陳偉巍， 王 敏， 吳明輝

(湖北江漢油田總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科， 湖北 潛江 433124)

帕金森病是一種發(fā)病率僅次于阿爾茨海默病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，其發(fā)病機制除了與遺傳、年齡、腦中路易小體沉積和黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元退行性變有關(guān)外，還與氧化應(yīng)激關(guān)系密切。氧化應(yīng)激損傷被認(rèn)為是帕金森病發(fā)病的重要環(huán)節(jié)[1-2]。神經(jīng)元進(jìn)行性丟失被認(rèn)為是神經(jīng)退行性疾病的重要病理特征，而氧化應(yīng)激在促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮著重要作用。神經(jīng)元中含有較低的抗氧化活性的谷胱甘肽和較豐富的對自由基敏感的多不飽和脂肪酸，使其清除自由基能力減弱而遭受自由基攻擊能力增強。因此，減輕氧化應(yīng)激對神經(jīng)元細(xì)胞損傷是控制和治療帕金森病發(fā)生發(fā)展的重要策略。硫氧還蛋白1(thioredoxin 1，Trx-1)是一種廣泛分布于生物體內(nèi)的抗氧化蛋白，通過巰基-二硫鍵相互轉(zhuǎn)換在維持和調(diào)節(jié)細(xì)胞的氧化還原過程中發(fā)揮著重要作用；核因子κB(nuclear factor κB, NF-κB)是細(xì)胞內(nèi)重要的核轉(zhuǎn)錄因子，通過調(diào)控下游多種基因的表達(dá)參與細(xì)胞的生長發(fā)育、炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)和細(xì)胞凋亡等過程，與包括帕金森病在內(nèi)的多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生關(guān)系密切[3-4]。已有研究[5-7]發(fā)現(xiàn)，Trx-1可通過增強DJ-1基因的表達(dá)調(diào)節(jié)帕金森病中的自噬和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，Trx-1可調(diào)控NF-κB活性參與細(xì)胞的氧化應(yīng)激過程，但Trx-1通過NF-κB信號通路調(diào)控帕金森病氧化應(yīng)激損傷的機制并不明確。1-甲基-4-苯基吡啶離子(1-methyl-4-phenylpyridinium，MPP+)是一種可引起神經(jīng)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的神經(jīng)毒，作為氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型的誘導(dǎo)劑[8-9]被用于研究帕金森病的發(fā)病機制。本研究以大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞為研究對象，通過MPP+刺激構(gòu)建氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型，觀察Trx-1通過NF-κB信號通路對氧化應(yīng)激損傷的影響，以期為帕金森病的發(fā)生發(fā)展機制及治療提供新的線索。

材 料 和 方 法

1 主要材料

大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞株購自中國上海典型培養(yǎng)物儲備中心。MTT試劑(批號：M2128)和MPP+(批號：D048)購自Sigma；胎牛血清(批號：SH41289)購自Gibco-Brl；高糖DMEM培養(yǎng)基(批號：SH30022.01C)購自HyClone；抗NF-κB p65抗體(批號：2459)和抗IκB-α抗體(批號：3465)購自美國凱基生物公司；RIPA裂解液(批號：P0013C)購自上海碧云天生物研究所；抗p-IκBα抗體(批號：ab7219)和抗p-NF-κB p65抗體(批號：ab95022)購自Abcam；抗β-actin抗體(批號：160916)購自Santa Cruz；辣根過氧化酶標(biāo)記的 II 抗(批號：160915)購于北京中杉金橋公司；丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量檢測試劑盒(批號：20150816)、超氧化物歧化酶(super-oxide dismutase, SOD)活力檢測試劑盒(批號：20150722)和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase, LDH)活力檢測試劑盒(批號：20150713)購于南京建成有限公司。

2 方法

2.1細(xì)胞培養(yǎng) 采用含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基于37 ℃、 5% CO2條件的細(xì)胞培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)PC12細(xì)胞, 選取第4代對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實驗。

2.2氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型的建立 將PC12細(xì)胞以每孔5×104個種植于96孔細(xì)胞板上，將其隨機分為control組(加入等量培養(yǎng)液)、1 mmol/L MPP+組(加入濃度為1 mmol/L的MPP+)、3 mmol/L MPP+組(加入濃度為3 mmol/L的MPP+)和5 mmol/L MPP+組(加入濃度為5 mmol/L的MPP+)。置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)常規(guī)培養(yǎng)過夜。采用MTT法檢測細(xì)胞活力，試劑盒檢測細(xì)胞上清液中LDH和SOD的活性及MDA含量。后期，將PC12細(xì)胞隨機分為control組(加入等量培養(yǎng)液)、3 mmol/L MPP+組(加入濃度為3 mmol/L的MPP+)和3 mmol/L MPP++佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)組(加入濃度為3 mmol/L的MPP+和NF-κB激活劑PMA)，經(jīng)MPP+和PMA作用24 h后，采用MTT法檢測細(xì)胞活力，試劑盒檢測細(xì)胞上清液中LDH和SOD的活性及MDA含量。

