董偉昌，孫 進

纈沙坦片的溶出方法學研究

董偉昌，孫 進*

（沈陽藥科大學 無涯學院，遼寧 沈陽 110016）

建立纈沙坦片溶出度的測定方法。以磷酸鹽緩沖液（pH值6.8）1 000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r?min-1，經(jīng)30 min時取樣，采用紫外-可見分光光度法在250 nm處測定吸光度，按外標法計算纈沙坦片的溶出度。通過耐用性、濾膜吸附實驗、線性與范圍、溶液穩(wěn)定性、精密度試驗、重復性試驗、回收率試驗等試驗研究，對纈沙坦片的溶出方法進行驗證。該溶出方法學驗證結(jié)果良好。纈沙坦溶液質(zhì)量濃度在1.61～17.71 mg?L-1內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為=3.17×10-2-0.6×10-3，=0.999 9；方法的回收率、精密度、重復性符合要求，供試溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。本方法能準確測定纈沙坦片的溶出度，控制纈沙坦片的質(zhì)量。

藥劑學；溶出度；漿法；紫外-可見分光光度法；纈沙坦片；驗證

纈沙坦是由瑞士諾華公司開發(fā)的降壓藥，口服藥品包括40、80、160、320 mg 四種規(guī)格，纈沙坦是一種高選擇性Ⅰ型血管緊張素Ⅱ受體（AT1受體）拮抗劑，具有良好的抗高血壓作用，其通過對腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAS）特異性阻斷達到控制血壓的效果，其降血壓療效和耐受性已在多個臨床試驗中得到證明[1-2]。

口服固體制劑的溶出行為的考察是評價藥品質(zhì)量的重要標準[3-4]。在仿制藥研發(fā)中，溶出度試驗為處方及工藝的開發(fā)提供方向，也是預測仿制藥生物等效性的有效手段，還是評價藥品質(zhì)量穩(wěn)定性的重要手段之一[5]。由于纈沙坦在水中溶解度小，溶出是限制其體內(nèi)吸收的主要過程，所以建立溶出度的測定方法，使其準確反映產(chǎn)品質(zhì)量，有利于控制和提高纈沙坦仿制藥質(zhì)量，提升其體內(nèi)生物等效性試驗的成功率。作者主要對160 mg規(guī)格產(chǎn)品進行溶出度的方法學研究，評價產(chǎn)品的質(zhì)量。

1 儀器與材料

UV2300紫外-可見分光光度計（上海天美科學儀器有限公司），RC8MD溶出儀（天大天發(fā)科技有限公司），XSE205電子天平、FE-20 pH計（梅特勒-托利多儀器有限公司）。

纈沙坦片（規(guī)格160 mg，華北制藥股份有限公司，批號XS1405001、XS1405002、ZS1405003)，纈沙坦對照品,（中國藥品生物制品檢定所，批號100651-201203)，纈沙坦參比制劑(規(guī)格160 mg，瑞士諾華制藥有限公司，批號B8292YX)。磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉（分析純，北京化工廠），水為純化水（華北制藥股份有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出度方法的確定

纈沙坦片收載于《中華人民共和國藥典》2015年版二部及《美國藥典》USP39版[6-9]中，兩者規(guī)定的溶出度檢測方法均為以磷酸鹽緩沖液（pH值6.8）1 000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r?min-1，經(jīng)30 min時取樣，照紫外分光光度法在250 nm處測定吸光度，按外標法計算溶出度[8-9]?？梢?，該方法為大家所公認，所以纈沙坦片的溶出度研究仍采用該方法。

2.1.1 溶出介質(zhì)的制備

pH值6.8磷酸鹽緩沖液：取磷酸二氫鉀3.60 g和磷酸氫二鉀三水合物5.37 g，加水適量振搖使溶解，加水稀釋至1 000 mL，搖勻，即得。

2.1.2 對照溶液的制備

取纈沙坦對照品適量，精密稱定，加溶出介質(zhì)溶解并制成每1 mL中約含16 μg的溶液。

2.1.3 供試溶液的制備

取溶出介質(zhì)1 000 mL，置于溶出杯中，共6杯。設(shè)定溫度為37 ℃，開啟儀器。取供試品6片，分別投入6個溶出杯中，轉(zhuǎn)速為50 r?min-1，啟動儀器，計時，經(jīng)30 min取樣，取樣體積為5 mL，立即過濾，精密量取澄清濾液適量，用溶出介質(zhì)稀釋制成每1 mL約含纈沙坦16 μg的溶液，即得。

