崔一平 彭埃天 李子力 凌金峰 宋曉兵 郭澤成 陳霞 程保平 殷瑜

摘要 柑橘是我國南方重要的水果之一，柑橘黃龍病和柑橘病毒病已經(jīng)對我國柑橘的安全生產(chǎn)造成了嚴(yán)重威脅。為了解柑橘黃龍病和病毒病對海南柑橘產(chǎn)業(yè)的危害情況，本研究通過熒光定量PCR（Quantitative PCR）和反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）分別對隨機(jī)采集自海南柑橘主產(chǎn)區(qū)澄邁縣3個(gè)福橙種植園和瓊中縣4個(gè)綠橙種植園共計(jì)109個(gè)樣品進(jìn)行了柑橘黃龍病和柑橘5種主要病毒病的檢測。結(jié)果表明：澄邁縣福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地和瓊中縣營根鎮(zhèn)綠橙種植園2個(gè)新植橘園的柑橘黃龍病發(fā)病較輕，檢出率僅為8%和11%，而其他5個(gè)橘園的柑橘黃龍病檢出率均在75%以上，嚴(yán)重的達(dá)100%。除此之外，7個(gè)橘園均未檢測到柑橘褪綠矮縮病毒;澄邁縣和瓊中縣的衰退病毒病檢出率分別在52.9%和77.8%以上，黃脈病毒病在83.3%和90%以上。澄邁縣還檢測到碎葉病毒病的存在，檢出率在38.1%以上，除紅湖農(nóng)場外還存在裂皮病毒病，檢出率在11.8%以上。瓊中縣的綠橙種植園3還存在裂皮病毒病，檢出率為43.8%。綜上所述，柑橘黃龍病和病毒病已經(jīng)嚴(yán)重威脅到海南省福橙和綠橙主產(chǎn)區(qū)的柑橘生產(chǎn)安全。加強(qiáng)對海南柑橘苗木安全生產(chǎn)的同時(shí)，亟需采取有效的田間綜合防控措施，以促進(jìn)海南柑橘產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

關(guān)鍵詞 柑橘黃龍病; 柑橘病毒病; 海南省; 柑橘

中圖分類號： S 412

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2018359

柑橘是我國南方一種重要水果，柑橘黃龍病（citrus Huanglongbing）是目前世界柑橘生產(chǎn)上最具有毀滅性的病害之一[1]。該病害已廣泛分布于中國、印度、南非、美國和巴西等世界上50多個(gè)柑橘種植國家。我國的柑橘黃龍病主要分布在廣東、廣西、福建、海南、江西等主要柑橘種植區(qū)域，此外湖南、浙江、四川、云南、貴州和臺灣等省市柑橘種植區(qū)域也有發(fā)生。引起我國柑橘黃龍病的病原為α變形菌綱韌皮部桿菌屬亞洲種Candidatus Liberibacter asiaticus，（Las）[24]。該種為耐熱型（28～32℃），傳播媒介為柑橘木虱Diaphorina citri[5]。黃龍病菌主要通過柑橘木虱、帶病苗木、嫁接等進(jìn)行傳播，但不能通過汁液摩擦及土壤傳播;同時(shí)在柑橘樹體內(nèi)的繁殖擴(kuò)展受到柑橘維管束的限制。目前引起柑橘黃龍病的病原菌還不能人工培養(yǎng)，同時(shí)也沒有發(fā)現(xiàn)防治柑橘黃龍病的有效藥劑。

柑橘黃龍病可在柑橘上形成典型癥狀：如葉片褪綠均勻黃化或斑駁、革質(zhì)化，葉脈粗大，果實(shí)出現(xiàn)“紅鼻子果”等。田間柑橘黃龍病發(fā)病癥狀有時(shí)極易與柑橘田間缺素癥、病毒病及藥肥害等癥狀相混淆，肉眼進(jìn)行鑒別診斷，準(zhǔn)確率不高，易誤判。因此，利用現(xiàn)代科技手段，采用合適的方法對柑橘黃龍病進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷就顯得尤為重要。目前較多采用PCR（polymerase chain reaction）對柑橘黃龍病進(jìn)行分子診斷[68]（http：∥www.rec.ri.cmu.edu/usda）。常見的PCR檢測法有常規(guī)PCR、巢式PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR。2014年，程保平等通過試驗(yàn)比較了以上3種方法檢測柑橘黃龍病的靈敏度，發(fā)現(xiàn)熒光定量PCR方法明顯優(yōu)于其他2種方法，且具有操作簡便、檢測靈敏度高、結(jié)果數(shù)字化可讀性強(qiáng)及可以量化等優(yōu)點(diǎn)，是目前公認(rèn)的較為準(zhǔn)確的一種柑橘黃龍病檢測方法[9]。

