王代波 劉國(guó)華 封天洪

摘 ? 要：為進(jìn)一步提升野生多穗柯資源的利用價(jià)值，針對(duì)野生多穗柯活性成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分析，同時(shí)系統(tǒng)對(duì)比了水煎煮法與超聲波輔助提取法（乙醇濃度依次選取10%、30%、50%、70%、90%）的黃酮提取率，希望為多穗柯的推廣應(yīng)用提供一定的參考。

關(guān)鍵詞：野生多穗柯;活性成分;提取物

多穗柯（Lithocarpus polystachyus Rehd）亦稱(chēng)作甜茶，其屬于殼斗科，是一種藥食兩用的植物，在藥、茶及糖等3個(gè)領(lǐng)域都有著廣泛的應(yīng)用[1]。從多穗柯活性成分進(jìn)行分析，黃酮類(lèi)化合物是其主要的活性成分，主要集中在葉部，通過(guò)多年的研究，當(dāng)前從多穗柯葉部分離出的黃酮類(lèi)化合物數(shù)量已經(jīng)達(dá)到20余種。依照有關(guān)文獻(xiàn)資料能夠看出，多穗柯中的黃酮類(lèi)化合物能夠發(fā)揮抑菌、抗過(guò)敏、抗氧化以及降血糖等藥理功能。上述藥理功能當(dāng)中黃酮類(lèi)成分主要包含3-羧基根皮苷、根皮苷、三葉苷。根皮苷、三葉苷的生物活性在諸多領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，包括化妝品、藥物及食品等[2]。為了進(jìn)一步了解多穗柯活性成分，促進(jìn)多穗柯資源的開(kāi)發(fā)，進(jìn)一步研究了野生多穗柯活性成分，現(xiàn)針對(duì)相關(guān)活性成分進(jìn)行如下分析。

1 ? 材料及方法

1.1 ? 材料選取

材料選擇貴州羅甸地區(qū)野生多穗柯，采集多穗柯葉，在進(jìn)行沖洗、通風(fēng)晾干處理之后，將其置入烘箱中烘干處理。選擇粉碎機(jī)完全粉碎多穗柯葉，然后選擇60孔（邊長(zhǎng)0.25 mm）與120孔（邊長(zhǎng)0.125 mm）的檢驗(yàn)篩實(shí)施篩選處理，最終選擇中間位置的樣品。

1.2 ? 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

選擇10 mg蘆丁對(duì)照品（通過(guò)120 ℃減壓干燥處理之后，保持恒質(zhì)量），將其置入50 mL容量瓶當(dāng)中，同時(shí)融入30 mL 85%濃度的乙醇。通過(guò)微熱讓溶液完全溶解，放置到自然冷卻狀態(tài)，融入乙醇稀釋到對(duì)應(yīng)的刻度，搖勻處理之后，制作標(biāo)準(zhǔn)蘆丁對(duì)照品溶液，濃度為0.2 mg/mL。

1.3 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

采用不同質(zhì)量的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（0 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL）融入25 mL容量瓶當(dāng)中，融入1 mL濃度5%的亞硝酸鈉溶液，搖勻之后進(jìn)行6 min的放置，接著融入10 mL濃度1.0 mol/L的NaOH，最終選擇85%的乙醇進(jìn)行稀釋處理，具體需要稀釋到對(duì)應(yīng)刻度，搖勻之后進(jìn)行15 min的放置。選擇第1瓶行空白，選擇在510 m位置進(jìn)行吸光度測(cè)量，具體是以吸光值（y）當(dāng)作縱坐標(biāo)，蘆丁濃度（x）則作為橫坐標(biāo)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，最終方程為“y=0.074 7x-0.000 1，r=0.999 2”。

1.4 ? 樣品黃酮含量測(cè)定

選取5 g多穗柯嫩葉，進(jìn)行干燥之后粉碎處理，融入乙醇溶液之后進(jìn)行24 h的浸泡。采用超聲波實(shí)施提取、過(guò)濾，完成蒸發(fā)之后將乙醇回收，加水定容到100 mL，獲取對(duì)應(yīng)的樣品溶液。選取1 mL樣品溶液，置入25 mL容量瓶當(dāng)中，融入1 mL的5%濃度亞硝酸鈉，搖勻之后進(jìn)行6 min的放置，再融入10 ml濃度1 mol/L的氫氧化鈉，加水定容到100 mL，搖勻之后進(jìn)行15 min的放置。選擇分光光度法在λ=510 nm的位置進(jìn)行吸光度的測(cè)量，然后綜合參考回歸方程進(jìn)行黃酮含量的計(jì)算。

2 ? 結(jié)果

選擇6份5 g的多穗柯嫩葉，進(jìn)行烘干粉碎之后進(jìn)行處理，選擇水煎煮法與超聲波輔助提取法（乙醇濃度依次選取10%、30%、50%、70%、90%），針對(duì)樣品實(shí)施黃酮含量測(cè)定，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

根據(jù)表1可知，選擇超聲波輔助提取法能夠顯著提升多穗柯當(dāng)中黃酮分的提取率。在溶劑極性持續(xù)變小的情況下，黃酮提取率也呈現(xiàn)為不斷增大的趨勢(shì)，而在70%乙醇濃度的情況下，能夠達(dá)到最高的黃酮提取率，90%乙醇濃度情況下的黃酮提取率則呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)，主要原因在于溶劑極性變小，多穗柯當(dāng)中其余物質(zhì)也同時(shí)被分離，導(dǎo)致黃酮提取率有所降低[3]。

3 ? 討論

多穗柯作為現(xiàn)階段廣泛應(yīng)用的一種藥食同源性植物，其具有較高含量的茶多酚、黃酮類(lèi)化合物，但其本身的咖啡堿、還原糖相對(duì)較低，所以其具有理想的藥用價(jià)值、食用價(jià)值[4]。根據(jù)研究?jī)?nèi)容可以看出，多穗柯當(dāng)中黃酮的極性屬于中性極性物質(zhì)，其無(wú)疑為多穗柯總黃酮提取提供了有效的參數(shù)。從研究結(jié)果能夠看出，超聲波輔助提取法的優(yōu)勢(shì)突出，其主要是通過(guò)超聲波機(jī)械作用、空化作用，促進(jìn)植物細(xì)胞組織變形或者破壁，能夠顯著提升總黃酮提取率，70%濃度乙醇是最佳方案。

參考文獻(xiàn)：

[ 1 ] 王坤，黃曉露，李寶財(cái)，等.30個(gè)多穗柯種源主要經(jīng)濟(jì)性狀及活性成分分析與評(píng)價(jià)[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2019，32 （5）：1051-1056.

[ 2 ] 于沙蔚.反相高效液相色譜法測(cè)定福建多穗柯中不同部位根皮苷的含量[J].海峽藥學(xué)，2018，30（7）：59-60.

[ 3 ] 黃曉露，藍(lán)金宣，李寶財(cái)，等.不同光質(zhì)處理對(duì)多穗柯幼苗光合色素及抗氧化酶的影響[J].廣西林業(yè)科學(xué)，2017，46（4）：354-359.

[ 4 ] 王坤，李開(kāi)祥，陳金艷，等.野生多穗柯主要活性成分及其含量變化[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2016，34（4）：96-100，122.

（收稿日期：2019-10-23）