張文靜 孫亞克

摘要 目的：探討消渴痹通膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法：將RSC96雪旺細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)，采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)RSC96細(xì)胞的特異性蛋白S-100的表達(dá)情況，進(jìn)行雪旺細(xì)胞鑒定;以高糖誘導(dǎo)造成RSC96雪旺細(xì)胞損傷，梯度高糖濃度比較，確定后續(xù)研究所采用的高糖濃度;通過(guò)MTT法檢測(cè)消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞的保護(hù)作用，采用免疫組織化學(xué)檢測(cè)NGF蛋白水平和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P-AKT/AKT通路及caspase-3的蛋白水平。結(jié)果：1）RSC96雪旺細(xì)胞存活率隨著消渴痹痛膠囊藥物濃度的升高而增加（P<0.05）。2）NGF蛋白表達(dá)量隨著消渴痹痛膠囊藥物濃度增加（P<0.05）。3）p-AKT/t-AKT和caspase-3蛋白表達(dá)下調(diào)，且隨著消渴痹痛膠囊藥物濃度增加而減少（P<0.05）。結(jié)論：消渴痹痛膠囊可能通過(guò)抑制PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活，從而下調(diào)caspase-3蛋白的表達(dá)水平，抑制雪旺細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，同時(shí)又上調(diào)NGF的表達(dá)水平，為周?chē)窠?jīng)的髓鞘細(xì)胞提供神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞起到保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞 消渴痹通膠囊;高糖;RSC96雪旺細(xì)胞;損傷;保護(hù)作用;機(jī)制;NGF;AKT

Protective Effects of Xiaoke Bitong Capsules on High Glucose-Induced Injury of RSC96 Schwann Cells and Its Mechanism

Zhang Wenjing，Sun Yake

Abstract Objective：To investigate the protective effects of Xiaoke Bitong Capsules on RSC96 Schwann cell injury induced by high glucose and its mechanism.Methods：RSC96 Schwann cells were resuscitated and cultured.The expression of specific protein S100 in RSC96 cells was detected by immunocytochemistry and identified by Schwann cells.The damage of RSC96 Schwann cells induced by high glucose was compared with the gradient high glucose concentration，and the high glucose concentration used in the follow-up study was determined.The protective effects of Xiaoke Bitong Capsule on RSC96 Schwann cells induced by high glucose was detected by MTT method.The level of NGF protein was detected by immunohistochemistry and the protein level of P-AKT/AKT pathway and caspase-3 was detected by Western blot.Results：1）The survival rate of RSC96 Schwann cells increased with the increase of Xiaoke Bitong Capsules concentration.2）The expression of NGF protein increased with the concentration of Xiaoke Bitong Capsules.3）The expression of p-AKT/t-AKT and caspase-3 protein was down-regulated and decreased with the increase of the concentration of Xiaoke Bitong Capsules（P<0.05）.Conclusion：Xiaoke Bitong Capsules may down-regulate the expression of caspase-3 protein，inhibit the apoptosis of Schwann cells and up-regulate the expression of NGF by inhibiting the activation of PI3K/AKT signal transduction pathway.The myelin sheath cells of peripheral nerves are provided with neuronutrients，which can protect RSC96 Schwann cells induced by high glucose.

Key Words Xiaoke Bitong Capsules; High glucose; RSC96 Schwann cell; Injury; Protective effects; Mechanism; NGF; AKT