在田間，柑橘病毒病能夠在柑橘上造成與柑橘黃龍病相類似的癥狀。柑橘病毒病的發(fā)生嚴(yán)重影響柑橘植株的生長和柑橘的品質(zhì)，同時(shí)威脅柑橘的苗木安全。本文選取我國已報(bào)道過的5種病毒?。ǜ涕偎ネ瞬《静?、柑橘裂皮病毒病、柑橘碎葉病毒病、柑橘褪綠矮縮病毒病及柑橘黃脈病毒?。┑囊?，采用RT-PCR方法對來自海南的樣品進(jìn)行檢測。其中，柑橘衰退病毒Citrus tristeza virus （CTV）、柑橘裂皮病類病毒Citrus exocortis viroid（CEVd）、柑橘碎葉病毒Citrus tatter leaf virus（CTLV）是3種嚴(yán)重威脅柑橘生產(chǎn)的病毒，在世界范圍內(nèi)廣泛分布[12];柑橘褪綠矮縮病毒Citrus chlorotic dwarf associated virus（CCDaV）為2012年Loconsole等在柑橘上鑒定出來的一種單鏈DNA類病毒，該病毒主要危害檸檬、葡萄柚、橘橙等柑橘品種，在我國少數(shù)地區(qū)存在[13];柑橘黃脈病毒Citrus yellow vein clearing virus（CYVCV）為陳洪明等于2015年在‘尤力克檸檬上新發(fā)現(xiàn)的病毒，所引起的病害為嫁接傳染性病害[14]。

海南省‘綠橙和‘福橙是20世紀(jì)80年代從廣東廉江引進(jìn)的‘紅江橙Citrus tangerine Hort. Et Tanaka×Citrus sinensis （L.） Osbeck經(jīng)過多年培育而來。瓊中縣和澄邁縣分別是海南柑橘‘綠橙、‘福橙的主產(chǎn)區(qū)?！傊芯G橙是海南省的名牌產(chǎn)品，獲國家農(nóng)業(yè)部無公害農(nóng)產(chǎn)品認(rèn)證和國家綠色食品認(rèn)證。2006年1月，“瓊中綠橙”商標(biāo)被國家商標(biāo)局批準(zhǔn)注冊，是海南省第1個(gè)有地理標(biāo)志證明的商標(biāo)[10]。澄邁‘福橙在2008年被定為國宴果品，同年申請注冊了“澄邁福橙”商標(biāo)。調(diào)查表明，由于柑橘黃龍病的危害，瓊中縣‘綠橙的種植面積從1998年以來到2015年呈現(xiàn)拋物線式發(fā)展（圖1）。自2006年首次在海南省發(fā)現(xiàn)柑橘黃龍病以來，瓊中縣幾乎所有的柑橘產(chǎn)地都有發(fā)生[16]。2008年瓊中縣‘綠橙的種植面積達(dá)到最高點(diǎn)，約2 800 hm2。此后，2008年-2013年期間，柑橘種植面積銳減;至2015年-2016年，柑橘種植面積銳減為800 hm2，幾乎恢復(fù)到了2002年前的水平[17]。近年來，柑橘黃龍病對海南省柑橘產(chǎn)業(yè)危害的報(bào)道不斷出現(xiàn)，特別是對海南的主栽品種‘福橙和‘綠橙。過去主要是通過肉眼判別和普通PCR的方法對海南地區(qū)的柑橘黃龍病進(jìn)行鑒定，本文通過Quantitative PCR和RT-PCR的方法對隨機(jī)采集的海南‘福橙和‘綠橙樣品進(jìn)行柑橘黃龍病及柑橘病毒病的檢測，同時(shí)結(jié)合相應(yīng)的田間調(diào)研，對目前海南柑橘產(chǎn)業(yè)面臨的問題進(jìn)行綜合分析和闡述，旨為政府部門或相關(guān)生產(chǎn)單位柑橘生產(chǎn)安全和病害綜合防控提供參考，以利于海南柑橘產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料和果園基本情況

