劉麗園　潘菊英

【摘要】 目的：研究妊娠期高血壓（HDCP）患者抗心磷脂抗體（ACA）及抗β2-糖蛋白1（β2-GP1）抗體水平與妊娠結(jié)局的關(guān)系，深入探討抗磷脂抗體（APA）在HDCP發(fā)病中的作用，為臨床預(yù)防及治療HDCP提供新的理論依據(jù)。方法：選擇在本院接受常規(guī)產(chǎn)檢的妊娠期高血壓疾病孕婦，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)孕婦ACA及抗β2-GP1抗體水平，根據(jù)ELISA法檢測(cè)結(jié)果分組，觀察組A為僅ACA陽(yáng)性孕婦，觀察組B僅抗β2-GP1抗體陽(yáng)性孕婦，對(duì)照組為ACA及抗β2-GP1抗體均陰性孕婦，每組均納入30例。分析三組患者不良妊娠結(jié)局，以觀察組A和觀察組B為對(duì)象進(jìn)行研究，分析APA水平與妊娠結(jié)局的相關(guān)性，分析不同抗磷脂抗體間相關(guān)性。結(jié)果：觀察A組不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率為46.67%，明顯高于觀察組A（36.66%）和對(duì)照組（10.00%），三組患者不良妊娠結(jié)局比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組A和觀察組B兩組患者ACA-IgM平均為（11.46±4.51）GPLU/mL、ACA-IgG平均為（9.42±3.51）MPLU/mL、抗β2-GP1抗體平均為（104.63±21.83）U/mL?？功?-GPI抗體與圍產(chǎn)兒死亡呈正相關(guān)（P<0.05），ACA-IgM、ACA-IgG和抗β2-GP1抗體均與早產(chǎn)呈正相關(guān)（P<0.05），ACA-IgM與FGR呈正相關(guān)（P<0.05）。HDCP患者的ACA-IgG、ACA-IgM和抗β2-GP1抗體三者兩兩間均呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：HDCP患者ACA及抗β2-GP1抗體與不良妊娠結(jié)局具有一定相關(guān)性，APA水平的檢測(cè)對(duì)預(yù)測(cè)不良妊娠結(jié)局具有一定參考。

【關(guān)鍵詞】 妊娠期高血壓; 抗心磷脂抗體; 抗β2-GP1抗體; 妊娠結(jié)局; 相關(guān)性

【Abstract】 Objective：To study the relationship between antiphospholipid antibody（ACA）and anti beta 2- glycoprotein 1（β2-GP1）antibody level and pregnancy outcome in patients with pregnancy induced hypertension（HDCP），to explore the role of anti phospholipid antibody（APA）in the pathogenesis of HDCP，and provide a new theoretical basis for the clinical prevention and treatment of HDCP.Method：The maternal ACA and β2-GP1 antibody levels were detected by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）in pregnant women of our hospital.The results were grouped according to the results of ELISA，the observation group A was only ACA positive，the observation group B was only resistant to positive pregnant women with β2-GP1 antibody，and the control group was ACA and β2-GP1 resistance，all negative pregnant women，30 cases in each group.The adverse pregnancy outcomes of the three groups were analyzed.The study was conducted in observation group A and B，the correlation between antiphospholipid antibody level and pregnancy outcome was analyzed，and the correlation between different antiphospholipid antibodies was analyzed.Result：The total incidence of undesirable pregnancy outcome in observation group A was 46.67%，which was significantly higher than that in observation group B（36.66%）and control group（10.00%）.There was significant difference in adverse pregnancy outcomes in the three group（P<0.05）.The level of ACA-IgM in the two groups of group A and group B was（11.46±4.51）GPLU/mL，ACA-IgG was（9.42±3.51）MPLU/mL andβ2-GP1 was（104.63±21.83）U/Ml，there was a positive correlation between theβ2-GP1 antibody and perinatal mortality（P<0.05）;ACA-IgM，ACA-IgG and β2-GP1 antibody were positively correlated with preterm labor（P<0.05）;ACA-IgM and FGR were positively correlated（P<0.05）.There was a positive correlation between ACA-IgG，ACA-IgM andβ2-GP1 antibody in HDCP patients（P<0.05）.Conclusion：There is a certain correlation between ACA andβ2-GP1 antibody in HDCP patients and bad pregnancy outcome.The detection of APA level has a certain reference to the prediction of bad pregnancy outcome.