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.11.013

糖尿病是臨床上常見(jiàn)的慢性疾病之一，其發(fā)生不同程度的糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的概率達(dá)60%以上[1]，患者出現(xiàn)以遠(yuǎn)端對(duì)稱(chēng)性感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)性多發(fā)性神經(jīng)病變等臨床癥狀[2]，主要由神經(jīng)元的損傷和血管病變等病理因素所致[3]。然而復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制使得糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的治療相當(dāng)棘手，盡管控制血糖可以緩解糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的臨床癥狀，但是卻不能遏制該疾病的進(jìn)一步發(fā)展。本團(tuán)隊(duì)在臨床上除控制患者血糖外，采用院內(nèi)制劑消渴痹痛膠囊治療患者，經(jīng)益氣活血，化瘀通絡(luò)進(jìn)一步延緩糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的進(jìn)展[4]。目前關(guān)于消渴痹痛膠囊對(duì)糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的機(jī)制研究報(bào)道較少，基于雪旺細(xì)胞是周?chē)窠?jīng)的髓鞘細(xì)胞[5]，對(duì)周?chē)窠?jīng)損傷的修復(fù)和再生具有重要的作用[6]，因此本研究采用高糖誘導(dǎo)RSC96雪旺細(xì)胞模擬糖尿病周?chē)窠?jīng)病變，并以消渴痹痛膠囊進(jìn)行干預(yù)探究其保護(hù)作用及機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞株 所用的RSC96雪旺細(xì)胞購(gòu)買(mǎi)于ATCC細(xì)胞庫(kù)（批號(hào)：CRL-2765）。RSC96雪旺細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)：從液氮罐中快速取出RSC96細(xì)胞，37 ℃水浴快速解凍約1 min，將細(xì)胞懸浮液（1 mL）吸入15 mL離心管內(nèi)并加入1 mL DMEM完全培養(yǎng)基，混勻后1 000 r/min離心5 min，棄上清液，加入5 mL含10%FBS、1%雙抗、5 mmol/L葡萄糖的完全DMEM培養(yǎng)基;置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。顯微鏡下觀察復(fù)蘇的RSC96細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好且鋪滿(mǎn)T25培養(yǎng)瓶的90%時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。1～2 d換液1次，2～4 d傳代。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RSC96細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 藥物 消渴痹痛膠囊（黃芪30 g、桑枝10 g、威靈仙10 g、牛膝10 g、雞血藤15 g、豨薟草15 g、全蝎3 g等）為本院院內(nèi)制劑，取1.5 mL EP管，每個(gè)EP管分裝消渴痹痛膠囊內(nèi)容物50 mg，-20 ℃冰箱保存待用。

1.1.3 試劑與儀器

1.1.3.1 試劑 1640培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)于Hyclone公司;胎牛血清（FBS）購(gòu)買(mǎi)于Gibco公司;MTT檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)于美國(guó)Amresco公司;二甲基亞砜（DMSO）和多聚左旋賴(lài)氨酸購(gòu)買(mǎi)于Sigma公司;Anti-rabbit IgG、HRP-linked Antibody購(gòu)買(mǎi)于CST公司;Anti-mouse IgG、HRP-linked Antibody購(gòu)買(mǎi)于CST公司，兔抗鼠NGF抗體購(gòu)買(mǎi)于Eptomics公司;鼠抗GAPDH抗體、Caspase-3 Antibody、p-Akt1/2/3 Antibody（Ser473）-R和Akt1/2/3Antibody（H-136）購(gòu)買(mǎi)于Santa公司;免疫組化試劑盒購(gòu)買(mǎi)于碧云天生物技術(shù)公司。

1.1.3.2 儀器 CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱（日本SANYO公司，型號(hào)：MCO-170AICUVL）、96孔板（CORNING公司，型號(hào)：Costar 3897）;熒光顯微鏡購(gòu)買(mǎi)于日本Nikon公司，型號(hào)：E200;全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀購(gòu)買(mǎi)于美國(guó)ThermoFisher公司，型號(hào)：multiskan-go;超聲波細(xì)胞破碎儀購(gòu)買(mǎi)于南京凡帝朗信息科技有限公司，型號(hào)：FDL-1000D;垂直電泳儀和轉(zhuǎn)膜儀購(gòu)買(mǎi)于美國(guó)Bio-Rad公司，型號(hào)：165-8001，170-3940;凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)買(mǎi)于美國(guó)Bio-Rad公司，型號(hào)：Gel-Doc XR+。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 用96孔板接種細(xì)胞，每孔加入200 μL培養(yǎng)液，設(shè)置空白對(duì)照、control對(duì)照組和高糖處理組，于正常培養(yǎng)24 h后，在高糖處理在中用不同濃度（50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L）的高糖對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，在培養(yǎng)24 h后行MTT實(shí)驗(yàn)。測(cè)定并記錄各孔的OD值，計(jì)算細(xì)胞存活率。結(jié)果顯示，隨著高糖濃度的增加，RSC96雪旺細(xì)胞的存活率下降（P<0.05），其中400 mmol/L的存活率約21%，太低，不適宜后續(xù)試驗(yàn)的開(kāi)展，因此高糖濃度確定為200 mmol/L，其細(xì)胞存活率約53%，處于中線(xiàn)水平，即通過(guò)高糖誘導(dǎo)出RSC96雪旺細(xì)胞損傷模型，又適宜后續(xù)試驗(yàn)的開(kāi)展。見(jiàn)表1。