柑橘樣品采集時(shí)間分別為2017年3月、12月。采自海南‘福橙、‘綠橙的主要種植區(qū)域。

澄邁縣福山鎮(zhèn)澄邁‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地： 種植當(dāng)?shù)胤庇臒o病種苗，2015年10月種植，種植時(shí)間約2年，共28.67 hm2，2萬多株，田間管理中上水平，有水肥滴灌系統(tǒng)，水肥中上，長勢正常，株高0.8～1.5 m，未掛果，未見黃龍病癥狀或黃化癥狀樹。

澄邁縣福山鎮(zhèn)東義‘福橙種植園：2015年初種植，來自外地繁育的無病種苗，種植約3年，面積約0.8 hm2，700株左右，田間管理優(yōu)良，有水肥滴灌系統(tǒng)，水肥充足，長勢優(yōu)良，枝梢生長旺盛，開花掛果優(yōu)良，已是第二年桂果，株高1.5～2.5 m，個(gè)別植株生長明顯變差，果實(shí)變小且可見黃龍病癥狀或黃化癥狀樹。

澄邁縣福山鎮(zhèn)紅湖農(nóng)場‘福橙種植園：2013年10月種植，種植約5年，原種植約5 000株，因黃龍病危害目前僅剩約2 000株，田間管理中下，水肥中下，長勢較差，株高1.5～2 m，開花中等，掛果不多，多見黃龍病癥狀或黃化癥狀樹。

瓊中縣和平鎮(zhèn)‘綠橙種植基地的3個(gè)果園：種植約為10年，由政府統(tǒng)一規(guī)劃種植后分別由不同農(nóng)戶管理。果園1和果園3，黃龍病發(fā)生較為嚴(yán)重，且田間管理差，水肥差，果樹長勢差，枝梢較纖細(xì)，落葉較多，樹冠較低、稀疏，株高2～3 m，開花不良，掛果極少，多見黃龍病癥狀或黃化癥狀;果園2，黃龍病發(fā)生較為嚴(yán)重，但逐年清除病樹，田間管理中上，水肥中上，果樹長勢正常，株高2～3 m，開花掛果正常，株產(chǎn)正常，但果園仍可見黃龍病癥狀或黃化癥狀樹。

瓊中縣營根鎮(zhèn)‘綠橙種植園：該園為‘綠橙新植園，2017年初種植，種植約1年，田間管理中等，水肥中等，長勢正常，株高約0.5～0.8 m，未掛果，未見黃龍病癥狀或黃化癥狀。

采用五點(diǎn)采樣法隨機(jī)采集109個(gè)樣品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 柑橘DNA和RNA的提取、檢測及RNA的反轉(zhuǎn)錄

DNA和RNA的提?。好糠軩NA和RNA樣品均采集2～3個(gè)柑橘葉片中脈（或者取柑橘果實(shí)）0.5 g左右，用刀片切碎，而后用液氮快速將樣品磨碎，依次類推。每個(gè)樣品單獨(dú)用一副手套、一個(gè)研缽和研磨棒。本文中DNA的提取嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行提取，試劑盒為（AXYGEN）愛思進(jìn)動(dòng)植物基因組DNA制備試劑盒，具體提取方法詳見試劑盒說明書。RNA的提取主要采用天根生化科技有限公司的RNA提取試劑盒（貨號DP441，RNAprep Pure Plant Plus Kit），具體操作詳見試劑盒說明書。

DNA和RNA的檢測：取2 μL樣品在超微量紫外/可見分光光度計(jì)（Nano-100）儀器上進(jìn)行檢測，讀取并記錄DNA和RNA的含量和質(zhì)量數(shù)值。RNA的反轉(zhuǎn)錄：具體操作見天根生化科技有限公司反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書[貨號：KR116-02，F(xiàn)astKing RT Kit （with gDNAase）]。

