劉寧寧 馮 蓓 段 偉 李紅霞

(延安大學附屬醫(yī)院1腫瘤科，2婦科，陜西省延安市 716000，電子郵箱：283132024@qq.com)

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居女性生殖道惡性腫瘤的首位，且我國宮頸癌的發(fā)病率不斷上升，并呈低齡化，對女性健康造成嚴重影響[1-2]。目前宮頸癌的治療方式主要有化療、放療、手術等，但中晚期宮頸癌患者的腫瘤浸潤侵襲以及預后不良問題仍無法有效解決[3]。有學者認為宮頸癌的浸潤侵襲性是患者治療失敗及死亡的主要原因[4-5]，而我國宮頸癌患者的早期診斷率落后于發(fā)達國家，患者確診時大多數(shù)已為中晚期，多伴有浸潤侵襲性，預后較差[6-7]。近年來，隨著分子生物學技術的不斷發(fā)展，通過檢測腫瘤細胞特異抗原等進行宮頸癌早期診斷已成為可能[8]。研究表明，腫瘤的形成是腫瘤細胞異常增殖的結果，其發(fā)生發(fā)展涉及多中心、多環(huán)節(jié)、多通路[9]。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)可以促進體內血管內皮細胞分化，產(chǎn)生金屬蛋白酶、內皮細胞間質膠原酶，增強血管通透性，促進腫瘤侵襲與轉移[10]。本文分析宮頸癌浸潤侵襲性與癌組織中VEGF表達水平的相關性，探討宮頸癌浸潤侵襲的機制。

1 資料與方法

1.1 研究對象 回顧性分析2013年8月至2017年2月在我院就診的120例宮頸癌患者(觀察組)的臨床資料。納入標準：臨床與病理資料完整；病理診斷為宮頸癌；非其他部位轉移或復發(fā)的宮頸癌病例。排除標準：精神疾病患者；未行手術或活檢病例；組織病理學不明確的病例；妊娠孕婦與哺乳期婦女。年齡35～83(54.21±4.22)歲；體質指數(shù)(22.44±1.48)kg/m2；臨床分期：Ⅱ期48例，Ⅲ期40例，Ⅳ期32例；分化程度：高分化60例，中分化40例，低分化20例；浸潤侵襲：有60例，無60例。抽取我院同期收治的無宮頸疾病的婦科就診患者120例作為對照組，納入標準：因良性病變行子宮切除術的、具有正常宮頸組織的患者；排除標準同觀察組。年齡32～81(53.42±3.42)歲；體質指數(shù)(23.92±1.48)kg/m2。兩組患者的年齡、體質指數(shù)等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。本研究獲得本院倫理委員會批準，患者均在自愿條件下簽署知情同意書。

1.2 方法 取得兩組患者的宮頸標本后立即用10%甲醛固定、石蠟包埋，給予免疫組化分析，VEGF抗體(批號：201245933)由Abcam公司提供，工作濃度為1 ∶500。以磷酸緩沖鹽溶液代替一抗作為陰性對照。分別由兩名有經(jīng)驗的病理科醫(yī)生在雙盲情況下根據(jù)切片的陽性細胞數(shù)比例和染色深度進行判定。染色結果判斷：組織切片中胞質染為淡黃色至棕褐色者為陽性細胞。標本結果判斷標準參照文獻[2]，4分：陽性細胞>60%；3分：30%<陽性細胞≤60%；2分： 5%<陽性細胞≤30%：1分：陽性細胞0%<陽性細胞≤5%；0分：陰性?！?分為VEGF表達陽性。對宮頸癌患者隨訪至2018年8月，記錄復發(fā)與死亡情況。比較觀察組和對照組患者的宮頸組織VEGF表達陽性率，并分析觀察組患者宮頸癌VEGF表達情況與腫瘤浸潤侵襲性的相關性，以及影響宮頸癌患者宮頸組織VEGF表達的因素。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計分析。對符合正態(tài)分布的計量資料以(x±s)表示，比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Spearman等級相關分析；影響因素分析采用Logistic回歸分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者宮頸組織VEGF表達陽性率比較 觀察組宮頸組織VEGF表達陽性90例，陽性率為75.0%；對照組宮頸組織VEGF表達陽性4例，陽性率為3.3%。觀察組宮頸組織VEGF表達陽性率高于對照組(χ2=129.338，P<0.001)。

2.2 有無浸潤侵襲宮頸癌患者宮頸組織VEGF表達情況比較 60例有浸潤侵襲性患者中，宮頸組織VEGF表達陽性59例，陽性率為98.3%；60例無浸潤侵襲性宮頸癌患者中，宮頸組織VEGF表達陽性31例，陽性率為51.7%。有浸潤侵襲性宮頸癌患者的宮頸組織VEGF表達陽性率高于無浸潤侵襲患者(χ2=13.938，P<0.001)。

