丁和黃芩組成，具有清熱解毒、消炎抗炎等作用[1]，臨床上可用于咽炎、腮腺炎、扁桃體炎等疾病的治療.市場(chǎng)上復(fù)方蒲地藍(lán)有片劑、口服液、膠囊，提取方法多采用超聲提取、加熱回流等.中藥復(fù)方蒲地藍(lán)藥效物質(zhì)基礎(chǔ)復(fù)雜，近年來(lái)，對(duì)蒲地藍(lán)的含量測(cè)定成分以包括黃芩苷、腺苷、表告依春、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、芹菜素、黃芩素和漢黃芩素等.目前各研究者多采用HPLC對(duì)蒲地藍(lán)各制劑進(jìn)行質(zhì)量研究，也有采用UPLC、RP-HPLC、UPLC-MS-MS.本文即對(duì)近年來(lái)對(duì)蒲地藍(lán)質(zhì)量控制的研究做一綜述，為蒲地藍(lán)資源開(kāi)發(fā)利用提供參考.

1 復(fù)方蒲地藍(lán)的薄層鑒別

楊秀峰等[2]采用薄層色譜法（TLC）對(duì)蒲地藍(lán)消炎片中黃芩、蒲公英和板藍(lán)根進(jìn)行定性鑒別，黃芩TLC鑒別取黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素為對(duì)照品，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（10：3：1：2）為展開(kāi)劑，在紫外燈365nm處檢測(cè)，供試品溶液和對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置顯現(xiàn)顏色相同的斑點(diǎn)；蒲公英TLC鑒定取咖啡酸為對(duì)照品，以乙酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）為展開(kāi)劑，在紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)相同顏色的熒光斑點(diǎn)；板藍(lán)根TLC鑒定取精氨酸為對(duì)照品，以正丁醇-冰醋酸-水（10：5：5）為展開(kāi)劑，噴以茚三酮試液，日光燈下檢視.蔣磊等[3]采用薄層色譜法鑒定蒲地藍(lán)口服液，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（9：1：0.5）為展開(kāi)劑，365nm紫外燈下檢視，薄層色譜中供試品在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn).

2 復(fù)方蒲地藍(lán)的主要化學(xué)成分

化學(xué)成分是復(fù)方蒲地藍(lán)發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)復(fù)方化學(xué)成分的研究具有重要的應(yīng)用價(jià)值.蒲地藍(lán)全方的化學(xué)成分未見(jiàn)有報(bào)道，僅有各單味藥的化學(xué)成分報(bào)道：如蒲公英主要含有萜類(lèi)、黃酮類(lèi)、香豆精類(lèi)、多糖類(lèi)、植物甾醇類(lèi)、色素類(lèi)、揮發(fā)油、乙酰酯類(lèi)等[4]；板藍(lán)根主要含有有機(jī)酸類(lèi)、生物堿類(lèi)、苷類(lèi)、微量元素等[5]；苦地丁主要含有生物堿、酚酸類(lèi)、揮發(fā)油、黃酮類(lèi)、蛋白質(zhì)等[6]；黃芩主要含有黃酮類(lèi)、芬酸類(lèi)、氨基酸、微量元素等[7].

3 復(fù)方蒲地藍(lán)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究

中藥復(fù)方是中醫(yī)防病治病的主要手段，對(duì)中藥復(fù)方制劑質(zhì)量的控制具有重要意義[8].為了保證復(fù)方制劑的安全性與有效性，現(xiàn)代化的研究方法越來(lái)越多地被運(yùn)用到中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定上[9].目前各研究者多采用HPLC對(duì)蒲地藍(lán)各制劑進(jìn)行質(zhì)量研究，也有采用UPLC、RP-HPLC、UPLC-MS-MS.