2.3MTT法檢測細(xì)胞活力 將MPP+處理24 h后的PC12細(xì)胞以每孔3×104個接種至96孔細(xì)胞板上，孵箱內(nèi)培養(yǎng)24 h后，每孔加入20 μL MTT試劑(濃度為5 g/L)作用24 h。棄培養(yǎng)液，加入二甲基亞砜充分溶解MTT結(jié)晶。上酶標(biāo)儀檢測各組細(xì)胞在490 nm處的吸光度(A)值。以藥物組A均值與對照組A均值的百分比計算各組細(xì)胞的相對活力。

2.4細(xì)胞上清液中LDH和SOD活性及MDA含量的檢測 收集培養(yǎng)結(jié)束的PC12細(xì)胞上清液，根據(jù)試劑盒說明書步驟分別檢測LDH和SOD活性及MDA含量。

2.5Western blot檢測蛋白水平 采用RIPA細(xì)胞裂解液提取PC12細(xì)胞的總蛋白，并采用BCA法定量總蛋白。向蛋白樣品中加入等體積的上樣緩沖液于沸水浴中變性3～5 min后，采用微量加樣器以每孔50 μg蛋白樣品上樣至SDS-PAGE凝膠孔中行分離。待電泳結(jié)束后電轉(zhuǎn)至PVDF膜上。以脫脂奶粉濃度為5%的TBST溶液封閉1 h后，加入封閉液稀釋的 I 抗(1∶1 000)于4 ℃下孵育24 h。棄培養(yǎng)液后，采用封閉液洗滌10 min，洗滌3次后，加入封閉液稀釋的 II 抗(1∶2 000)于37 ℃下孵育1 h。封閉液再次洗滌后，加入化學(xué)發(fā)光劑暗室內(nèi)顯影曝光，凝膠成像系統(tǒng)掃描分析。

2.6慢病毒感染 將對數(shù)生長期的PC12細(xì)胞以每孔1×105個細(xì)胞接種至6孔細(xì)胞板上，將其隨機分為control組(加入等量培養(yǎng)液)、3 mmol/L MPP+組(加入3 mmol/L MPP+作用48 h)、3 mmol/L MPP++NC組(Ad-GFP空載體的陰性對照慢病毒感染24 h后，加入3 mmol/L MPP+作用24 h)和3 mmol/L MPP++ Trx-1組(以含Ad-Trx-1-GFP序列的慢病毒感染24 h后，加入3 mmol/L MPP+作用24 h)，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至60%融合度時更換培養(yǎng)液，加入6 mg/L polybrene，并按照實驗分組以MOI=10加入慢病毒進(jìn)行感染。其中，Ad-GFP空載體的陰性對照慢病毒和含Ad-Trx-1-GFP 序列的慢病毒載體是由武漢轉(zhuǎn)導(dǎo)生物實驗室設(shè)計完成，慢病毒載體系統(tǒng)購于上海吉凱基因公司。感染48 h后，分別采用Western blot檢測細(xì)胞中Trx-1、NF-κB p65、IκBα、p-NF-κB p65和p-IκBα的蛋白水平，MTT法檢測細(xì)胞的存活率，試劑盒檢測細(xì)胞上清液中LDH和SOD活性及MDA含量。后期實驗另設(shè)3 mmol/L MPP++ Trx-1+吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)組(以含Ad-Trx-1-GFP序列的慢病毒感染24 h后，加入3 mmol/L MPP+和NF-κB信號通路抑制劑PDTC作用24 h)，經(jīng)慢病毒感染和給藥處理結(jié)束后，采用MTT法和試劑盒分別檢測細(xì)胞存活率和細(xì)胞上清液中LDH和SOD活性及MDA含量。

3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較使用單因素方差分析，組間多重比較采用SNK-q檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 MPP+對PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響