【Key words】 Gestational hypertension; Anticardiolipin antibody; Anti β2-GP1 antibody; Pregnancy outcome; Correlation

First-authors address：Central Hospital of Longhua District，Shenzhen 518110，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.04.040

妊娠期高血壓（hypertension disorder complicating，HDCP）是臨床產(chǎn)科常見(jiàn)并發(fā)癥，患者常表現(xiàn)出水腫、高血壓和蛋白尿等典型臨床癥狀。調(diào)查顯示，HDCP是引發(fā)不良圍生兒結(jié)局的重要因素[1]。盡管HDCP發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，但國(guó)內(nèi)外研究廣泛認(rèn)為多因素多因子綜合作用是導(dǎo)致HDCP發(fā)病的重要原因。而在建立的眾多HDCP發(fā)病機(jī)制學(xué)說(shuō)中，胎盤(pán)缺血缺氧學(xué)說(shuō)受到更多專(zhuān)家的青睞，血管內(nèi)皮細(xì)胞在這種狀態(tài)下?lián)p傷嚴(yán)重，全身小血管發(fā)生痙攣，最終衍生出HDCP臨床癥狀[2]。部分研究證實(shí)，抗磷脂綜合征（antiphospholipid syndrome，APS）是HDCP中重要的發(fā)病危險(xiǎn)因素，APS診斷要點(diǎn)在于抗磷脂抗體（antiphospholipid antibody，APA）水平的檢測(cè)。而抗心磷脂抗體（anticardiolipin antibody，ACA）與抗β2-糖蛋白1（β2-glycoprotein 1，β2-GP1）抗體均參與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷過(guò)程，抗β2-GP1抗體是且APA的重要輔助因子[3-4]。因此，檢測(cè)ACA及抗β2-GP1抗體水平對(duì)于HDCP患者不良妊娠結(jié)局的評(píng)估意義重大。本文選擇在本院接受常規(guī)產(chǎn)檢的妊娠期高血壓疾病孕婦為研究對(duì)象，深入探討了ACA及抗β2-GP1抗體水平與患者妊娠結(jié)局的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇在本院接受常規(guī)產(chǎn)檢的妊娠期高血壓疾病孕婦，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)孕婦ACA及抗β2-GP1抗體水平，根據(jù)ELISA法檢測(cè)結(jié)果分組，觀察組A為僅ACA陽(yáng)性（ACA-IgM>7 MPLU/mL和/或以ACA-IgG>10 GPLU/mL）孕婦;觀察組B僅抗β2-GP1抗體陽(yáng)性（抗β2-GP1抗體>90 U/mL）孕婦;對(duì)照組為ACA及抗β2-GP1抗體均陰性孕婦，每組各納入30例。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中關(guān)于妊娠期高血壓疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];支持并同意本項(xiàng)研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有免疫疾病史;胎兒畸形;胎兒遺傳性疾病。本研究已獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 分別抽取三組患者產(chǎn)前空腹?fàn)顟B(tài)靜脈血3 mL，置于含10%（體積比）枸櫞酸鈉抗凝液的食管中，室溫靜置30 min后，采用離心機(jī)以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心15 min，將上層分離血清置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩z測(cè)步驟如下：（1）制備緩沖溶液和洗液，以體積比樣本：緩沖液=1︰100稀釋樣品，制備樣品標(biāo)本;（2）準(zhǔn)備好充足的微孔板條，每個(gè)微孔中加入緩沖液已稀釋樣本和100 μL質(zhì)控品，室溫培育30 min，將板條倒空，用洗液反復(fù)沖洗至少3遍;（3）微孔中加入100 μL酶結(jié)合物溶液，室溫培育15 min，將板條倒空，用洗液反復(fù)沖洗至少3遍;（4）微孔中加入100 μL TMB底物溶液，室溫培育15 min，再加入100 μL反應(yīng)終止溶液，室溫放置5 min;（5）使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）分析儀讀取450 nm波長(zhǎng)處的吸光度值，儀器自動(dòng)采用擬合曲線(xiàn)計(jì)算ACA-IgM、ACA-IgG 與抗β2-GP1抗體水平。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察三組患者的不良妊娠結(jié)局，包括圍產(chǎn)兒死亡、早產(chǎn)、胎盤(pán)早剝、死胎、胎兒生長(zhǎng)受限（fetal growth restriction，F(xiàn)GR）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析研究參數(shù)間相關(guān)性，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患者基線(xiàn)資料比較 三組患者基線(xiàn)資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

2.2 三組患者不良妊娠結(jié)局比較 觀察組A不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率為46.67%，明顯高于觀察組B36.66%和對(duì)照組10.00%，三組患者不良妊娠結(jié)局比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=10.058，P=0.007）。