3.1 蒲地藍(lán)片劑質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究

劉德勝等[10]建立了HPLC法同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎片、膠囊和口服液三種制劑中綠原酸和咖啡酸的含量；采用75%甲醇作為提取溶劑，超聲提??；其中綠原酸檢測(cè)濃度在14.7～3750.0ng/mL，咖啡酸在68.4～4376.0ng/mL.覃華亮等[11]采用Diamonsil C18色譜柱，測(cè)定了蒲地藍(lán)消炎片中紫堇靈的含量，得出紫堇靈進(jìn)樣量在0.1415～0.3773μg與峰面積呈良好的線(xiàn)性關(guān)系.王葳等[12]利用HPLC對(duì)蒲地藍(lán)消炎片中黃芩苷含量進(jìn)行測(cè)定，得出黃芩苷線(xiàn)性范圍為0.422～16.88μg.胡冰[13]以C18色譜柱，甲醇：水=10：90，檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm，HPLC測(cè)定蒲地藍(lán)消炎片中腺苷的含量，得出腺苷對(duì)照品在0.0128～0.128mg/mL線(xiàn)性關(guān)系良好.邵禮梅[14]等建立HPLC同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎片中黃芩苷和黃芩素，以甲醇-0.1%磷酸流動(dòng)相采用梯度洗脫，得出黃芩苷和黃芩素分別在0.02839～0.62458μg、0.01061～0.23342μg范圍內(nèi)與相應(yīng)峰面積具有良好線(xiàn)性關(guān)系.李凱等[15]對(duì)蒲地藍(lán)消炎片的研究采用TLC測(cè)定蒲公英、苦地丁，同時(shí)采用HPLC測(cè)定黃芩苷的含量，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，黃芩苷在4.02～32.16μg呈現(xiàn)線(xiàn)性關(guān)系良好.米建萍等[16]建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎片中腺苷、表告依春、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、芹菜素、黃芩素和漢黃芩素十種成分含量，該實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便快速，適用于蒲地藍(lán)消炎片的質(zhì)量控制.

3.2 蒲地藍(lán)口服液質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究

代磊[17]使用ODS-C18柱，以甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液（8：7：85），檢測(cè)波長(zhǎng)為323nm，采用HPLC測(cè)定蒲地藍(lán)消炎口服液中咖啡酸的含量，得出該方法準(zhǔn)確可靠適合于鋪地藍(lán)口服液的質(zhì)量控制.董自波等[18]建立了HPLC同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎口服液中黃芩苷、漢黃芩苷、綠原酸、咖啡酸、菊苣酸、紫堇靈和腺苷7中化學(xué)成分的含量，7個(gè)被測(cè)成分在各自的測(cè)量范圍內(nèi)有著良好的線(xiàn)性關(guān)系，該方法適合蒲地藍(lán)消炎口服液的質(zhì)量控制.朱粉霞等[19]建立UPLC同時(shí)測(cè)定鋪地藍(lán)口服液中腺苷、表告依春、咖啡酸、黃芩苷、漢黃芩苷、千層紙素A苷、黃芩素和漢黃芩素的含量八種成分的含量，各成分加樣回收率在100.67%～106.92%且八種成分均能分離.儲(chǔ)繼紅等[20]建立UPLC-MS-MS法同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎口服液中腺苷、胞苷和鳥(niǎo)苷的含量，腺苷和胞苷在15～150ng/mL范圍內(nèi)、鳥(niǎo)苷在20～200ng/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，該方法為完善蒲地黃消炎口服液的質(zhì)量控制了重要的提供依據(jù).吳婷等[21]以高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定蒲地藍(lán)消炎口服液中野黃芩苷、黃芩苷、綠原酸、漢黃芩素、黃芩素和咖啡酸六種成分，采用質(zhì)譜采用電噴霧離子源及多反應(yīng)監(jiān)測(cè)方式進(jìn)行負(fù)離子掃描，6種成分在測(cè)定范圍濃度內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好.張學(xué)東等[22]采用反相液相色譜法同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎口服液中綠原酸和咖啡酸的含量，綠原酸與咖啡酸的質(zhì)量濃度為4.0g/mL～19.0g/mL時(shí)，與峰面積的線(xiàn)性關(guān)系良好.

