葛永紅，張繼方，楊昕霖，謝秀芝

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林吉林 132101）

金銀花為忍冬科植物，其藥用成分芳樟醇、木犀素、氯原素；陳皮為蕓香科植物，其藥用成分橙皮苷；黃芩為唇形科植物，其藥用成分黃芩苷；魚(yú)腥草為三白草科植物的干燥地上部分，其藥用成分綠原酸；薄荷為唇形科植物，其藥用成分薄荷油。五種中藥的藥用成分均為廣譜性的抑菌成分。[1]

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1

菌株大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌及酵母菌，均為吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

金銀花、陳皮、黃芩、魚(yú)腥草、薄荷：購(gòu)自安徽亳州中藥材交易中心。

培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于細(xì)菌培養(yǎng)）、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基（用于真菌）。

1.1.2 儀器

揮發(fā)油提取器裝置、冰箱、恒溫干燥箱、粉碎機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、滅菌鍋、海爾電冰箱。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 金銀花、魚(yú)腥草藥用成分的粗提取[2、3]

將材料陰干、粉碎并過(guò)篩后，稱(chēng)取20g粉末，索式回流提取法置于500ml錐形瓶中，加入溶劑30%乙醇200ml，回流提取60分鐘。濾除濾液，濃縮生藥含量為1g/ml，濾膜過(guò)濾除菌，封口至4攝氏度冰箱中保存。

1.2.1.1 陳皮、薄荷揮發(fā)油的提取[4]

將材料陰干、粉碎并過(guò)篩后，稱(chēng)取80g粉末，置于1000ml容量瓶中，加入溶劑500ml的水，揮發(fā)油提取法，得到上層油狀液體為香樟精油，計(jì)算精油提取率。

1.2.1.2 黃芩藥用成分的粗提取

將材料陰干、粉碎并過(guò)篩后，稱(chēng)取20g粉末，水煎煮3次，每次溶劑200ml，每次煎煮1h，合并水煎液，濃縮至生藥含量1g/ml，濾膜過(guò)濾除菌，封口至4攝氏度冰箱中保存。

1.2.2 體外抑菌研究

1.2.2.1 金銀花體外抑菌實(shí)驗(yàn)

取干燥后的定型濾紙片，依次浸入稀釋濃度為的0.500 00g/mL、0.250 00g/mL、0.125 00g/mL、0.062 50g/mL、0.031 25 g/mL的金銀花稀釋液中浸泡5分鐘。采用濾紙片法，10 h后測(cè)定抑菌圈的大小。

1.2.2.2 陳皮、魚(yú)腥草體外抑菌實(shí)驗(yàn)

取干燥后的定性濾紙片，依次浸入稀釋濃度分別為2.000 00g/ml、1.000 00g/ml、0.500 00g/ml、0.250 00g/ml、0.012 50g/ml的陳皮稀釋液中浸泡5分鐘。采用濾紙片法，10h后測(cè)定抑菌圈的大小。

1.2.2.3 黃芩體外抑菌實(shí)驗(yàn)[5]

取干燥后的定性濾紙片，依次浸入稀釋濃度分別為4.000 00g/ml、2.000 00g/ml、1.000 00g/ml、0.5000 0g/ml、0.250 00g/ml的黃芩稀釋液中浸泡5分鐘。采用濾紙片法，10h后測(cè)定抑菌圈的大小。

1.2.2.4 薄荷體外抑菌實(shí)驗(yàn)

取干燥后的定性濾紙片，依次浸入稀釋濃度分別1.000 00g/ml、0.500 00g/ml、0.250 00g/ml、0.012 50g/ml、0.062 50g/mL的薄荷稀釋液中浸泡5分鐘。采用濾紙片法，10h后測(cè)定抑菌圈的大小。

1.2.3 空氣清新劑的制備[6]

取等量的金銀花、陳皮、魚(yú)腥草、黃芩、薄荷五種提取液，加入裝有等量的30%的乙醇容器中，密封，充分溶解，裝入定量氣壓瓶中使用。

1.2.4 空氣清新劑抑菌模型的制備

取24個(gè)培養(yǎng)皿、24個(gè)500ml（1 098cm3）燒杯。將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌采用平板劃線法分別接種6個(gè)培養(yǎng)皿，等量分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組。接種后的培養(yǎng)皿拿到室內(nèi)環(huán)境下，將燒杯罩在培養(yǎng)皿上。實(shí)驗(yàn)組分別向燒杯內(nèi)噴一次空氣清新劑，對(duì)照組分別燒杯內(nèi)噴一次無(wú)菌蒸餾水。10h觀察實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組培養(yǎng)皿上的菌株與雜菌生長(zhǎng)狀況[7]。

1.2.5 感官評(píng)價(jià)

