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        3-對烯-1-胺及其席夫堿衍生物的抑菌活性研究

        2019-08-13 02:02:08朱守記王小淑徐士超趙振東
        生物質(zhì)化學(xué)工程 2019年4期
        關(guān)鍵詞:氏菌克雷伯念珠菌

        朱守記, 王小淑, 徐士超, 趙振東*

        (1.中國林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所;生物質(zhì)化學(xué)利用國家工程實驗室;國家林業(yè)和草原局 林產(chǎn)化學(xué)工程重點實驗室;江蘇省 生物質(zhì)能源與材料重點實驗室, 江蘇 南京 210042;2.韓山師范學(xué)院 化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院, 廣東 潮州 521041; 3.廣西科技師范學(xué)院 食品與生化工程學(xué)院;廣西高校制糖工程綜合技術(shù)重點實驗室, 廣西 來賓 546199)

        1 實 驗

        1.1 原料、試劑與儀器

        1.2 抑菌活性測試

        1.2.1 供試菌種 金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)CMCC-26069、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)GIM-1.279及白色念珠菌(Candidaalbicans)ATCC-10231均由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供。

        1.2.2 培養(yǎng)基配制 采用微量肉湯稀釋法,在250 mL三角瓶中加入2.1 g 水解酪蛋白(MH)肉湯復(fù)合培養(yǎng)基和100 mL蒸餾水,于121 ℃滅菌30 min,作為金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌的培養(yǎng)基。在250 mL三角瓶中加入2.6 g 馬鈴薯葡萄糖水復(fù)合培養(yǎng)基和100 mL蒸餾水,于121 ℃滅菌30 min,作為白色念珠菌的培養(yǎng)基。

        1.2.3 樣品溶液的配制 分別稱取樣品0.06 g,置于10 mL的無菌試管中,加入2 mL DMSO溶解,得到30 g/L的溶液,取30 μL該溶液溶于970 μL含3% DMSO的無菌培養(yǎng)基溶液中,得到質(zhì)量濃度為900 mg/L的樣品溶液(作為母液)。

        1.2.4 菌懸液的配制 挑取少量菌種到10 mL的小燒杯中,用無菌水稀釋至相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的菌懸液。取50 μL上述菌懸液,并用相應(yīng)的無菌培養(yǎng)基稀釋1 000倍,作為初始菌懸液。

        1.2.5 抑菌活性測試 往96孔平板的2~11號孔中分別加入100 μL含3% DMSO的無菌培養(yǎng)基溶液,往1號孔和2號孔中加入100 μL已配好的母液。從2號孔中取100 μL母液到第3個孔中,從3號孔取100 μL樣品溶液到4號孔,依次類推進行梯度稀釋,最后棄去11號孔中100 μL的溶液,便得到1~11孔的質(zhì)量濃度分別為900、 450、 225、 112.5、 56.25、 28.125、 14.062 5、 7.031 3、 3.515 6、 1.757 8 和0.878 9 mg/L的樣品溶液,并分別加入100 μL初始菌懸液,以100 μL含3% DMSO的無菌培養(yǎng)基溶液和100 μL初始菌懸液的混合液作為空白對照組。金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌于37 ℃ 培養(yǎng)24 h,白色念珠菌于30 ℃培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)結(jié)束后,與空白對照組比較,抑制80%以上細(xì)菌生長的最低藥物質(zhì)量濃度作為最小抑菌濃度(MIC)。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 除草活性及構(gòu)效關(guān)系

        2.2 抑菌活性測試結(jié)果

        表1 3-對烯-1-胺及其席夫堿衍生物的抑菌活性

        續(xù)表1

        化合物compounds結(jié)構(gòu)式structure最小抑菌濃度minimal inhibitory concentration(MIC)/(mg·L-1)金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae白色念珠菌Candida albicans2f>4504502252g45022556.252h450112.556.252i>450112.5112.52j>450>4504502k>4504502252l22522528.125硫酸卡那霉素Kanamycin sulfate—0.440.44112.5利福平Rifampicin—3.520.44450

        2.3 抑菌活性及構(gòu)效關(guān)系

        3 結(jié) 論

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