1.2.2 柑橘黃龍病菌的檢測

本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative PCR）的方法對柑橘葉片及柑橘果實(shí)中的黃龍病菌進(jìn)行檢測。所有檢測試驗(yàn)均在ABI PRISM 7500 （Applied Biosystems， Foster City， CA， USA）上進(jìn)行。同時(shí)以柑橘黃龍病亞洲種的部分16S rDNA序列為模板設(shè)計(jì)引物， 引物的設(shè)計(jì)主要參照Li 等的文章[11]：HLBas：5′-TCGAGCGCGTATGCAATACG-3′，HLBr：5′-GCGTTATCCCGTAGAAAAAGGTAG-3′，利用探針HLBp： 5′-6-carboxy-fluorescein （FAM）-AGACGGGTGAGTAACGCG-Black Hole Quencher（BHQ）-1-3′對樣品進(jìn)行檢測。所用試劑為TaKaRa公司的Premix Ex Taq （Probe qPCR），所用引物和探針均由上海生工生物工程股份有限公司合成。實(shí)時(shí)熒光定量PCR所用試劑如下（25 μL）： 12 μL Premix Ex Taq （Probe qPCR），0.5 μL HLBas/HLBr，1 μL HLBp，1 μL DNA（50 ng/μL），10 μL dd H2O。具體程序?yàn)椋?5℃ 30 s;95℃ 5 s，60℃ 30 s 40個(gè)循環(huán)。程序運(yùn)行結(jié)束后，讀取Ct值。本團(tuán)隊(duì)利用標(biāo)準(zhǔn)品得到的Ct值與菌含量的關(guān)系為：Y=-0.286X+11.924，其中X為Ct值，Y為拷貝數(shù)，每克植物組織中含有的病原菌拷貝數(shù)為10Y。

1.2.3 柑橘病毒病的檢測

為了對海南省主要‘福橙和‘綠橙產(chǎn)區(qū)橘園內(nèi)的主要柑橘病毒病進(jìn)行分析，根據(jù)已有參考文獻(xiàn)中的檢測引物，重點(diǎn)對柑橘衰退病、裂皮病、褪綠矮縮病、碎葉病和黃脈病進(jìn)行檢測[1214]， 具體引物序列見表1。以反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA為模板，進(jìn)行PCR反應(yīng)，具體體系如下（20 μL）： Premix Ex Taq 10 μL，上/下游引物各 0.5 μL， cDNA（50 ng/μL） 1 μL， ddH2O 8 μL;具體程序如下：95℃ 5 min; 94℃ 30 s，54℃ 30 s，72℃ 1 min，35個(gè)循環(huán);72℃ 5 min。 16℃保持。PCR結(jié)束后進(jìn)行電泳，根據(jù)條帶的有無對結(jié)果進(jìn)行總結(jié)和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 海南‘福橙、‘綠橙主要產(chǎn)區(qū)柑橘黃龍病檢測結(jié)果及發(fā)病情況

本研究采用熒光定量PCR（QPCR）方法分別在2017年春冬季對隨機(jī)采自澄邁縣和瓊中縣7個(gè)果園共109個(gè)柑橘樣品進(jìn)行柑橘黃龍病含量檢測：其中‘福橙果園3個(gè)，樣品共計(jì)56個(gè);‘綠橙果園4個(gè)，樣品共計(jì)53個(gè)，具體結(jié)果見表2。從表2中可以看出，澄邁縣‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地的柑橘黃龍病處于感病初期，2017年3月抽檢樣品的檢出率為100%，平均菌含量很低，僅為（1.14±1.79）×103拷貝/g，2017年12月的檢出率僅為8.3%;紅湖農(nóng)場種植園在2017年3月和12月的2次抽檢中，葉片和果實(shí)樣品的檢出率均為100%;東義‘福橙示范基地2017年3月抽檢葉片樣品的檢出率為100%，2017年12月葉片和果實(shí)樣品的檢出率均為88%。2017年3月對瓊中縣和平鎮(zhèn)3個(gè)‘綠橙種植園的葉片抽檢結(jié)果顯示，3個(gè)果園柑橘黃龍病的檢出率均為100%;2017年12月‘綠橙種植園1和3黃龍病的檢出率為100%，‘綠橙種植園2為75%。2017年12月新增抽檢果園營根鎮(zhèn)‘綠橙種植園的檢出率僅為11%。從表2中我們可以看出，來自澄邁縣‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地[（1.14±1.79）×103拷貝/g]和瓊中縣營根鎮(zhèn)‘綠橙種植園[（0.03±0.05）×103拷貝/g]的樣品含菌量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于其他被檢果園樣品的含菌量。究其原因，黃龍病不同發(fā)病程度可能與種植年限相關(guān)，從表中可以看出澄邁縣‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地為種植當(dāng)?shù)胤N苗2年左右的新植園，瓊中縣營根鎮(zhèn)‘綠橙種植園為種植不足1年的新植園。值得注意的是，同為種植2年左右的果園，東義種植園柑橘黃龍病的檢出率為88%以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地;同時(shí)前者的平均菌含量為后者的100倍以上。這些現(xiàn)象提示我們，黃龍病的發(fā)病程度除與種植年限有關(guān)外還與果園的田間栽培管理水平相關(guān)。