選擇10名志愿者，男女各半，分2組，分別對(duì)各種精油空氣清新劑的氣味、使用情況、混濁度和是否分層等指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)定[8]。

2 結(jié)果與分析

2.1 金銀花提取物最小抑菌濃度（MIC）

金銀花提取液對(duì)四種菌株都能起到抑菌的最小濃度為0.250 00g/mL。具體情況見(jiàn)表1。

表1 金銀花提取物對(duì)不同菌種的最小抑菌濃度（MIC）及抑菌作用

2.1.1 陳皮揮發(fā)油最小抑菌濃度（MIC）

陳皮揮發(fā)油對(duì)四種菌株有明顯的抑菌效果。陳皮揮發(fā)油對(duì)四種菌株都能起到抑菌的最小濃度為1g/mL。具體情況見(jiàn)表2。

表2 陳皮提取物對(duì)不同菌種的最小抑菌濃度（MIC）及抑菌作用

2.1.2 魚(yú)腥草提取物最小抑菌濃度（MIC）

魚(yú)腥草提取物對(duì)四種菌株有明顯的抑菌效果。魚(yú)腥草提取物對(duì)四種菌株都能起到抑菌的最小濃度為0.500 00g/mL。具體情況見(jiàn)表3。

表3 魚(yú)腥草提取物對(duì)不同菌種的最小抑菌濃度（MIC）及抑菌作用

2.1.3 黃芩提取物最小抑菌濃度（MIC）

黃芩提取物對(duì)四種菌株有明顯的抑菌效果。黃芩提取物對(duì)四種菌株都能起到抑菌的最小濃度為2.000 00g/mL。具體情況見(jiàn)表4。

表4 黃芩提取物對(duì)不同菌種的最小抑菌濃度（MIC）及抑菌作用

2.1.4 薄荷揮發(fā)油最小抑菌濃度（MIC）

薄荷揮發(fā)油對(duì)四種菌株有明顯的抑菌效果。魚(yú)腥草提取物對(duì)四種菌株都能起到抑菌的最小濃度為1.000 00g/mL。具體情況見(jiàn)表5。

表5 薄荷提取物對(duì)不同菌種的最小抑菌濃度（MIC）及抑菌作用

2.2 感官綜合評(píng)價(jià)結(jié)果

根據(jù)表6得出四種提取物的感官評(píng)價(jià)最優(yōu)濃度：金銀花提取物在0.250 00g/mL和0.125 00g/ml時(shí)最優(yōu)，0.500 00g/mL次之；陳皮揮發(fā)油在 1.000 00g/ml和0.125 00g/mL時(shí)最優(yōu)，0.500 00g/mL次之；魚(yú)腥草取物在 0.500 00g/mL時(shí)最優(yōu)，1.000 00g/mL次之；黃芩提取物在 2.000 00g/mL 時(shí)最優(yōu)，0.250 00g/mL次之；薄荷揮發(fā)油在 1.000 00g/ml和 0.125 00g/ml時(shí)最優(yōu)，0.500 00g/ml次之。

表6 不同濃度金銀花、陳皮、魚(yú)腥草、黃芩、薄荷提取液感官綜合評(píng)價(jià)

2.3 空氣清新劑的配方分析

結(jié)合五種中藥材提取物的最小抑菌濃度和感官綜合評(píng)價(jià)得出：金銀花提取物的最佳濃度為0.250 00g/mL，陳皮揮發(fā)油的最佳濃度為1.000 00g/mL，魚(yú)腥草提取物的最佳濃度為0.500 00g/mL，黃芩提取物的最佳濃度為2.000 00g/mL，薄荷揮發(fā)油的最佳濃度1g/ml。

2.4 空氣清新劑對(duì)三種菌的抑菌效果評(píng)價(jià)結(jié)果

等量配比金銀花、陳皮、魚(yú)腥草、黃芩、薄荷五種提取液濃度分別為 0.250 00g/ml、1.000 00g/ml、0.500 00g/ml、2.000 00g/ml、1.000 00g/ml，加入定量的30%的乙醇容器中。根據(jù)表7得出空氣清新劑對(duì)四種菌均有較好的抑菌效果。對(duì)大腸桿菌的抑菌效果最好。

表7 空氣清新劑對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌的抑菌效果

3 結(jié)論

結(jié)合感官評(píng)價(jià)，得出空氣清新劑中提取物的最佳配方為金銀花、陳皮、魚(yú)腥草、黃芩、薄荷提取物的濃度 0.25 g/mL、1g/mL、0.5g/mL、2g/mL、1g/mL。 此中藥空氣清劑，不含香精等人工合成的化學(xué)成分，是純天然安全無(wú)毒的，在氣味清香的同時(shí)還具有良好的抑菌效果，有很好的開(kāi)發(fā)空間[9]。