2.3 APA水平與妊娠結(jié)局的相關(guān)性分析 以觀察組A和觀察組B為對(duì)象進(jìn)行研究，兩組患者ACA-IgM平均為（11.46±4.51）GPLU/mL、ACA-IgG平均為（9.42±3.51）MPLU/mL、抗β2-GP1抗體平均為（104.63±21.83）U/mL?？功?-GP1抗體與圍產(chǎn)兒死亡呈正相關(guān)（P<0.05）;ACA-IgM、ACA-IgG和抗β2-GP1抗體均與早產(chǎn)呈正相關(guān)（P<0.05）;ACA-IgM與FGR呈正相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 不同抗磷脂抗體間相關(guān)性分析 150例HDCP患者的ACA-IgG、ACA-IgM和抗β2-GP1抗體均呈正相關(guān)（P<0.05），且ACA-IgG和ACA-IgM間呈正相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

HDCP是臨床妊娠常見(jiàn)病，患者多于妊娠20周后，以表現(xiàn)出高血壓等癥狀的形式發(fā)病，患者可伴隨多臟器功能損傷，嚴(yán)重威脅著孕婦及胎兒生命安全。目前臨床尚未探明HDCP病理學(xué)基礎(chǔ)，但認(rèn)為其會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，全身小血管痙攣，從而影響重要臟器官血液灌注量，引發(fā)不良妊娠結(jié)局[6]。國(guó)內(nèi)外臨床專(zhuān)家致力于HDCP發(fā)病機(jī)制的研究，也建立了各種發(fā)病機(jī)制學(xué)說(shuō)，其中的胎盤(pán)缺血缺氧學(xué)說(shuō)被廣泛接受[7]。血管內(nèi)皮細(xì)胞在胎盤(pán)缺血缺氧狀態(tài)下?lián)p傷嚴(yán)重，全身小血管發(fā)生痙攣，最終衍生出HDCP臨床癥狀。多項(xiàng)研究認(rèn)為，ACA是一種自身抗體，其以心磷脂為靶抗原，多見(jiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其他自身免疫性疾病中[8-9]。伴隨對(duì)ACA的深入研究，人們逐漸對(duì)ACA和HDCP的關(guān)系重視起來(lái)，ACA存在ACA-IgM、ACA-IgG和ACA-IgA三種亞型，ACA可降低血小板水量，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞形成損害，形成胎盤(pán)微血栓，增加不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)[10-12]。曾有報(bào)道，與正常產(chǎn)婦相比，HDCP患者ACA陽(yáng)性率升高，ACA檢測(cè)對(duì)于HDCP預(yù)測(cè)具有較高特異性和敏感性[13]?？功?-GP1抗體是ACA和磷脂相結(jié)合的輔助因子，具有降低抗凝血酶活性，提高內(nèi)皮細(xì)胞分子水平表達(dá)和促進(jìn)高凝血液狀態(tài)的作用[14-16]。為研究HDCP患者妊娠結(jié)局與APA的關(guān)系，本文選擇在本院接受常規(guī)產(chǎn)檢的妊娠期高血壓疾病孕婦進(jìn)行研究。

本研究分析APA水平與妊娠結(jié)局的相關(guān)性結(jié)果顯示，僅ACA陽(yáng)性和僅抗β2-GP1抗體陽(yáng)性孕婦ACA-IgM平均為（11.46±4.51）GPLU/mL、ACA-IgG平均為（9.42±3.51）MPLU/mL、抗β2-GP1抗體平均為（104.63±21.83）U/mL。抗β2-GP1抗體與圍產(chǎn)兒死亡呈正相關(guān)，ACA-IgM、ACA-IgG和抗β2-GP1抗體均與早產(chǎn)呈正相關(guān)，ACA-IgM與FGR呈正相關(guān)。提示，抗磷脂抗體水平對(duì)于不良妊娠結(jié)局具有一定影響，可為后續(xù)分子生物學(xué)研究提供基礎(chǔ)[17-18]。

HDCP患者常見(jiàn)不良妊娠結(jié)局有圍產(chǎn)兒死亡、早產(chǎn)、胎盤(pán)早剝、死胎、FGR等。本研究結(jié)果顯示，僅ACA陽(yáng)性孕婦不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率為46.67%，僅抗β2-GP1抗體陽(yáng)性孕婦不良妊娠結(jié)局總發(fā)生率為36.66%，均明顯高于ACA及抗β2-GP1抗體均陰性孕婦（10.00%）。分析其中的原因，APA導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞受損，人絨毛促性腺激素分泌量減少，不利于胚胎置入;APA導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，血小板聚集嚴(yán)重，纖溶與抗纖溶間建立的平衡被打破，血液處于高凝狀態(tài)，形成血栓[19]。此外，分析不同抗磷脂抗體間相關(guān)性結(jié)果顯示，ACA-IgG、ACA-IgM和抗β2-GP1抗體兩兩間均呈正相關(guān)，符合相關(guān)文獻(xiàn)[20]報(bào)道結(jié)果。