1.2.2 給藥方法

1.2.2.1 對(duì)照組 含糖0 mmol/L、10%FBS、1%雙抗的DMEM培養(yǎng)基、200 μL RSC96雪旺細(xì)胞細(xì)胞懸液。

1.2.2.2 高糖組 含糖200 mmol/L、10%FBS、1%雙抗的DMEM培養(yǎng)基、200 μL RSC96雪旺細(xì)胞細(xì)胞懸液。

1.2.2.3 干預(yù)組 10%FBS、1%雙抗的DMEM培養(yǎng)基、200 μL RSC96雪旺細(xì)胞細(xì)胞懸液，在用高糖處理之前，我們先用不同濃度（0.01 mmol/L、0.1 mmol/L、1 mmol/L）的消渴痹痛膠囊對(duì)RSC96細(xì)胞預(yù)干預(yù)處理3 h，然后再加入200 mmol/L的高糖共培養(yǎng)24 h。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.2.3.1 RSC96雪旺細(xì)胞的鑒定方法 采用免疫細(xì)胞化學(xué)法對(duì)RSC96雪旺細(xì)胞進(jìn)行鑒定，首先取經(jīng)多聚賴(lài)氨酸處理后的六孔板上鋪好玻片，做細(xì)胞爬片，將第4代細(xì)胞接種到六孔板上（5×104），培養(yǎng)24 h后采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)RSC96細(xì)胞的特異性蛋白S-100的表達(dá)情況，進(jìn)行鑒定，試驗(yàn)中設(shè)置陰性對(duì)照組（正常培養(yǎng)的細(xì)胞），每組設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。

1.2.3.2 MTT法檢測(cè)消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞的保護(hù)作用 取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的3～5代細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，按照2×104個(gè)/mL密度的接種，實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、正常對(duì)照組和葛根素干預(yù)組3個(gè)組，空白對(duì)照組中每孔僅加入200 μL的1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基，其余各組中每孔均加入200 μL的細(xì)胞混懸液，各組分別設(shè)置5個(gè)復(fù)孔。于37 ℃、5% CO2條件下培養(yǎng)24 h后，將葛根素干預(yù)組的各孔內(nèi)的培養(yǎng)基吸出，換為含不同濃度葛根素的1640培養(yǎng)基，其中葛根素的濃度設(shè)置為0.01、0.1、1、10、100 mmol/L，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。3 h后，每孔各加入20 μL MTT液（5 mg/mL），繼續(xù)孵育4 h后終止培養(yǎng)。小心吸棄孔內(nèi)上清液，每孔加入150 μL DMSO，室溫下震蕩5～10 min，操作需避光。在酶標(biāo)儀上選擇570 nm波長(zhǎng)，測(cè)定OD值，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)，記錄并分析結(jié)果。

1.2.3.3 免疫組織化學(xué)檢測(cè)NGF蛋白的表達(dá)情況 各組細(xì)胞以磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗5次后，在含有4%福爾馬林中固定約10 min，PBS沖洗后在細(xì)胞上滴加0.3%的H2O2覆蓋蓋玻片，室溫孵育10 min;再以pH值7.4 0.2 mol/L PBS清洗后，滴加BSA于細(xì)胞中，室溫封閉孵育20 min，僅用吸水紙從細(xì)胞邊吸去多余液體，注意不要碰到細(xì)胞以免造成破壞。滴加鼠抗兔NGF一抗（1∶500），4 ℃冰箱中過(guò)夜。第2天將切片拿出后以pH值7.4 0.2 mol/L磷酸鹽緩沖液清洗3次×3 min后，滴加生物素化山羊抗兔IgG并于室溫下孵育30 min。以pH值7.4 0.2 mol/L磷酸鹽緩沖液清洗后滴加試劑SABC，室溫孵育30 min，然后滴加DAB顯色液，室溫下孵育30 min，雙蒸水多次洗滌，經(jīng)上行梯度乙醇脫水;再經(jīng)二甲苯透明;中性樹(shù)膠封片。室溫晾干后，光學(xué)顯微鏡下觀察、攝片。每只大鼠分別隨機(jī)選取10個(gè)切片，分別計(jì)數(shù)每張切片3個(gè)視野的細(xì)胞中NGF陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)數(shù)目，確平均值納入統(tǒng)計(jì)分析。