濃度為1、3和5 mmol/L的MPP+處理PC12細(xì)胞24 h后，與control組相比,PC12細(xì)胞的活力和細(xì)胞上清液中SOD的活性明顯降低，而細(xì)胞上清液中的LDH活性和MDA含量明顯升高(P<0.05)；且3 mmol/L MPP+和5 mmol/L MPP+的作用明顯大于1 mmol/L MPP+(P<0.05)，而3 mmol/L MPP+和5 mmol/L MPP+組間差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性(P>0.05)，見表1。故后期采用3 mmol/L MPP+進(jìn)行實驗。

表1 MPP+對PC12細(xì)胞活力、上清液中LDH和SOD活性及MDA含量的影響

Table 1.The effect of MPP+on the cell viability, the activity of LDH and SOD, and MDA content in the culture supernatant of PC12 cells (Mean±SD.n=3)

GroupCell viability (%)LDH (×103U/L)MDA (μmol/L)SOD (×103 U/L)Control100.00±10.0934.40±4.6012.75±1.1346.70±3.231 mmol/L MPP+82.60±7.30?49.60±5.50?17.31±1.24?38.32±2.25?3 mmol/L MPP+51.20±6.10?#78.20±6.40?#27.57±1.55?#27.13±2.31?#5 mmol/L MPP+48.70±6.80?#83.10±6.80?#29.73±1.79?#25.34±2.36?#

*P<0.05vscontrol group;#P<0.05vs1 mmol/L MPP+group.

2 MPP+對PC12細(xì)胞中Trx-1蛋白表達(dá)的影響

不同濃度(1、3和5 mmol/L)的MPP+刺激PC12細(xì)胞后，Trx-1蛋白的表達(dá)較control組明顯降低(P<0.05)；且3 mmol/L MPP+組和5 mmol/L MPP+組細(xì)胞中Trx-1蛋白的表達(dá)水平明顯低于1 mmol/L MPP+組，而3 mmol/L MPP+組和5 mmol/L MPP+組間的差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性(P>0.05)，見圖1。

Figure 1.The protein expression of Trx-1 in PC12 cells was detected by Western blot. Mean±SD.n=3.*P<0.05vscontrol group;#P<0.05vs1 mmol/L MMP+group.

圖1 Western blot檢測PC12細(xì)胞中Trx-1蛋白的表達(dá)結(jié)果

3 Trx-1過表達(dá)對PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響

Western blot結(jié)果顯示，3 mmol/L MPP+組細(xì)胞中Trx-1蛋白的表達(dá)水平明顯低于control組(P<0.05)，3 mmol/L MPP++ Trx-1組明顯高于3 mmol/L MPP+組(P<0.05)，而3 mmol/L MPP++ NC組與3 mmol/L MPP+組間的差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性(P>0.05)，見圖2、表2。與control組相比，3 mmol/L MPP+能夠明顯降低PC12細(xì)胞的活力和細(xì)胞上清液中SOD的活性(P<0.05)，且顯著升高細(xì)胞上清液中LDH活性和MDA含量(P<0.05)；與3 mmol/L MPP+組相比，3 mmol/L MPP++ Trx-1組細(xì)胞的活力和SOD活性顯著升高(P<0.05)，而LDH活性和MDA含顯著降低(P<0.05)；3 mmol/L MPP++ NC組與3 mmol/L MPP+組間細(xì)胞活力、LDH活性、SOD活性和MDA含量的差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性(P>0.05)，見表2。

Figure 2.The infection efficiency of lentivirus was detected by Western blot.

圖2 Western blot檢測慢病毒的感染效率

4 Trx-1過表達(dá)對PC12細(xì)胞中NF-κB信號通路的影響

Western blot結(jié)果顯示，各組PC12細(xì)胞中NF-κB p65和IκBα蛋白表達(dá)的差異均無統(tǒng)計學(xué)顯著性(P>0.05)；3 mmol/L MPP+組細(xì)胞中p-NF-κB p65和p-IκBα的蛋白水平均明顯高于control組(P<0.05)，3 mmol/L MPP++Trx-1組中p-NF-κB p65和p-IκBα的蛋白水平較3 mmol/L MPP+組明顯降低(P<0.05)，而3 mmol/L MPP++NC組與3 mmol/L MPP+組間的差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性(P>0.05)，見圖3、表3。

表2 Trx-1過表達(dá)對MPP+刺激下PC12細(xì)胞的活力、 上清液LDH和SOD活性及MDA含量的影響

Table 2.The effect of Trx-1 over-expression on the cell viability, and the supernatant LDH and SOD activity and MDA content of the PC12 cells under MPP+stimulation (Mean±SD.n=3)