2.1.4 測定方法

照紫外-可見分光光度法，在250 nm處測定供試與對照溶液的吸光度，按照外標法以吸光度計算溶出度。

2.1.5 結(jié)果判定

計算每片的溶出量，限度為標示量的80%。

2.2 溶出度的檢測方法研究

2.2.1 線性關(guān)系考察

取纈沙坦對照品約8 mg，置于250 mL量瓶中，用pH值6.8磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照儲備液；精密量取對照品儲備液1、2、4、6、8、10和11 mL，分別置于20 mL量瓶中，加pH值6.8磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液。纈沙坦溶液質(zhì)量濃度在1.61～17.71 mg?L-1內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為=3.17×10-2-0.6×10-3，=0.999 9，軸截距為100%響應值的0.012%，不大于2.0%，響應因子的RSD值為1.8%，不大于2.0%，結(jié)果見表1。

Table 1 The results of linearity and range

2.2.2 精密度試驗

按“2.1.2”條配制1份纈沙坦對照溶液，連續(xù)測定6次，吸光度的相對標準偏差為0.11%，說明精密度良好，結(jié)果見表2。

Table 2 The results of precision

2.2.3 濾膜吸附試驗

取溶出液適量，分別采用過濾和離心的方式進行處理后測定吸光度，計算溶出度。取溶出液適量，采用轉(zhuǎn)速為4 000 r?min離心5 min，取上清液用溶出介質(zhì)稀釋成每1 mL約含纈沙坦16 μg的溶液，作為高速離心法制備溶液。另取溶出液適量，經(jīng)0.45 μm濾膜濾過，取續(xù)濾液適量，用溶出介質(zhì)稀釋成每1 mL約含纈沙坦16 μg的溶液作為濾膜過濾液，照紫外-可見分光光度法，在250 nm處測定供試溶液與對照溶液的吸光度。過濾法和高速離心法結(jié)果基本一致，說明濾膜對本品無吸附，結(jié)果見表3。

Table 3 Test results of membrane adsorption

2.2.4 回收率試驗

配制限度濃度（16 mg?L-1）的50%、80%和110%的供試溶液各3份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。稱取混合空白輔料16 mg，共9份，分別置于1 000 mL量瓶中，分成3組，每組3份，稱取纈沙坦對照品約8.0、12.8和17.6 mg各3份，精密稱定，分別置上述1 000 mL量瓶中，加pH值6.8磷酸鹽緩沖液溶解，過濾。照紫外-可見分光光度法，在250 nm處測定吸光度。本品平均回收率為99.6%，結(jié)果在98.0%～102.0%之間，9個回收率數(shù)據(jù)的相對標準差（RSD）為0.6，小于2.0%，說明本法回收率良好，準確度高，結(jié)果見表4。

Table 4 The recovery of dissolution test

2.2.5 穩(wěn)定性試驗

取供試品適量，以pH值6.8磷酸鹽緩沖液1 000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r?min-1，依法操作，經(jīng)30 min時，取溶液適量，濾過，濾液于室溫條件下放置，于0、1、2、4、6、10和12 h精密量取濾液適量，用溶出介質(zhì)稀釋制成每1 mL含16 μg的溶液后取樣測定。照紫外-可見分光光度法，在250 nm處測定吸光度。結(jié)果供試溶液室溫放置的吸光度的RSD值為0.22%，不大于2.0%。說明此溶液在室溫條件下12 h內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果見表5。

Table 5 The results of solution stability test

2.2.6 重復性試驗

取樣品6片，按照“2.1”條中的溶出度方法測定，每杯樣品分別取樣6次，分別過濾測定，各片樣品溶出度6次測定結(jié)果的相對標準偏差均不大于2.0%，說明方法重復性良好，結(jié)果見表6。

Table 6 The results of repeatability

2.2.7 中間精密度試驗

由不同分析人員，不同時間使用不同的儀器對同一批樣品進行測試，樣品溶出度平均結(jié)果的偏差不大于5.0%，說明方法中間精密度良好，結(jié)果見表7。

Table 7 Theresults of intermediate precision

2.2.8 耐用性試驗

2.2.8.1 溶出條件的耐受性試驗

考察溶出介質(zhì)體積的變化約±5%，溶出溫度變化±0.5 ℃、轉(zhuǎn)速相對值變化±5 r?min-1，進行測定時溶出度的變化情況。耐用性各條件項下的溶出數(shù)據(jù)的RSD值為0.42%，小于2.0%，耐用性良好，結(jié)果見表8。