總之，HDCP患者ACA及抗β2-GP1抗體與不良妊娠結(jié)局具有一定相關(guān)性，APA水平的檢測(cè)，對(duì)預(yù)測(cè)不良妊娠結(jié)局具有一定參考。

參考文獻(xiàn)

[1]金美媛，鄭能能，熊智慧.中西醫(yī)結(jié)合治療重度子癇前期與子癇型妊娠期高血壓的臨床分析[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2018，36（4）：949-951.

[2] Wang Y，Shi D，Chen L.Lipid profile and cytokines in hypertension of pregnancy：A comparison of preeclampsia therapies[J].J Clin Hypertens（Greenwich），2018，20（2）：394-399.

[3]謝桂英，馬玉燕.拉貝洛爾對(duì)中重度妊娠期高血壓疾病患者心腎功能及妊娠結(jié)局的影響及機(jī)制[J].山東醫(yī)藥，2017，57（21）：74-76.

[4]黃月婷，張建平.妊娠合并癥及并發(fā)癥與血液指標(biāo)異常的觀察與處理[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2016，32（9）：655-658.

[5]謝幸，茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013.

[6]魏繼文，吳萍.妊娠期高血壓疾病相關(guān)影響因素分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2016，45（22）：3078-3080.

[7] Wang Y，Liu R X，Liu H.Association of adiponectin gene polymorphisms with hypertensive disorder complicating pregnancy and disorders of lipid metabolism[J].Genet Mol Res，2015，14（4）：15213-15223.

[8]倪琰琰，程蔚蔚.早發(fā)型子癇前期的預(yù)測(cè)研究進(jìn)展[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2016，35（1）：135-138.

[9]劉利華，徐勇.甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體和球蛋白抗體與妊娠不良結(jié)局的關(guān)系[J].廣東醫(yī)學(xué)，2015，36（7）：1053-1055.

[10] Zhong W，Peng H，Tian A.Expression of miRNA-1233 in placenta from patients with hypertensive disorder complicating pregnancy and its role in disease pathogenesis[J].Int J Clin Exp Med，2015，8（6）：9121-9127.

[11]林靜，李紅.妊娠期高血壓疾病孕婦血清尿酸監(jiān)測(cè)的臨床意義[J].中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志，2016，17（6）：546-548.

[12] Zhou J，Xiao X M，Wu Y H.Expression of interferon-γ in decidual natural killer cells from women with hypertensive disorder complicating pregnancy[J].J Obstet Gynaecol Res，2014，40（3）：670-676.

[13]王玉杰，張立軍，吳榮秀.腎臟血流動(dòng)力學(xué)與血管內(nèi)皮功能及妊娠期高血壓疾病相關(guān)性的研究[J].中國(guó)婦幼保健，2014，29（7）：1006-1008.

[14] Chen Y S，Shen L，Mai R Q.Levels of microRNA-181b and plasminogen activator inhibitor-1 are associated with hypertensive disorders complicating pregnancy[J].Exp Ther Med，2014，8（5）：1523-1527.

[15]馮永亮，彭婷婷，王芳.妊娠期高血壓疾病對(duì)出生結(jié)局的影響及相關(guān)因素[J].中華疾病控制雜志，2014，18（2）：131-134.

[16]朱彩丹.妊娠期高血壓患者隨機(jī)尿蛋白/肌酐比值水平與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015，18（10）：1168-1171.

[17]懷瑩瑩，丁虹娟.妊娠晚期甘油三酯及總膽固醇對(duì)妊娠結(jié)局的影響[J].中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志，2015，16（5）：424-426.

[18]李燕，樓月蘭.妊娠期高血壓嚴(yán)重程度對(duì)母兒結(jié)局的影響[J].廣東醫(yī)學(xué)，2016，37（15）：2319-2321.

[19]范玉芹，李磊，王謝桐.免疫調(diào)控在子癇前期早期干預(yù)中的作用和評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2014，30（10）：771-774.

[20]張艷梅，杜彥玫，王冬梅.孕婦妊娠期高血壓合并感染圍產(chǎn)兒預(yù)后的研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（4）：986-987，990.

（收稿日期：2018-07-19） （本文編輯：周亞杰）