1.2.3.4 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P-AKT/AKT通路及caspase-3的蛋白表達(dá)情況 收集各組細(xì)胞，充分裂解并用超聲波細(xì)胞破碎儀進(jìn)行破碎處理，放置樣品細(xì)胞間的粘連;隨即在100 ℃恒溫水浴中進(jìn)行蛋白變性，并用BCA法測(cè)定樣品蛋白濃度，-20 ℃保存待用。將標(biāo)記蛋白的masker和各組樣品加樣到已經(jīng)裝好電泳液的電泳膠槽后，進(jìn)行蛋白分離電泳，隨即根據(jù)目標(biāo)蛋白切膠，進(jìn)行轉(zhuǎn)膜電泳，將電泳膠上的目標(biāo)蛋白轉(zhuǎn)到相對(duì)穩(wěn)定不易碎的PVDF膜上，將PVDF膜放入5%脫脂奶粉的封閉液中30 min，TBST洗膜后孵育P-AKT/AKT、caspase-3和GAPDH一抗，4 ℃孵育過(guò)夜TBST洗膜后孵育各指標(biāo)相應(yīng)的二抗，室溫孵育2 h，TBST洗膜后ECL發(fā)光，在凝膠成像系統(tǒng)上查看各組蛋白條帶及其灰度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。首先對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)，若呈正態(tài)性分布且方差齊，則采用單因素方差分析（one-way ANOVA）同時(shí)選擇最小顯著性差異檢驗(yàn)（Least Significant Difference，LSD）進(jìn)行組間和組內(nèi)的統(tǒng)計(jì);若呈正態(tài)性分布且方差不齊，則采用單因素方差分析（one-way ANOVA）同時(shí)選擇非參數(shù)檢驗(yàn)（Tamhane′s T2）進(jìn)行組間和組內(nèi)的統(tǒng)計(jì);若不滿(mǎn)足正態(tài)性和方差齊性，采用多樣本秩和檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RSC96雪旺細(xì)胞的鑒定結(jié)果 正常培養(yǎng)的RSC96細(xì)胞在經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)方法處理后，其結(jié)果顯示，對(duì)照組中的細(xì)胞胞體和軸突呈現(xiàn)棕色，說(shuō)明RSC96雪旺細(xì)胞的特異性抗體S-100表達(dá)為陽(yáng)性;而相應(yīng)的陰性對(duì)照組中細(xì)胞胞體不顯色，細(xì)胞核為藍(lán)色。見(jiàn)圖1。

2.2 消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞的保護(hù)作用 對(duì)照組比較，高糖組和干預(yù)組明顯RSC96雪旺細(xì)胞存活率降低（P<0.05），與高糖組比較，干預(yù)組中RSC96雪旺細(xì)胞存活率增高（P<0.05），且RSC96雪旺細(xì)胞存活率隨著消渴痹痛膠囊藥物濃度的升高而增加（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞中NGF蛋白表達(dá)的影響 對(duì)照組中RSC96雪旺細(xì)胞、軸突上NGF蛋白表達(dá)均呈棕色，即為陽(yáng)性表達(dá)，與之比較，高糖組和干預(yù)組均減少（P<0.05），而與高糖組比較，干預(yù)組中NGF蛋白表達(dá)量增加，且隨著消渴痹痛膠囊藥物濃度增加（P<0.05）。見(jiàn)圖2。

2.4 各組細(xì)胞p-AKT/t-AKT和caspase-3比值的比較 與對(duì)照組比較，高糖組和干預(yù)組中RSC96雪旺細(xì)胞p-AKT/t-AKT和caspase-3比值正高（P<0.05），而與高糖組比較，干預(yù)組中p-AKT/t-AKT和caspase-3蛋白表達(dá)下調(diào)，且隨著消渴痹痛膠囊藥物濃度增加而減少（P<0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

