陳涓涓，雷 婷，李 欣，劉 娜，張曼，

（1.北京大學(xué)第九臨床醫(yī)學(xué)院，北京100038；2.尿液細(xì)胞分子診斷北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100038；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，北京100038；4.云南省人口和計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究所生化免疫室，云南 昆明650021）

精液質(zhì)量是反映男性生育力最直接和最基本的指標(biāo)，精液質(zhì)量關(guān)系到人口素質(zhì)、生殖健康水平及種族的延續(xù)。近幾年，全球男性精液質(zhì)量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)引起了廣泛關(guān)注。1992年丹麥學(xué)者CARLSEN等［1］最先使用Meta分析法研究了1938～1990年世界各地發(fā)表的有關(guān)男子精液質(zhì)量分析發(fā)現(xiàn)：50年來全球性的精子計(jì)數(shù)呈下降趨勢(shì)，平均每次射精量由1940年的3.4mL下降到1990年的2.7mL，精子密度由1940年的113×106/mL下降到1990年的66×106/mL，在半個(gè)世紀(jì)內(nèi)下降了近50%。為了解近年來云南省男性生育力的變化趨勢(shì)，本研究對(duì)2012年5月以來，于我生殖中心就診的4479名男性患者進(jìn)行了精液常規(guī)分析。

材料和方法

1 研究對(duì)象

自2012年5月31日至2016年6月6日到我生殖中心就診的4479例婚后性生活正常并未采取任何避孕措施1年以上不孕夫妻的男性患者。

2 標(biāo)本采集

所有研究對(duì)象禁欲2～7d，在專用取精室手淫采集全份精液于一次性取精杯中，置37℃恒溫箱液化，待其完全液化后進(jìn)行檢測(cè)。

3 檢測(cè)方法

肉眼觀察精液樣本的顏色、黏稠度及液化情況，pH試紙測(cè)試pH值，稱量精液質(zhì)量，質(zhì)量除以密度換算精液體積。根據(jù)制造商的計(jì)算機(jī)輔助精子分析（CASA，NIKON E200相差顯微鏡，SCA@COMPLETE MODLE軟件，巴塞羅那，西班牙）評(píng)估精子密度、一次射精的精子總數(shù)，快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比和活動(dòng)精子百分比。根據(jù)操作指南，使用移液器將2μL精液或稀釋精液加至SCA 20μm腔室顯微鏡載玻片的一側(cè)，通過載玻片加熱器保持在37℃。通過將精子密度乘以每個(gè)樣品中的精液體積來計(jì)算一次射精的精子總數(shù)。在離心并分析來自每位患者的至少兩個(gè)樣品中的精子后評(píng)估無(wú)精子癥。參考標(biāo)準(zhǔn)按第5版《WHO人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0及Graphpad Prism 6進(jìn)行分析，作圖描述2012～2016年5年間不孕癥就診夫妻男性患者的年齡分布、精液量、精子密度、一次射精的精子總數(shù)、快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比和活動(dòng)精子百分比的變化情況。由于精液量、精子密度、一次射精的精子總數(shù)、快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比和活動(dòng)精子百分比為偏態(tài)分布，使用Kruskal Wallis Test方法分析其變化趨勢(shì)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

2012～2016年到我生殖中心就診的4479名男性研究對(duì)象的各項(xiàng)分析數(shù)據(jù)，如表1。

表1 2012年至2016年4479名男性研究對(duì)象年齡及精液相關(guān)參數(shù)比較

1 4479名男性研究對(duì)象年齡段人數(shù)分布

圖1為2012年至2016年不孕癥就診夫妻男性患者的年齡分布情況。所有研究對(duì)象中各年齡段人數(shù)成正態(tài)分布，研究對(duì)象的平均年齡為34.0±6.2歲，眾數(shù)為30歲，占總樣本數(shù)的6.9%（309人），23至45歲年齡分布較廣。24歲以后接受精液常規(guī)檢查的患者人數(shù)劇增，在30歲達(dá)到高峰，從42歲以后迅速下降，直到60歲仍然有接受精液常規(guī)檢查的患者。

圖1 2012年至2016年不孕癥就診夫妻男性患者的年齡分布（n＝4479）

2 精液量變化

圖2為2012年至2016年5年間精液量變化，結(jié)果表明精液量不同年份組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.079，P＞0.05）。