GroupTrx-1 expressionCell viability (%)LDH (×103 U/L)MDA (μmol/L)SOD (×103 U/L)Control1.00±0.12100.00±11.3034.40±4.6012.75±1.1346.70±3.233 mmol/L MPP+0.63±0.05?50.60±6.40?76.50±6.80?24.51±1.35?28.45±2.71?3 mmol/L MPP++ NC0.68±0.06?52.30±5.40?75.10±7.20?25.30±1.48?27.64±2.94?3 mmol/L MPP++ Trx-11.74±0.14?#82.30±7.56?#57.18±5.40?#19.11±1.43?#37.16±2.38?#

*P<0.05vscontrol group;#P<0.05vs1 mmol/L MPP+group.

Figure 3.The protein levels of NF-κB signaling pathway-related molecules detected by Western blot.

圖3 Western blot檢測NF-κB信號通路相關(guān)蛋白的水平

5 NF-κB信號通路對PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響

與control組相比，3 mmol/L MPP+組和control+ PMA組細(xì)胞的活力和SOD活性均明顯降低(P<0.05)，而LDH活性和MDA含量均明顯升高(P<0.05)；給予100 μg/L NF-κB信號通路激活劑PMA處理后，明顯增強了MPP+對PC12細(xì)胞活性的抑制作用并加重了細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷(P<0.05)，見表4。

6 Trx-1通過NF-κB信號通路減輕MPP+對PC12細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷

3 mmol/L MPP+組細(xì)胞的活力和SOD活性明顯低于control組(P<0.05)，LDH活性和MDA含量則明顯高于control組(P<0.05)；給予100 μmol/L NF-κB信號通路抑制劑PDTC或Trx-1過表達(dá)后，MPP+對PC12細(xì)胞的上述作用均明顯減弱(P<0.05)；同時，給予PDTC后，Trx-1過表達(dá)恢復(fù)MPP+刺激下PC12細(xì)胞的活力和減輕氧化應(yīng)激損傷的作用明顯增強(P<0.05),見表5。

討 論

本研究中以1、3和5 mmol/L MPP+處理大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞24 h后，PC12細(xì)胞的存活率和細(xì)胞上清液中SOD活性明顯降低，而細(xì)胞上清液中LDH活性和MDA含量明顯升高。 SOD是一種可將超氧陰離子轉(zhuǎn)化為過氧化氫的抗氧化酶，其活力的高低可間接反映機體清除自由基的能力大??；MDA是一種脂質(zhì)過氧化物，其含量的高低可間接反映機體遭受自由基攻擊的程度；LDH是活細(xì)胞胞漿內(nèi)酶，在細(xì)胞損傷時，細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變使LDH釋放到培養(yǎng)液中，細(xì)胞液中LDH活性大小可較好地反映出細(xì)胞膜的損傷程度；三者常被作為反映細(xì)胞氧化應(yīng)激的重要指標(biāo)[10-11]。 結(jié)果表明MPP+對PC12細(xì)胞有一定的毒性，并誘導(dǎo)PC12細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。

表3 Trx-1過表達(dá)對MPP+刺激下PC12細(xì)胞中NF-κB信號通路相關(guān)蛋白水平的影響

Table 3.The effect of Trx-1 over-expression on the protein levels of NF-κB signaling pathway-related molecules in the PC12 cells stimulated with MPP+(Mean±SD.n=3)

Groupp-NF-κB p65NF-κB p65p-IκBαIκBαControl1.00±0.081.00±0.071.00±0.111.00±0.083 mmol/L MPP+1.89±0.15?0.94±0.091.48±0.13?0.94±0.103 mmol/L MPP++NC1.81±0.14?0.97±0.081.52±0.17?1.35±0.15?3 mmol/L MPP++Trx-11.31±0.12?#1.05±0.110.76±0.06?#1.25±0.14

*P<0.05vscontrol group;#P<0.05vs3 mmol/L MPP+group.

表4 PMA對MPP+刺激下PC12細(xì)胞活力、上清液LDH和SOD活性及MDA含量的影響

Table 4.The effect of PMA on cell viability, the activity of LDH and SOD, and MDA content in the culture supernatant of PC12 cells with MPP+stimulation (Mean±SD.n=3)

GroupCell viability (%)LDH (×103 U/L)MDA (μmol/L)SOD (×103 U/L)Control100.00±9.2031.40±4.1013.75±1.5744.78±3.33Control+PMA63.31±8.22?54.76±7.81?21.83±2.39?23.79±2.14?3 mmol/L MPP+49.60±6.10?78.50±6.50?25.51±1.48?27.18±2.64?3 mmol/L MPP++PMA28.70±9.56#96.18±5.80#33.11±1.54#18.12±2.51#

*P<0.05vscontrol group;#P<0.05vs3 mmol/L MPP+group.