糖尿病周?chē)窠?jīng)病變?cè)谥嗅t(yī)學(xué)中屬于“消渴痹癥”，由于機(jī)體正氣虧虛，內(nèi)外感邪氣在體內(nèi)瘀滯而化熱化燥，傷陰耗液，發(fā)為消渴;消渴病況日久，氣血陰陽(yáng)受損，其病機(jī)虛實(shí)夾雜，多見(jiàn)陰陽(yáng)兩虛，以虛為本而以邪實(shí)為標(biāo)，進(jìn)而痰濁瘀血，阻滯經(jīng)絡(luò)[7];正如葉天士所說(shuō)：“病久氣血推行不利，血絡(luò)之中，必有瘀凝……久存脈道，絡(luò)中氣血阻滯不通，必猝然而痛”。消渴痹癥病久傷絡(luò)，故主張治療時(shí)多將“祛瘀通絡(luò)”貫穿始終，故多以“扶正祛邪通絡(luò)”進(jìn)行治療[8-10]。而消渴痹痛膠囊中以黃芪為君藥，益氣健脾，固本之時(shí)亦能斂瘡生肌;臣以桑枝祛風(fēng)通絡(luò)，雞血藤補(bǔ)血行血，舒經(jīng)活絡(luò);豨薟草和牛膝，同歸肝腎經(jīng)，共奏補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨之功，威靈仙祛風(fēng)除濕，通絡(luò)止痛，同為佐藥;全蝎息風(fēng)止痙，通經(jīng)止痛，引諸藥到肢體末端，為佐使藥[11]。全方補(bǔ)血活血，補(bǔ)益肝腎以治本，化瘀通絡(luò)以治標(biāo)。本研究結(jié)果顯示消渴痹痛膠囊干預(yù)后增加了RSC96雪旺細(xì)胞的存活率，提示消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞的損傷具有保護(hù)作用。

為進(jìn)一步探討其保護(hù)機(jī)制，由于在糖尿病周?chē)窠?jīng)病變病理演變進(jìn)程中，判定糖尿病周?chē)窠?jīng)受損的重要標(biāo)志是神經(jīng)傳導(dǎo)速度的異常，相應(yīng)的周?chē)窠?jīng)再生也存在著缺陷。而在神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族中，神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）是最具活力的能夠營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)的生物活性因子之一，存在于周?chē)窠?jīng)的雪旺氏細(xì)胞及神經(jīng)節(jié)等部位[12]。當(dāng)糖尿病周?chē)陨窠?jīng)病變患者胰島素缺乏或雪旺細(xì)胞受損均能夠減少NGF合成，而NGF通過(guò)逆向軸漿運(yùn)輸障礙進(jìn)一步引起神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)缺乏、神經(jīng)再生障礙[13-14]。有研究顯示[15]，采用不同濃度NGF對(duì)RSC96大鼠雪旺細(xì)胞株進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)NGF對(duì)高糖所引起的雪旺細(xì)胞損傷和生長(zhǎng)抑制有明顯的改善作用。本研究結(jié)果顯示，消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞干預(yù)后可上調(diào)NGF的蛋白表達(dá)，保護(hù)受損雪旺細(xì)胞。有實(shí)驗(yàn)研究顯示[16-18]NGF能夠調(diào)控PI3K/Akt和ERK1/2以及GSK3β等3條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，抑制由高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞內(nèi)ERS的過(guò)度激活，降低雪旺細(xì)胞的細(xì)胞凋亡水平，從而達(dá)到治療糖尿病周?chē)陨窠?jīng)病變的目的。本研究進(jìn)一步探討研究發(fā)現(xiàn)，消渴痹痛膠囊對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞干預(yù)后，降低p-AKT和caspase-3的蛋白表達(dá)水平;提示消渴痹痛膠囊可能通過(guò)抑制PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活，從而下調(diào)caspase-3蛋白的表達(dá)水平，抑制雪旺細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，同時(shí)又上調(diào)NGF的表達(dá)水平，為周?chē)窠?jīng)的髓鞘細(xì)胞提供神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而對(duì)高糖誘導(dǎo)的RSC96雪旺細(xì)胞起到保護(hù)作用。

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（2019-05-31收稿 責(zé)任編輯：王明）

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81070641）作者簡(jiǎn)介：張文靜（1983.01—），女，碩士，主管藥師，研究方向：中醫(yī)藥藥理學(xué)研究，E-mail：zhangwenjing0123@163.com通信作者：孫亞克（1990.04—），女，本科，初級(jí)藥師，研究方向：中醫(yī)藥藥理學(xué)研究，E-mail：984453858@qq.com