王總飛，劉先本，張瑞祥，劉士磊

(鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院胸外科，河南 鄭州 450008)

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占4/5左右，早期癥狀無特異性，臨床確診時(shí)多處于中晚期，易侵襲或轉(zhuǎn)移，患者5年生存率不高[1]。早期診治NSCLC，對(duì)提高患者生存率，改善其生存質(zhì)量具有十分重要的意義。近年來腫瘤標(biāo)記物在惡性腫瘤診斷、治療、預(yù)后評(píng)估中應(yīng)用較多[2，3]，血清鐵蛋白(SF)為新型腫瘤標(biāo)志物之一，其診斷肺癌敏感度較高。胸腺激酶1(STK1)屬于DNA修復(fù)酶，參與細(xì)胞增殖過程，被發(fā)現(xiàn)在實(shí)體腫瘤中高表達(dá)，且關(guān)于其對(duì)NSCLC化療效果評(píng)估的價(jià)值報(bào)道多[4，5]?；|(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)通過對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解以參與腫瘤生長、侵襲與轉(zhuǎn)移[6]。本研究探討血清SF、STK1、MMP-9在NSCLC患者中的表達(dá)及臨床意義，為臨床NSCLC治療提供重要參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年2月至2018年2月我院收治的NSCLC患者80例(觀察組)，均通過病理學(xué)檢查證實(shí)，術(shù)前均無放化療干預(yù)，排除肝腎功能異常、免疫異常、合并其他惡性腫瘤等患者。其中男44例，女36例；年齡40～80歲[(56.38±3.29)歲]；病理分型：鱗癌52例，腺癌28例；TNM分期：I期30例，II期33例，III期17例；有吸煙史30例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例。同期診治的肺部良性疾病患者65例(對(duì)照1組)，疾病類型：慢性阻塞性肺疾病(COPD)42例，肺炎18例，肺結(jié)核5例。其中男36例，女29例；年齡36～77歲[(55.84±3.35)歲]；有吸煙史22例。同期健康體檢正常人員50例(對(duì)照2組)，其中男25例，女25例；年齡37～76歲[(55.69±3.16)歲]；有吸煙史17例。三組性別、年齡、吸煙史比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)，有可比性。本次研究患者均自愿參與，并簽署知情同意書。

1.2 方法清晨空腹采集各組對(duì)象肘靜脈血4 ml，以每分鐘3000轉(zhuǎn)的速率(r=5 cm)離心5分鐘，血清分離后保存待測。通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測各組對(duì)象血清SF、MMP-9水平，試劑盒均購自上海江萊生物科技有限公司；免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法對(duì)血清STK1測定，化學(xué)發(fā)光成像分析儀及其配套試劑購自西安瑞邁分析儀器有限責(zé)任公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料行正態(tài)性和方差齊性檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布則通過對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)化后呈正態(tài)或近似正態(tài)分布，多組間行單因素方差分析，組內(nèi)兩兩比較行LSD-t檢驗(yàn)；兩組間行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。Pearson相關(guān)性分析SF、MMP-9與STK1水平的關(guān)系。P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清SF、MMP-9、STK1水平比較觀察組血清SF、MMP-9、STK1水平高于對(duì)照1組、對(duì)照2組(P< 0.05)；對(duì)照1組血清SF、SKT1水平高于對(duì)照2組(P< 0.05)，兩組血清MMP-9水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。見表1。

表1 三組血清SF、MMP-9、STK1水平比較

*與對(duì)照2組比較，P< 0.05；#與對(duì)照1組比較，P< 0.05

2.2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較鱗癌、III期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清SF、MMP-9、SKT1水平分別高于腺癌、I～I(xiàn)I期、非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P< 0.05)；>60歲患者血清MMP-9水平高于≤60歲患者(P< 0.05)。見表2。

表2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較

2.3 相關(guān)性分析NSCLC患者血清SF與MMP-9、STK1水平均呈正相關(guān)(r=0.580、0.612，P< 0.05)；血清MMP-9、STK1水平也呈正相關(guān)(r=0.563，P< 0.05)。

