葉小萇

（廣東省深圳市光明區(qū)動植物檢驗檢測中心 518107）

豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒 （PCV）感染，其所致疾病已成為我國養(yǎng)豬業(yè)具有嚴(yán)重威脅的免疫抑制性疫病之一[1]。豬圓環(huán)病毒是繼豬繁殖與呼吸綜合征之后新發(fā)現(xiàn)的豬的重要傳染病[2]。豬是PCV 的主要宿主，其感染不僅會使豬群免疫力嚴(yán)重降低，而且會增強一些疾病的易感性，易誘發(fā)其他病原菌混合感染綜合征，導(dǎo)致發(fā)病豬只癥狀更加嚴(yán)重。該病主要癥狀為全身皮膚有紅色或紫色出血斑點，剖檢可見腎腫大、蒼白，有針尖大小出血點或壞死點。

1 宰前檢疫

生豬屠宰檢疫中，檢疫此病更依賴于宰后同步檢疫，宰前臨床巡檢往往被生豬的移動、身上的被毛等因素所干擾，難以清晰觀察豬圓環(huán)病毒病的主要臨床癥狀 （全身皮膚可見紅色或紫色血斑點）。

2 宰后同步檢疫豬圓環(huán)病毒病檢疫技術(shù)要點

2.1 掌握發(fā)病特征，突出檢疫重點

宰后的皮膚檢疫是以肉眼觀察為主，對于明顯的皮膚出血點容易看準(zhǔn)檢出，但有時在皮膚癥狀不明顯時往往容易忽檢或誤檢。完整的視診方法應(yīng)從上到下，從左到右，從背部到腹部來回巡視1～2 遍，特別要重視會陰部和四肢皮膚出現(xiàn)的紅紫色隆起的不規(guī)則斑塊，見圖1。

2.2 重視腎臟的病理變化

從多年屠宰檢疫實踐來看，在剖檢腎時可見其腫大、蒼白，有針尖大小出血點或壞死點。病理組織學(xué)變化為出血性壞死性皮炎和動脈炎及滲出性腎小球性腎炎和間質(zhì)性腎炎，這種損傷是由免疫復(fù)合物在血管壁的沉積引起的，是Ⅲ型過敏反應(yīng)的結(jié)果，并因而出現(xiàn)胸腔積液和水包積液[3]。在實際檢疫工作過程中，在觀察皮膚病變的同時也應(yīng)重視剖檢臟器病變，以做到正確判斷，參見圖2。

3 實驗室檢測及結(jié)果分析

對宰后檢疫初診為豬圓環(huán)2 型病毒病的病料進行實時熒光定量PCR 檢測，首先對采集的病料進行研磨，使用組織勻漿儀，添加PBS 液對組織病料進行研磨，相對傳統(tǒng)的手動研磨法耗時更短、組織濃度更高；再次對研磨液提取DNA，使用的全自動核酸提取儀購自美國賽默飛公司；采用磁珠法提取所需核酸，磁珠法相比傳統(tǒng)的試劑盒離心柱膜法特異性更強，提取的核酸濃度、純度更高，耗時更短；最后使用目前國內(nèi)較成熟的核酸檢測試劑盒，避免煩瑣的引物和探針設(shè)計工作，利用熒光PCR 技術(shù)對病原目的基因進行擴增，此方法特異性強、高效、簡便，對于臨床樣品大通量的快速診斷具有重要意義。

實驗結(jié)果表明，與宰后檢疫初診符合率高達95.6%，腎臟、皮膚、淋巴結(jié)的檢出率較高。說明使用該方法可實現(xiàn)高靈敏性和高速的優(yōu)勢結(jié)合，更高效率地擴增致病菌DNA，為豬圓環(huán)2型病毒的定性檢測提供了更好的保證，并為進一步研究豬圓環(huán)2 型病毒在各臟器中的分布提供依據(jù)，為實際檢疫工作指明方向。針對如此高的豬圓環(huán)2 型病毒檢出率，對檢出其他病原的病料同時進行豬圓環(huán)2 型病毒檢測發(fā)現(xiàn)，均有豬圓環(huán)2 型病毒的檢出。說明豬圓環(huán)2 型病毒以混合感染較為常見，參見圖3。

圖2 豬圓環(huán)病毒病豬腎臟出現(xiàn)的臨床癥狀

圖3 樣品檢測結(jié)果Ct 值≤35 且曲線有明顯指數(shù)增長期，判定為PCV-2 病毒陽性

4 流行形勢分析

2014～2018年在深圳某屠宰場共檢出236 例豬圓環(huán)病毒豬，占近5年檢出病害豬總數(shù)的31.4%。尤其是在2018年，豬圓環(huán)病毒豬數(shù)量急劇上升，高達145 例，占近5年總數(shù)的61.4%，主要來源于廣東和江西。根據(jù)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該病無明顯的季節(jié)性變化。該病在近幾年的急劇上升，經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查分析，流行趨勢異常的原因如下：一是近期產(chǎn)地氣候高濕，為其他疫病病原繁殖提供了有利條件，導(dǎo)致該病與其他病發(fā)生混合感染；二是因養(yǎng)殖場未全面開展自免工作，存在漏免、不免現(xiàn)象，導(dǎo)致病豬進入屠宰環(huán)節(jié)；三是流通環(huán)節(jié)對抗生素和飼料添加劑監(jiān)管愈發(fā)嚴(yán)格，一些養(yǎng)殖場因未能找到合適的防治方案導(dǎo)致該病流行。見圖 4，圖 5。

圖4 深圳某屠宰場近5年檢出豬圓環(huán)病毒豬流行趨勢圖

圖5 2014～2018年豬圓環(huán)病毒豬占病豬總數(shù)比例

5 綜合防控措施

5.1 養(yǎng)殖戶防控措施

第一，應(yīng)定期對生豬進行疫病監(jiān)測，建立合理的免疫程序。但要注意對仔豬不要過早或過多的接種，以免仔豬發(fā)生免疫接種應(yīng)激；第二，加強飼養(yǎng)管理，加強豬舍通風(fēng)，建立科學(xué)的消毒制度，嚴(yán)格管控進出人員，豬群分區(qū)管理，不同來源和日齡的豬不得混養(yǎng)；第三，定期在飼料中添加抗生素類藥物如支原凈、金霉素、阿莫西林等，對預(yù)防本病或降低發(fā)病率有一定作用，這主要是因為抑制了豬群中的一些常見細(xì)菌性病原體，增強了豬群抵抗力[3]。如果早期發(fā)現(xiàn)疑似病豬，要隔離觀察或淘汰。

5.2 生豬屠宰場防控措施

第一，到規(guī)模化養(yǎng)殖場購買生豬，與養(yǎng)殖場建立良好長效溝通機制，從源頭把好生豬質(zhì)量關(guān)；第二，加強運輸管理，減少因運輸產(chǎn)生的各種應(yīng)激因素；第三，嚴(yán)格落實滅鼠、消毒制度，進一步提升屠宰場待宰欄環(huán)境。

5.3 屠宰檢疫環(huán)節(jié)防控措施

加強檢疫人員專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)，掌握該病臨床診斷要點；開展流行病學(xué)調(diào)查，做好追蹤溯源工作，及時將病豬產(chǎn)地信息反饋給源產(chǎn)地；督促企業(yè)建立科學(xué)消毒計劃，嚴(yán)格把控進出人員；普及豬圓環(huán)病毒病相關(guān)知識，做好疫情輿論工作。