2.2 海南‘福橙、‘綠橙主要產(chǎn)區(qū)柑橘病毒病的檢測結(jié)果及發(fā)病情況

研究表明，除柑橘黃龍病外，柑橘病毒病也嚴(yán)重影響柑橘生長和產(chǎn)量。本研究采用RT-PCR方法對柑橘樣品中5種柑橘病毒?。ǜ涕偎ネ瞬?、柑橘裂皮病、柑橘褪綠矮縮病、柑橘碎葉病及柑橘黃脈?。┻M(jìn)行檢測。結(jié)果表明，7個(gè)橘園均未檢測到柑橘褪綠矮縮病毒;澄邁縣3個(gè)‘福橙橘園都檢出了柑橘衰退病毒（檢出率分別為52.9%、100%、95.2%）、柑橘碎葉病毒檢出率分別為41.2%、55.6%、38.1%）和柑橘黃脈病毒（檢出率分別為100%、83.3%、85.7%）;除此之外，‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地和東義‘福橙示范種植園還檢出了柑橘裂皮病毒（檢出率分別為11.8%和71.4%），而紅湖農(nóng)場‘福橙種植園未檢出（表3）。

2017年12月采自瓊中縣4個(gè)‘綠橙橘園的柑橘葉片和果實(shí)均未檢測到柑橘褪綠矮縮病毒和柑橘碎葉病毒;但都檢出了柑橘衰退病毒（檢出率分別為100%、93.8%、87.5%、77.8%）和柑橘黃脈病毒（檢出率分別為90%、93.8%、93.8%、100%）。此外，和平鎮(zhèn)‘綠橙橘園果園3的葉片和果實(shí)樣品中還檢出了柑橘裂皮病毒（檢出率為43.8%）。具體結(jié)果見表2。

3 討論

海南省是我國重要的亞熱帶水果產(chǎn)區(qū)之一，終年雨水充沛、長夏無冬、光熱豐富，有利于亞熱帶作物的生長。除此之外，海南省全境屬熱帶地區(qū)，占全國熱帶面積的42.5%，其中種植熱帶作物的面積占全省的23.9%，非常適合發(fā)展熱帶特色作物[15]。澄邁縣位于海南北部丘陵臺地，瓊中縣位于海南中部山地丘陵，都非常適合發(fā)展熱帶水果產(chǎn)業(yè)，兩地均為海南省主要的柑橘產(chǎn)區(qū)。

結(jié)合本次收集到的7個(gè)果園的田間信息和分子檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除種植年限較短的橘園，如澄邁縣‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地和瓊中縣營根鎮(zhèn)‘綠橙柑橘黃龍病檢出率和發(fā)病程度較輕外，其他橘園的柑橘黃龍病發(fā)病均較嚴(yán)重。值得注意的是，澄邁縣福山鎮(zhèn)東義‘福橙種植園同為種植年限較短的橘園，柑橘黃龍病的檢出率已經(jīng)達(dá)到了88%，發(fā)病程度也很嚴(yán)重（表2）;經(jīng)查，該橘園的種苗來自外地繁育的無病種苗。同時(shí)對7個(gè)橘園柑橘病毒病的檢測發(fā)現(xiàn)，新植園與老橘園在病毒病的發(fā)生種類上不存在差異，僅在檢出率上有少許差距（表3）。這些現(xiàn)象暗示我們除了加強(qiáng)對橘園的水肥、除蟲除草等田間管理外，加強(qiáng)種苗的檢測，減少柑橘黃龍病和病毒病對柑橘苗木的污染源頭也非常重要。