2.3 影響宮頸癌患者宮頸組織VEGF表達水平的多因素Logistic回歸分析 以宮頸癌患者宮頸組織VEGF的表達情況作為因變量(VEGF表達陽性=1；VEGF表達陰性=0)，以浸潤侵襲情況、臨床分期、分化程度作為自變量(變量賦值：浸潤侵襲=1，非浸潤侵襲=0；臨床分期：Ⅳ期=1，Ⅱ期+Ⅲ期=0；分化程度：低分化=1，中分化+高分化=0)，進行多因素Logistic回歸分析。結果顯示，浸潤侵襲、臨床分期為Ⅳ期、低分化為影響宮頸癌患者宮頸組織VEGF陽性表達的獨立危險因素(均P<0.05)。見表1。

表1 影響宮頸癌患者宮頸組織VEGF陽性表達的多因素Logistic回歸分析(n=120)

2.4 宮頸癌患者預后與宮頸組織VEGF表達陽性細胞數(shù)的相關性 所有觀察組患者平均隨訪時間為(32.10±3.50)個月，其中復發(fā)25例，復發(fā)率為20.8%；死亡12例，死亡率為10.0%；相關分析顯示宮頸癌患者的復發(fā)率和死亡率均與宮頸組織VEGF陽性細胞數(shù)均存在正相關性(rs=0.543，P=0.007；rs=0.459，P=0.013)。

3 討 論

調查顯示，宮頸癌5年生存率約70%，其中無浸潤侵襲者5年生存率達80%～90%，而局部晚期或浸潤侵襲者5年生存率均在50%以下，因此，宮頸癌的浸潤侵襲性是影響宮頸癌預后的重要因素[11]。目前該病的發(fā)病機理尚未完全明確，但可歸因于基因—環(huán)境的相互作用[12]。腫瘤的浸潤侵襲性與相關基因的異常表達有關，VEGF是特異性的促淋巴管內皮生成因子，其可誘導內皮細胞使其鈣濃度在短時間內升高，還可提升基底膜的降解速度，影響內皮細胞的基因表達，并促進血管生成[13]。此外，VEGF還能夠提升血管通透性，并為內皮細胞的遷移提供網(wǎng)架，導致血漿蛋白外滲，同時也為腫瘤浸潤侵襲提供基質。本研究結果顯示，觀察組的宮頸組織VEGF表達陽性率高于對照組(P<0.05)，這可能與VEGF可與血管內皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)相結合而促進淋巴管內皮的生長[14]，還可通過抑制促血管生長因子與其在內皮細胞表面的受體結合而間接抑制血管新生有關[15]。

在人體正常組織當中VEGF呈微量表達，而在腫瘤組織中，VEGF呈高表達[16]。VEGF與VEGFR結合后可誘導淋巴管生成，促進腫瘤淋巴轉移[17]。本研究結果顯示，在120例觀察組患者中，有浸潤侵襲性的宮頸癌患者宮頸組織中VEGF表達陽性率高于無浸潤侵襲者(P<0.05)，這提示宮頸癌組織的浸潤侵襲多伴有VEGF的陽性表達。在各種高危因素的基礎上，致癌因子利用不同途徑導致細胞增生及凋亡失調而促進宮頸癌的發(fā)生發(fā)展[18]。腫瘤浸潤侵襲的過程非常復雜，包含多個步驟和因素，且與宿主和腫瘤細胞的復雜作用密切相關[19]。本研究結果顯示，浸潤侵襲、臨床分期為Ⅳ期、低分化程度為影響宮頸癌VEGF陽性表達的獨立危險因素(均P<0.05)。VEGF作為分泌型糖蛋白，隨著其自身的逐步水解，其對于VEGFR的親和力逐步升高，而在VEGF的誘導下，內皮細胞大量增殖，導致人體的血管出現(xiàn)分支，對腫瘤的發(fā)展及轉移具有促進作用，使腫瘤朝著肌層深部方向發(fā)展[20]。

宮頸癌復發(fā)是一個多因素多步驟的復雜病理過程。有研究顯示，宮頸癌患者治療后的5年生存率為75%左右，其主要死因是術后復發(fā)，因此預測復發(fā)對宮頸癌預后判斷具有重要意義[21]。相關研究表明，VEGF與VEGFR高表達是腫瘤增殖與轉移的主要影響因素，VEGF在具有高轉移潛能的宮頸癌細胞系中高表達，且轉移程度越高表達越強[22]。本研究結果顯示，觀察組患者的復發(fā)率為20.8%，死亡率為10.0%；宮頸癌患者的復發(fā)和死亡均與宮頸組織VEGF陽性表達數(shù)存在正相關性(均P<0.05)，與上述研究結果相似，但由于本研究中的樣本數(shù)有限，后續(xù)研究仍需進一步搜集病例，增大樣本量，以進一步驗證該結論。

綜上所述，宮頸癌患者宮頸組織VEGF表達上調發(fā)展，其與宮頸癌組織浸潤侵襲相關，或可預測患者的復發(fā)與死亡情況。