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        ABTS法測定龍眼葉乙醇提取物抗氧化活性

        2019-08-05 02:14:36李培源鄢宏俊賈智若霍麗妮
        山東化工 2019年13期
        關(guān)鍵詞:能力

        李培源,鄢宏俊,賈智若,霍麗妮

        (廣西中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院,廣西 南寧 530001)

        中藥中的抗氧化劑作為預(yù)防各種疾病的主要成分,受到了人們的廣泛關(guān)注。研究表明,攝入高水平的包括多酚類物質(zhì)在內(nèi)的天然抗氧化劑,可能對人體健康有益[1-3]。本論文研究龍眼葉乙醇提取物的ABTS自由基清除能力和還原能力,用以尋找來自中藥的天然抗氧化劑。

        1 實驗儀器

        龍眼葉乙醇提取物的ABTS自由基清除能力和還原能力采用UV1901型紫外可見分光光度計進行測定。2,2'-聯(lián)氨-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺鹽(ABTS)購自Sigma公司。

        2 方法

        2.1 龍眼葉乙醇提取物制備[4-8]

        稱取20 g龍眼葉粉末,加入200 mL乙醇(95%),浸泡3 d并重復(fù)操作3次。去除溶劑得到龍眼葉乙醇提取物。

        2.2 ABTS·+自由基清除能力測定[4-8]

        采用蒸餾水為溶劑將ABTS配制成2 mmol/L溶液50 mL,加入200 mL濃度為70 mmol/L K2S2O8水溶液混合均勻以制備ABTS·+溶液。將龍眼葉乙醇提取物稀釋為不同濃度藥液,加入1.9 mL吸光度為0.70±0.02(Abs=734 nm處)ABTS·+溶液混勻,在不同作用時間時測其吸光度并計算ABTS·+自由基清除率。

        2.3 還原能力測定[4-8]

        將一定量龍眼葉乙醇提取物溶液加入2.5 mLPBS溶液(pH值=7.4)和2.5 mL KFe(CN)4(1%)溶液中,50℃恒溫20 min后,加入2.5 mL三氯乙酸溶液(10%),離心10 min。取上清液2.5 mL,加入2.5 mL蒸餾水和0.5 mL FeCl3(1%)并混勻。在700 nm處測定吸光度,以蒸餾水為參比。

        3 結(jié)果

        3.1 龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除能力[4-8]

        3.1.1 不同濃度提取物對ABTS自由基的清除能力

        圖1 不同濃度龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除能力

        如圖1所示,龍眼葉乙醇提取物在較低濃度即表現(xiàn)出一定的ABTS自由基清除能力。濃度為0.2 mg/mL時,龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除率超過20%。濃度為0.5 mg/mL時,龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除率為濃度0.2 mg/mL時數(shù)值的1.4倍;濃度為0.8 mg/mL時,ABTS自由基清除率增加為濃度0.2 mg/mL時數(shù)值的1.7倍。在最高濃度2.0 mg/mL時,ABTS自由基清除率達到了64.2%??梢姡S著龍眼葉乙醇提取物濃度增加,其表現(xiàn)出更強的ABTS自由基清除效果。

        3.1.2 不同時間下提取物對ABTS自由基的清除能力[4-8]

        圖2 不同時間龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除能力

        不同時間龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除率如圖2所示。龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除率隨作用時間增加而增大。濃度為1.5 mg/mL的提取物,在1 min時的ABTS自由基清除率為41.6%;作用時間為3 min時,ABTS自由基清除率為作用時間1 min數(shù)值的1.1倍。作用時間延長至10 min時,ABTS自由基清除率增加至52.6%。

        3.2 龍眼葉乙醇提取物的還原能力[4-8]

        圖3 龍眼葉乙醇提取物的還原能力

        龍眼葉乙醇提取物的還原能力如圖3所示,該提取物的還原能力與藥液濃度有關(guān)。藥液濃度為0.2 mg/mL時吸光度為0.32,藥液濃度增加時其還原能力增加。藥液濃度為0.5和0.8 mg/mL時,吸光度為0.2 mg/mL濃度下數(shù)值的1.14和1.35倍。藥液濃度為1.0和1.2 mg/mL時,吸光度為0.2 mg/mL濃度下數(shù)值的1.84和1.89倍。藥液濃度為最高濃度2.0 mg/mL時,吸光度增大至0.2 mg/mL濃度下數(shù)值的2.51倍。

        4 結(jié)論

        本實驗采用ABTS法考察龍眼葉乙醇提取物的抗氧化能力,龍眼葉乙醇提取物在較低濃度即表現(xiàn)出一定的ABTS自由基清除能力。龍眼葉乙醇提取物在濃度為0.2 mg/mL對ABTS自由基的清除率超過20%;在最高濃度2.0 mg/mL時,ABTS自由基清除率達到了64.2%。龍眼葉乙醇提取物對ABTS自由基的清除率隨作用時間增加而增大。濃度為1.5 mg/mL的提取物,在1 min時的ABTS自由基清除率為41.6%;10 min時,ABTS自由基清除率增加至52.6%。此外,采用還原能力體系對其抗氧化能力進行測定,該提取物的還原能力與藥液濃度有關(guān)。藥液濃度為最高濃度2.0 mg/mL時,吸光度增大至0.2 mg/mL濃度下數(shù)值的2.51倍。

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