李漓 許光明 趙凡 陳乃宏 周小江

〔摘要〕 目的 為玄參葉的開發(fā)利用和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。方法 按生藥學(xué)常規(guī)方法對玄參葉進行形態(tài)解剖學(xué)研究，其中組織切片采用徒手切片和石蠟切片相結(jié)合的方法，葉表面制片采用撕取表皮的方法，葉表面掃描電鏡觀察采用脫水、干燥、噴金后常規(guī)掃描的方法，組織、葉表面、粉末圖均采用顯微拍攝。結(jié)果 找出了玄參葉的性狀和顯微鑒別特征。結(jié)論 此研究可作為鑒定玄參葉的依據(jù)。

〔關(guān)鍵詞〕 玄參葉;玄參;性狀鑒定;顯微特征

〔中圖分類號〕R282.5? ? ? ?〔文獻標志碼〕A? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2019.02.010

玄參為玄參科植物玄參Scropularia ningpoensis Hemsl.的干燥根， 具有清熱涼血、滋陰降火、解毒散結(jié)的功效，主用于熱入營血、溫毒發(fā)斑、熱病傷陰、舌絳煩渴、津傷便秘、骨蒸勞嗽、目赤、咽痛、白喉、瘰疬、癰腫瘡毒[1]。玄參藥用歷史悠久，始載于漢代的《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品。梁代《本草經(jīng)集注》云：“根甚黑”。宋代《開寶本草》中記載：“莖方大，高四五尺，紫赤色而有細毛，葉如掌大而尖長。根生青白，干即紫黑”。《本草圖經(jīng)》曰：“其根尖長，生青白，干即紫黑。新者潤膩。一根可生五七枚”。明代《本草綱目》中記載：“花有紫白二種”，并釋其名“玄，黑色也”。

玄參主要含環(huán)烯醚萜類、苯丙素類、有機酸類、黃酮類、三萜皂苷類、多糖等成分，具有解熱、抗炎、抗氧化、保肝、抗疲勞、降壓、抗動脈硬化等作用[2-6]。玄參作為大宗中藥材，市場年需求量8 000～10 000噸，而玄參的藥用部位為根，采收后，其地上部分白白丟棄，而玄參葉是其中很重要的一部分。前期我們研究發(fā)現(xiàn)，在玄參葉中含有哈巴苷和哈巴俄苷等有效成分，因此，玄參葉的綜合開發(fā)利用變得非常有價值和意義。

為了開發(fā)利用玄參葉這一白白丟棄的資源，我們特對玄參葉進行形態(tài)解剖學(xué)研究，以期找出其主要鑒別點，為其質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 實驗材料

1.1? 材料

玄參葉藥材分別于2017年10月、12月和2018年7月采自新邵縣常春藤中藥材種植基地，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室周小江教授鑒定為玄參科植物玄參Scropularia ningpoensis Hemsl.的新鮮和干燥葉。

1.2? 儀器與試藥

JSM-6380 LV型掃描電鏡（日本電子株式會社），XS-2000生物顯微鏡（南京江南光電股份公司）;Histo STAT-820型石蠟切片機（美國Reichert公司）?；瘜W(xué)試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1? 方法

按生藥學(xué)常規(guī)方法對玄參葉進行形態(tài)組織學(xué)研究，其中組織切片采用徒手切片和石蠟切片相結(jié)合的方法，葉表面制片采用撕取表皮的方法，組織、葉表面、粉末圖均采用顯微拍攝。

葉表面掃描電鏡觀察：自新鮮玄參葉片上取0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm大小的樣品，置10%的水合氯醛溶液中浸泡30 min，，超聲波處理5 min清洗表面雜質(zhì)，并用水洗去殘留的水合氯醛，處理后的樣品加2%的戊二醛溶液浸泡，并放置4 ℃冰箱中固定4 h，取出，磷酸鹽緩沖液清洗3次，再用1%的鋨酸固定2 h。固定后的樣品用30%乙醇清洗3次后，依次用50%、70%、90%、100%乙醇脫水，每次10 min，其中100%乙醇脫水2次。脫水后的樣品用丙酮、丙酮-乙酸異戊酯（1∶1）、乙酸異戊酯各清洗1次，放入臨界點干燥器樣品室中進行CO2臨界點干燥，粘貼，噴金。并按常規(guī)方法進行掃描、拍照。