3 討論

NSCLC患者預(yù)后與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移復(fù)雜，新生血管形成、免疫低下、腫瘤標(biāo)志物等均可能導(dǎo)致腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移。SF屬于結(jié)合蛋白之一，為人體鐵儲(chǔ)備重要形式，人體各組織中SF有所表達(dá)，特別是骨髓、肝臟及脾臟。有研究表明SF與惡性腫瘤發(fā)生有關(guān)[7]。范國華等[8]研究發(fā)現(xiàn)相比肺良性病變，肺癌患者血清SF水平明顯高，且與肺癌患者病理類型、腫瘤直徑、分化程度、臨床分期可能有關(guān)。認(rèn)為血清SF可能參與肺癌發(fā)生、發(fā)展過程。同時(shí)該學(xué)者提出SF不穩(wěn)定一說，假陽性率較高。對(duì)此需聯(lián)合其他指標(biāo)或檢查手段進(jìn)一步診斷。周晶等[9]研究發(fā)現(xiàn)SF對(duì)NSCLC診斷敏感度、特異度分別為62.86%、86.00%，聯(lián)合C反應(yīng)蛋白(CRP)、癌胚抗原(CEA)檢測NSCLC的敏感度、特異度分別為87.14%、51.00%。可見SF聯(lián)合CRP、CEA能顯著提高NSCLC診斷敏感度，但不會(huì)提高其特異度。本研究結(jié)果顯示相比肺部良性疾病、健康人員，NSCLC患者血清SF水平顯著高，提示NSCLC患者多出現(xiàn)鐵超載現(xiàn)象。分析其原因：相關(guān)致癌理化因子對(duì)人體鐵代謝影響，減少鐵排出量，人體內(nèi)鐵儲(chǔ)備增多，此時(shí)抽血檢測血清SF升高；同時(shí)炎癥等對(duì)SF有一定的誘導(dǎo)作用，這是肺部良性疾病患者SF比健康人員高的原因之一。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)NSCLC不同病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否患者血清SF水平存在顯著差異，提示血清SF明顯上升可能傾向鱗癌，且其顯著表達(dá)與NSCLC分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

細(xì)胞基膜、細(xì)胞基質(zhì)被認(rèn)為是腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的天然屏障，腫瘤細(xì)胞通過之且往遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，這個(gè)過程中誘導(dǎo)機(jī)體形成蛋白酶類，對(duì)細(xì)胞基質(zhì)降解。相關(guān)報(bào)道發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者血清MMP-9水平與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為NSCLC預(yù)后預(yù)測重要指標(biāo)[10]。MMP-9為MMPs家族成員之一，其相對(duì)分子質(zhì)量大，它被激活后對(duì)I、V、IV、VII、X型細(xì)胞外基質(zhì)(如膠原蛋白、纖維黏連蛋白等)有不同程度的降解作用，促使腫瘤細(xì)胞易穿過基底膜浸潤結(jié)締組織基質(zhì)，進(jìn)而促腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移。徐曉艷等[11]研究發(fā)現(xiàn)NSCLC組織MMP-9陽性表達(dá)率高，且其表達(dá)和患者年齡、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示相比肺部良性疾病患者、健康人員，NSCLC患者血清MMP-9水平顯著高，與梁乃超[12]報(bào)道一致。本研究還發(fā)現(xiàn)血清MMP-9水平可能與NSCLC患者年齡、病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。MMP-9通過對(duì)基底膜、細(xì)胞外基質(zhì)降解以促腫瘤細(xì)胞往周邊組織侵襲[13]。

STK1被證實(shí)在多種實(shí)體腫瘤中高表達(dá)。目前關(guān)于STK1與NSCLC的研究以化療效果評(píng)估為主[14]。黃仁飛等[15]對(duì)59例NSCLC患者化療4周期不同療效患者STK1水平測定，發(fā)現(xiàn)化療4周期后STK1陽性率比化療前明顯降低，且化療有效者明顯比無效者低。認(rèn)為STK1水平監(jiān)測能有效評(píng)估NSCLC患者化療效果。本研究結(jié)果顯示NSCLC患者血清STK1水平相比肺部良性疾病、健康人員顯著高，這可能與STK1參與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)。有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，STK1與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)，能讓S期調(diào)控異常，G/S期時(shí)STK1水平持續(xù)上升，M期時(shí)其水平最高[16]。本研究還發(fā)現(xiàn)血清STK1水平可能與NSCLC患者病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)NSCLC患者血清SF、MMP-9與STK1水平均正相關(guān)。提示血清SF、MMP-9、STK1協(xié)同促腫瘤生長、浸潤及轉(zhuǎn)移。

綜上，血清SF、MMP-9、STK1水平在NSCLC患者中高表達(dá)，且其水平與腫瘤病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。血清SF、MMP-9、STK1可能協(xié)同參與NSCLC發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移。