表5 Trx-1調(diào)控NF-κB信號通路對PC12細(xì)胞活力、上清液中LDH和SOD活性及MDA含量的影響

Table 5.The effects of Trx-1-regulated NF-κB signaling pathway on the cell viability, LDH, SOD activities and MDA content in the culture supernatant of PC12 cells with MPP+stimulation (Mean±SD.n=3)

GroupCell viability (%)LDH (×103 U/L)MDA (μmol/L)SOD (×103 U/L)Control100.00±12.0332.19±4.6012.47±1.1345.47±3.073 mmol/L MPP+51.70±5.6075.58±5.8023.58±1.3526.24±2.533 mmol/L MPP++PDTC65.42±5.71?66.24±6.19?19.49±1.88?35.07±3.28?3 mmol/L MPP++NC49.50±5.1077.61±7.3026.17±1.4224.37±2.673 mmol/L MPP++Trx-162.20±7.83#63.45±5.40#18.51±1.43#38.64±2.21#3 mmol/L MPP++Trx-1+PDTC75.16±6.13&48.81±7.27&10.11±2.17&43.36±2.04&

*P<0.05vs3 mmol/L MPP+group;#P<0.05vs3 mmol/L MPP++NC group;&P<0.05vs3 mmol/L MPP++Trx-1 group.

本研究以1、3和5 mmol/L MPP+處理后，PC12細(xì)胞中Trx-1的表達(dá)明顯受到抑制，提示Trx-1可能在帕金森病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。通過構(gòu)建含Ad-Trx-1-GFP序列的慢病毒載體成功上調(diào)Trx-1表達(dá)后，3 mmol/L MPP+引起的PC12細(xì)胞存活率和SOD活性的降低以及LDH活性和MDA含量的升高這一系列變化均明顯減弱。Trx-1是一種分子量為12 kD的多功能蛋白，廣泛分布于原核和真核生物中，可催化蛋白質(zhì)二硫鍵和巰基的轉(zhuǎn)換，常作為抗氧化劑參與細(xì)胞的氧化還原反應(yīng)[12-13]。Trx-1表達(dá)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可通過下調(diào)TGF-β表達(dá)減輕博萊霉素誘導(dǎo)的硬皮病皮膚纖維化和氧化應(yīng)激[14]；Trx1可通過維持Prdx的表達(dá)來抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化應(yīng)激，從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用[15]；此外，上調(diào)Trx-1表達(dá)可降低活性氧的產(chǎn)生，增加抗氧化防御能力，進(jìn)而減輕葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的結(jié)腸炎[16]。結(jié)果表明Trx-1過表達(dá)可減輕MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。結(jié)果提示，Trx-1在帕金森病的發(fā)生和發(fā)展過程中可通過增強抗氧化應(yīng)激能力發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

采用NF-κB信號通路激活劑PMA處理PC12細(xì)胞后，MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷明顯加重；而給予NF-κB信號通路抑制劑PDTC處理PC12細(xì)胞后，Trx-1過表達(dá)對MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的改善作用明顯增強。氧化應(yīng)激反應(yīng)涉及到多種信號通路的調(diào)控，NF-κB信號通路就是其中之一。NF-κB是一種研究較多的核轉(zhuǎn)錄因子，正常情況下以無活性的p65/p50/IκBα三聚體復(fù)合物存在，其中IκBα是NF-κB抑制蛋白，當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激或炎癥因子刺激時，IκBα磷酸化降解釋放p65/p50二聚體進(jìn)入細(xì)胞核，激活下游相關(guān)基因，進(jìn)而參與調(diào)控細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答等[17-18]。NF-κB信號通路激活可通過調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白如Bcl-2、p53和Par-4等的表達(dá)誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，造成細(xì)胞損傷，與帕金森病的發(fā)生和發(fā)展關(guān)系密切[19-20]。結(jié)果表明，在MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷過程中，NF-κB信號通路被激活，而Trx-1過表達(dá)可通過抑制NF-κB信號通路的活化減輕MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。

綜上所述，Trx-1可抑制NF-κB信號通路增強細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激能力，減輕氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷，進(jìn)而起到神經(jīng)保護(hù)的作用。該結(jié)果為帕金森病發(fā)生發(fā)展的分子機制和治療方向提供了新的線索和依據(jù)。