沈益青 凌云志(通訊作者)
(民航上海醫(yī)院檢驗(yàn)科 上海 200336)
隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,梅毒螺旋體特異性抗體檢測從定性到定量,極大提高了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,各儀器廠家都推出了自己的檢測儀器,如何實(shí)現(xiàn)同一檢測項(xiàng)目在不同儀器,不同方法間檢驗(yàn)結(jié)果的互認(rèn),是急需解決的問題。通過羅氏Cobas e601與希森美康HISCL5000檢測梅毒螺旋體特異性抗體的結(jié)果對比分析,探討兩者間的相關(guān)性。
2017年4月1 日—8月31日在我院就診的體檢,門診和住院患者,在羅氏Cobas e601檢測儀上檢測梅毒螺旋體特異性抗體結(jié)果為有反應(yīng)性的標(biāo)本。
采集患者靜脈血5ml,3000r/min離心15分鐘,選取在羅氏Cobas e601上檢測梅毒螺旋體特異性抗體結(jié)果為有反應(yīng)性,同時(shí)在希森美康HISCL5000進(jìn)行檢測,室內(nèi)質(zhì)控均在控制范圍。
采用羅氏Cobas e601全自動免疫分析儀及其配套試劑;日本希森美康HISCL5000高敏化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑。
49份樣本患者結(jié)果,見表1。
對49份檢測結(jié)果進(jìn)行回歸分析,發(fā)現(xiàn)羅氏檢測結(jié)果1-10 COI之間,兩種方法的相關(guān)系數(shù)R=0.225,結(jié)果無相關(guān)性,羅氏檢測結(jié)果為10.10-350.00 COI之間,兩種方法的相關(guān)系數(shù)R=0.937,結(jié)果具有很好的相關(guān)性,見圖1、圖2。
表1 49份標(biāo)本檢測結(jié)果
圖1 1.00-10.00 COI組兩種方法檢測結(jié)果相關(guān)性分析
圖2 10.10-350.00 COI組兩種方法檢測結(jié)果相關(guān)性分析
梅毒屬于一種性傳播疾病,病原體為蒼白螺旋體蒼白亞種,人體感染梅毒螺旋體后,可產(chǎn)生多種抗體,有些持續(xù)時(shí)間短,有些可終生存在[1]。目前檢測梅毒特異性抗體方法很多,金標(biāo)法,化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光[2],后者由于高靈敏度和高特異性,已成為各大醫(yī)院的主流檢測手段。
羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫法作為電化學(xué)發(fā)光(ECL)和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物,直接以[Ru(bpy)3]2+標(biāo)記抗體,反應(yīng)時(shí)標(biāo)記物直接發(fā)光[3]。且[Ru(bpy)3]2+在電極表面的反應(yīng)過程可以循環(huán)進(jìn)行,產(chǎn)生許多光子,從而增強(qiáng)光信號。發(fā)光信號檢測的寬線性加上電化學(xué)發(fā)光獨(dú)特的標(biāo)記物本身(發(fā)光底物)循環(huán)發(fā)光和專利的鏈霉親和素一生物素包被技術(shù)的信號放大作用,使電化學(xué)發(fā)光測定的檢測下限可達(dá)10-12和10-18級,在待測抗原(抗體)極微量或達(dá)到病理期極限時(shí),均能準(zhǔn)確測定。希森美康HISCL5000分析儀采用磁微?;瘜W(xué)發(fā)光酶免疫檢測技術(shù),
通過兩步夾心免疫測定法,生物素化重組TP抗原與TP抗體結(jié)合,生成TP抗體-重組TP抗原的復(fù)合物,其與磁性粒子上的鏈霉親和素結(jié)合,將復(fù)合物固定在磁性粒子上,將ALP標(biāo)記的重組TP抗原與磁性粒子-重組TP抗原-TP抗體的復(fù)合物結(jié)合,加入發(fā)光底物CDP-Star,讓復(fù)合物上的ALP分解并發(fā)光,檢測發(fā)光強(qiáng)度,發(fā)光強(qiáng)度隨著樣本中TP抗體量的增加而增強(qiáng),事先進(jìn)行各校準(zhǔn)物質(zhì)的檢測,可檢測出樣本中的TP抗體。通過結(jié)果比對,羅氏e601儀器檢測結(jié)果在1.00-10.00 COI反應(yīng)性范圍內(nèi),與希森美康HISCL5000儀器結(jié)果無相關(guān)性,羅氏e601儀器檢測結(jié)果在10.10-350.00 COI反應(yīng)性范圍內(nèi),與希森美康HISCL5000儀器結(jié)果具有很好的相關(guān)性,通過分析造成這種結(jié)果的原因可能有以下幾點(diǎn):(1)檢測方法的特異性,敏感性差異可能導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)不一致。(2)羅氏e601檢測結(jié)果普遍偏高,由于電化學(xué)發(fā)光高靈敏度的特點(diǎn)。
綜上所述,梅毒螺旋體抗體的血清學(xué)實(shí)驗(yàn),不能作為感染梅毒螺旋體的絕對依據(jù),檢測結(jié)果可能存在假陽性和假陰性,結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床綜合分析[4]。