2.2? 結(jié)果

2.2.1? 藥材性狀? 本品常皺縮或破碎，完整者展開后呈卵形或卵狀披針形，長18～35 cm，寬7～20 cm。邊緣具細鋸齒，稀為不規(guī)則的細重鋸齒，葉端漸尖，基部楔形、圓形或近心形;上表面棕黃綠色或棕黃色，下面顏色稍淺;葉脈為羽狀網(wǎng)脈，中脈在葉下表面顯著隆起;葉柄長2～4.5 cm。質(zhì)脆，易碎。氣微，味微苦。

2.2.2? 顯微鑒定? 葉橫切面 上、下表皮均為1列細胞，上表皮細胞類長方形，下表皮細胞類方形，壁稍厚。上、下表面均著生有腺毛。柵欄組織僅存在于上表皮下方，為1列長橢圓形細胞，海綿組織為4～5列不規(guī)則的橢圓形細胞，排列疏松。主脈在下方顯著突出。上表皮下方有1～3列厚角組織，下表皮內(nèi)方有3～9列厚角組織;維管束為無限外韌型，半月形，木質(zhì)部較寬，由導(dǎo)管和木薄壁細胞組成，有的形成層不明顯，韌皮部由篩管、伴胞和韌皮薄壁細胞組成。

葉表面觀 上表皮細胞垂周壁較平直，未見氣孔;腺毛多見，腺頭為2個細胞，可見棕黃色分泌物，柄為單細胞。下表皮細胞垂周壁波狀彎曲，氣孔為不等式或不定式，副衛(wèi)細胞3～5個;腺毛多見，有兩種，一種腺毛的腺頭為2個細胞，可見棕黃色分泌物，腺柄為單細胞;另一種腺毛僅在葉脈處可見，腺頭為單細胞，細胞很小，可見棕黃色分泌物，腺柄由1～7個細胞組成，長而略彎曲，有的中間柄細胞溢縮。

葉表面掃描電鏡觀察 葉上表面可見明顯的隆起皺褶和皺紋，腺毛的頭細胞明顯。下表面氣孔多見，橢圓形;腺毛多見，有兩種，一種腺毛的腺頭為2個細胞;另一種腺毛僅在葉脈處可見。

粉末 青綠色或墨綠色。葉下表皮碎塊眾多，細胞垂周壁波狀彎曲，氣孔為不等式或不定式，副衛(wèi)細胞3～5個。腺毛多見，有兩種，一種腺毛的腺頭為2個細胞，可見棕黃色分泌物，腺柄為單細胞;另一種腺毛的腺頭為單細胞，細胞很小，可見棕黃色分泌物，常斷裂，腺柄由1～7個細胞組成，長而略彎曲，有的中間柄細胞溢縮，長100～620 μm，基部直徑20～30 μm。導(dǎo)管眾多，多為網(wǎng)紋或螺紋導(dǎo)管，直徑10～30 μm，長65～310 μm。

3 討論

對葉橫切面進行顯微觀察時，我們發(fā)現(xiàn)韌皮部外側(cè)有3～5列壁稍厚的細胞，懷疑是厚壁組織，但經(jīng)對葉片主脈進行縱切面觀察后，確定為韌皮薄壁細胞;對葉片下表面進行顯微觀察時，對采自新邵縣常春藤中藥材種植基地的玄參葉進行了100多個制片觀察，最終確定頭為單細胞、柄由1～7個細胞組成的腺毛僅在葉脈上著生;對于葉表面，我們不僅進行光學(xué)顯微下觀察，而且進行了掃描電鏡觀察，這樣更清晰地鑒定了葉表皮細胞、氣孔、腺毛等特征;通過本研究，找出了玄參葉的形態(tài)解剖學(xué)鑒別特征，為玄參葉的質(zhì)量控制和開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻

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