以往的調(diào)研報(bào)道表明，瓊中地區(qū)樣品柑橘黃龍病的檢出率均小于100%，約為60%左右[16];在本次調(diào)研中采自瓊中縣和平鎮(zhèn)3個(gè)種植園的樣品柑橘黃龍病檢出率均超過了75%，雖然在隨機(jī)采樣中會(huì)有一定的不確定因素存在，但也從側(cè)面說明柑橘黃龍病在這些地區(qū)的危害程度正在進(jìn)一步加重。從表2可以看出，澄邁縣福山鎮(zhèn)的3個(gè)果園，3月采集的柑橘葉片含菌量平均高出12月葉片樣品的2倍以上，但是12月采集的果實(shí)樣品中的含菌量遠(yuǎn)超同期葉片中的含菌量。由于3月采自瓊中和平鎮(zhèn)果園的樣品為種植園1、種植園2和種植園3的混樣，因此無法比較不同季節(jié)單一果園的含菌量。但是12月采自種植園2和種植園3的果實(shí)樣品含菌量遠(yuǎn)超同果園葉片的含菌量。種植園1由于年久失管，果實(shí)小而且量極少，因此大量黃龍病菌仍存在于葉片中。這些現(xiàn)象暗示我們柑橘果園中12月（冬季）的黃龍病菌濃度遠(yuǎn)高于3月（春天）的黃龍病菌濃度;同時(shí)當(dāng)柑橘植株掛果后，隨著果實(shí)接近成熟存在柑橘黃龍病從葉片向果實(shí)轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。以上這些結(jié)論仍需要進(jìn)一步的試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

基于本次調(diào)研中7個(gè)果園的具體情況，本文建議采取分類防控措施：1）澄邁縣福山鎮(zhèn)紅湖農(nóng)場‘福橙種植園和瓊中縣和平鎮(zhèn)‘綠橙果園1和果園3不但柑橘黃龍病發(fā)生嚴(yán)重，而且處于失管狀態(tài)或管理不善，需進(jìn)行徹底挖除清園，并火燒處理被挖樹體，進(jìn)行整體重新規(guī)劃重新種植或改種;2）澄邁縣福山鎮(zhèn)東義‘福橙示范基地和瓊中縣和平鎮(zhèn)‘綠橙果園，雖然柑橘黃龍病發(fā)病嚴(yán)重，但果園管理優(yōu)良也有良好經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量和產(chǎn)值，需對果園加強(qiáng)監(jiān)測，并對園中的病樹采取徹底挖除，火燒處理被挖樹體，同時(shí)可補(bǔ)種無病柑橘大苗（這樣可以縮短柑橘結(jié)果前暴露在田間的時(shí)間，同時(shí)能夠讓果農(nóng)盡快獲得收益）[18];3）對于一些發(fā)病較輕、種植年限較短的橘園，如澄邁縣‘福橙標(biāo)準(zhǔn)化種植示范基地和瓊中縣營根鎮(zhèn)‘綠橙種植園，側(cè)重于采取防病與防蟲相結(jié)合、化學(xué)藥劑與生物防治相結(jié)合的方法，在柑橘樹抽梢期等特殊時(shí)期進(jìn)行藥劑噴灑，減少木虱數(shù)量;將四環(huán)素等抗生素通過輸液的方式輸送到柑橘樹體內(nèi)，可有效遏制柑橘黃龍病的發(fā)展，減少樹體內(nèi)病原菌的數(shù)量;增強(qiáng)樹勢，增加新梢，增加掛果等;4）對于需種植柑橘苗木的新植園，嚴(yán)格把控柑橘種苗的質(zhì)量，加強(qiáng)對種苗柑橘黃龍病和病毒病的檢測檢疫，同時(shí)對果園不定期噴施殺蟲殺菌藥劑，加強(qiáng)柑橘不同生長時(shí)期木虱的防控力度，減少柑橘黃龍病的傳播媒介;科學(xué)進(jìn)行水肥管理，增強(qiáng)樹勢，提高樹體的營養(yǎng)水平和自身抗病蟲能力等。

綜上所述，柑橘黃龍病和病毒病已經(jīng)對海南省柑橘主產(chǎn)區(qū)澄邁縣和瓊中縣的柑橘造成了嚴(yán)重的危害，發(fā)展和建立規(guī)范的無病種苗生產(chǎn)基地并加強(qiáng)柑橘種苗的檢測檢疫以及田間柑橘果園的栽培管理，有助于海南省減輕柑橘黃龍病和柑橘病毒病的發(fā)生和危害。

參考文獻(xiàn)

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（責(zé)任編輯：楊明麗）