3.3 蒲地藍(lán)膠囊質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究

張曉風(fēng)[23]采用HPLC測(cè)定蒲地藍(lán)膠囊中黃芩苷的含量，5批次蒲地藍(lán)膠囊內(nèi)容物甲醇超聲提取，以甲醇-水-磷酸（40：60：0.2）流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm進(jìn)行檢測(cè)，得出以黃芩苷作為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)較為穩(wěn)定.吳襲[24]建立HPLC法測(cè)定其綠原酸和咖啡酸的含量，采用50%甲醇超聲20min提取蒲地藍(lán)消炎膠囊，以甲醇-0.2%磷酸為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)323nm，流1.0mL/min，結(jié)果相關(guān)系數(shù)r=0.99999，回收率高達(dá)98.7%，RSD大于0.36%，得出該方法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好.胡世強(qiáng)等[25]建立了高分離度快速液相色譜法同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎膠囊中綠原酸、野黃芩苷、黃芩苷和黃芩素四中成分的檢測(cè)方法，得出綠原酸、野黃芩苷、黃芩苷和黃芩素分別在0.004330～0.4330μg、0.01740～1.740μg、0.005860～ 0.5860μg及0.006700～0.6700μg范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好.

4 其他

韋娟[26]使用自身對(duì)照法對(duì)三個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)家的蒲地藍(lán)消炎片的溶出度進(jìn)行測(cè)定，得出三個(gè)廠(chǎng)家的蒲地藍(lán)消炎片溶出度存在差異，本研究建議將溶出度檢查加入蒲地藍(lán)消炎片的檢查項(xiàng)目.劉華等[27]采用培養(yǎng)基稀釋法和離心薄膜法檢查蒲地藍(lán)顆粒樣品中微生物限度，選用了大腸埃希菌、金色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉菌且四種菌的回收率達(dá)到70%以上.李桂水等[28]采用絮凝和超濾耦合聯(lián)用，以咖啡酸和黃芩苷的保留率、蛋白質(zhì)去除率以及水提液的澄清度為指標(biāo)，對(duì)蒲地藍(lán)中藥水提液除雜工藝優(yōu)選，確定了該研究絮凝處理后的最佳超濾參數(shù)，比單一的絮凝工藝除雜率更高，但是黃芩苷的保留率卻降低了.程麗君等[29]采用天然高分子絮凝劑殼聚糖對(duì)蒲地藍(lán)水提液進(jìn)行絮凝處理，以咖啡酸保留率、蛋白質(zhì)去除率和濁度為指標(biāo)，對(duì)絮凝劑用量、溫度和攪拌速度進(jìn)行考察，結(jié)果表明殼聚糖量為1g/L、溫度為40℃、攪拌速度為550r/min時(shí)，絮凝效果最好.邢玉娟等[30]對(duì)蒲地藍(lán)消炎顆粒的抗菌、解熱、抗炎作用進(jìn)行了體內(nèi)和體外研究.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過(guò)試管二倍稀釋法測(cè)定最低抑菌濃度和最低殺菌濃度，體外實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)因金黃色葡萄球菌引起小鼠死亡的保護(hù)作用，以評(píng)價(jià)其體內(nèi)外抑菌作用；通過(guò)二甲苯導(dǎo)致小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其抗炎療效；通過(guò)對(duì)2，4-二硝基苯酚致大鼠體溫升高的影響，評(píng)價(jià)蒲地藍(lán)消炎顆粒的解熱療效.結(jié)果表明蒲地藍(lán)消炎顆粒具有抗菌、解熱、抗炎作用.

5 小結(jié)與展望

復(fù)方蒲地藍(lán)目前藥用劑型有片劑、口服液、膠囊和顆粒，質(zhì)量研究多采用HPLC，也有采用UPLC、RP-HPLC、UPLC-MS-MS，對(duì)蒲地藍(lán)的含量測(cè)定成分以包括黃芩苷、腺苷、表告依春、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、芹菜素、黃芩素和漢黃芩素等.復(fù)方蒲地藍(lán)具有抗炎、抗菌、解熱作用，臨床應(yīng)用廣泛.本文通過(guò)查閱整理蒲地藍(lán)質(zhì)量研究相關(guān)研究從薄層鑒別、化學(xué)成分、蒲地藍(lán)片劑、膠囊、口服液質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究對(duì)其質(zhì)量控制研究做一綜述，為蒲地藍(lán)進(jìn)一步的研究利用提供理論依據(jù).

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