Table 8 Durability test results of dissolution condition

2.2.8.2 檢測波長的耐用性試驗

改變本品的檢測波長（250 ± 2）nm，照紫外-可見分光光度法進行測定，耐用性各條件項下的溶出數(shù)據(jù)的RSD值為0.185%，小于2.0%，耐用性良好，結(jié)果見表9。

Table 9 Durability test results of detection wavelength

2.2.9 溶出均一性試驗

取自制樣品（批號XS1405001）6片，根據(jù)“2.1”條中的溶出度方法，分別在5、10、15、20、30和45 min取樣，測定各樣品的溶出曲線，確定其溶出均一性。樣品在各個時間點的溶出RSD分別為1.8%、1.1%、1.0%、0.94%、0.93%和0.81%，測定結(jié)果見表10。結(jié)果表明，在pH值6.8介質(zhì)中的本品溶出批內(nèi)均一性良好。

Table 10 The uniformity of dissolution test of self-product

2.2.10 溶出重現(xiàn)性試驗

取中試樣品XS1405001、ZS1405002、ZS1405003三批次供試品及上市品B8292YX，每批取6片，于5、10、15、20、30和45 min時吸取溶出液適量，測定溶出量，結(jié)果表明產(chǎn)品溶出重現(xiàn)性良好，與上市品相似。

Table 11 The reproducibility of dissolution test of self-product and listed product

3 結(jié)論

在《中華人民共和國藥典》2015年版二部及《美國藥典》USP39中，纈沙坦片均采用紫外可見分光光度法測定溶出度。作者根據(jù)兩藥典規(guī)定的溶出條件，采用紫外分光光度法建立了纈沙坦片溶出度的體外分析方法，并系統(tǒng)的進行了方法學研究，驗證結(jié)果表明，該方法專屬性、線性、重復性、準確度、耐用性均符合要求，為體外溶出度的檢測提供科學合理的試驗方法。

[1] 林旭升, 蔣海松, 周建平. 沙坦人鼠在體腸吸收動力學[J]. 中國藥科大學學報, 2012, 43(2): 130-136.

[2] FOGARI R, ZOPPI A. A drug safety evaluation of valsartan[J]. Expert Opin Saf, 2011, 10(2): 295-303.

[3] 郁慶華, 謝冉行. 開展仿制藥質(zhì)量一致性評價的探討[J]. 上海醫(yī)藥, 2014, 35(7): 49-53.

[4] 謝沐風, 張啟明, 陳潔, 等. 國外藥政部門采用溶出曲線評價口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)情況簡介[J]. 中國藥事, 2008, 22(3): 257-261.

[5] 張啟明, 謝沐風, 寧保明, 等. 采用多條溶出曲線評價口服固體制劑的內(nèi)在質(zhì)量[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志, 2009, 40(12): 946-955.

[6] 藥審中心. 口服固體制劑溶出度試驗技術(shù)指導原則[S]. 2009.

[7] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典: 二部[M]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2010: 1173.

[8] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典: 二部[M]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2015: 1548-1549.

[9] The United States Pharmacopeial Convention. USP39-NF34[M]. USA: 2015: 6325-6326.

Dissolution curve methodology validation of valsartan tablets

DONG Weichang, SUN Jin*

(,,110016,)

To establish a measuring method of the dissolution curve of valsartan tablets.Dissolution conditions: in the pH 6.8 phosphate buffer solution, with the Slurry method of 50 r?min-1and the dissolution sampling time of 30 min. Through the experimental study of linear and scope, solution stability, precision test, repeatability, recovery test, etc., the dissolution method of valsartan tablets was validated.The results of the dissolution verification methodology were good. There was a good linear relationship when the concentration of valsartan tablets were in the range from 1.61 to 17.71 mg?L-1. Linear equation was:=3.17×10-2–0.6×10-3. The test solution was basically stable in 12 hours.The method can accurately determine the dissolution of valsartan tablets.

pharmaceutics; dissolution; slurry method; ultraviolet-visible spectrophotometry; valsartan tablets; validation

2019-03-25

董偉昌(1984-), 男(漢族), 河北石家莊人, 高級工程師, 主要從事化學仿制藥研究, Tel. 18531115802, E-mail dongwc2007@163.com;

孫進(1975-), 男(漢族), 安徽金寨人, 教授, 博士, 博士生導師, 主要從事藥物新劑型和新技術(shù)研究, Tel. 024-23986325, E-mail sunjin0529@aliyun.com。

R94

A

（2019）05–0178–08

10.14146/j.cnki.cjp.2019.05.004

(本篇責任編輯：趙桂芝)