圖2 2012年至2016年精液量變化（n＝4479）

3 精子密度和精子總數(shù)變化

圖3為2012年至2016年精子密度變化，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，精子密度不同年份組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.001），并呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，其中位數(shù)從2012年41.70×106/mL，下降至2016年34.35×106/mL。圖4為2012年至2016年精子總數(shù)變化趨勢(shì)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，精子總數(shù)不同年份組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），并呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，從2012年142.46×106/一次射精，下降至2016年89.35×106/一次射精。

圖3 2012年至2016年精子密度變化（n＝4479）

圖4 2012年至2016年精子總數(shù)變化（n＝4479）

4 快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比及活動(dòng)精子百分比變化

圖5、6、7分別為2012年至2016年快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比及活動(dòng)精子百分比變化趨勢(shì)，結(jié)果表明快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比（P＝0.078）、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比（P＝0.066）及活動(dòng)精子百分比（P＝0.068）三個(gè)參數(shù)5年間變化無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

圖5 2012年至2016年快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比變化（n＝4479）

圖6 2012年至2016年前向運(yùn)動(dòng)精子百分比變化（n＝4479）

圖7 2012年至2016年活動(dòng)精子百分比變化（n＝4479）

討 論

研究對(duì)象的年齡主要集中分布在23～45歲，占總受檢人群的95%，是不孕癥就診的主要群體，主要原因是由于該年齡段男性屬于生育高峰期，對(duì)生育的要求最為迫切，對(duì)生殖健康更為關(guān)注，應(yīng)該給予這個(gè)年齡段的男性更多的重視與指導(dǎo)。

根據(jù)《WHO人類精液與精子-宮頸粘液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》第5版公布的參考值：精液體積＞1.5mL；前向運(yùn)動(dòng)精子百分比＞32%；活動(dòng)精子百分比＞40%；精子濃度＞15×106/mL；精子總數(shù)＞39×106/一次射精。對(duì)5年間的精液常規(guī)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，精液量、快速前向運(yùn)動(dòng)百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、活動(dòng)精子百分比、精子濃度、精子總數(shù)中位數(shù)均在參考值以上，表明前來就診的不孕夫妻的發(fā)病原因并非完全來自男性；精液量、快速前向運(yùn)動(dòng)精子百分比、前向運(yùn)動(dòng)精子百分比及活動(dòng)精子百分比不同年份組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但精子濃度、精子總數(shù)不同年份組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并明顯呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

近年來，多個(gè)國(guó)家與地區(qū)的回顧性研究也發(fā)現(xiàn)男性精液質(zhì)量隨社會(huì)發(fā)展總體呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，如印度［2-5］、法國(guó)［6-7］等國(guó)家的學(xué)者發(fā)現(xiàn)本國(guó)男性的精子密度、總精子數(shù)、活動(dòng)精子百分比、快速直線運(yùn)動(dòng)精子百分比等參數(shù)呈現(xiàn)逐年下降趨勢(shì)。國(guó)內(nèi)也有學(xué)者在回顧過去25年間精液常規(guī)部分指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，1985年至1994年間國(guó)內(nèi)正常男性精液質(zhì)量參數(shù)中精液量、精子密度和精子總數(shù)未見明顯下降趨勢(shì)，但自1995年后的14年以來，精液量沒有明顯變化，但精子密度和精子總數(shù)呈現(xiàn)顯著下降趨勢(shì)［8-9］，這與本研究發(fā)現(xiàn)的5年來精子密度與精子總數(shù)下降的結(jié)果一致。

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，工作壓力及環(huán)境污染等因素直接影響著男性生殖的健康［10-13］。男性精液質(zhì)量改變是由各種因素長(zhǎng)期相互作用，逐步累積造成的結(jié)果。目前男性生育力治療的方法非常有限，通過婚檢、孕前檢查進(jìn)行精液常規(guī)檢測(cè)，可提前預(yù)防部分不育癥的發(fā)生，延緩不育癥的進(jìn)程，保護(hù)男性生育力，從而緩解或逆轉(zhuǎn)我地區(qū)男性精液質(zhì)量下降趨勢(shì)。